Indocianina verde Angiografia (o ICGA) eseguita tramite iniezione coda vena offre immagini di alta qualità dei corsi tempo ICGA di caratterizzare anomalie nel topo coroide.
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Articolo metodologico
Rilevamento Anomalie nella coroide Vasculature in un modello murino di età degenerazione maculare da Time-course verde indocianina angiografia
In questo articolo
Sommario
Abstract
Indocianina verde Angiografia (o ICGA) è una tecnica eseguita da oculisti per diagnosticare anomalie del sistema vascolare della retina e della coroide di varie malattie oculari come la degenerazione maculare legata all'età (AMD). ICGA è particolarmente utile per l'immagine della vascolarizzazione della coroide posteriore dell'occhio grazie alla sua capacità di penetrare attraverso lo strato pigmentato con il suo spettro infrarosso. Decorso ICGA può essere diviso in inizio, metà e fasi tardive. Le tre fasi forniscono preziose informazioni sulla patologia di problemi agli occhi. Anche se il tempo portate da ICGA endovenosa (IV) iniezione è ampiamente usato in clinica per la diagnosi e la gestione dei problemi coroide, ICGA mediante iniezione intraperitoneale (IP) è comunemente utilizzato nella ricerca animale. Qui abbiamo dimostrato la tecnica per ottenere immagini ad alta risoluzione ICGA volta portate nei topi tramite iniezione coda vena e confocale laser oftalmoscopia a scansione. Abbiamo usato questa tecnica per l'immagine della coroide lesioni in un modello murino di età-correlate degenerazione maculare. Anche se è molto più facile introdurre ICG alla vascolarizzazione mouse IP, i nostri dati indicano che è difficile ottenere immagini riproducibili corso tempo ICGA da IP-ICGA. Al contrario, ICGA tramite iniezione coda vena fornisce ICGA immagini time-Corso di alta qualità paragonabili a studi umani. Inoltre, abbiamo dimostrato che ICGA eseguita su topi albino dà immagini più chiare dei vasi coroideali quella eseguita su topi pigmentati. Suggeriamo che il tempo-corso IV-ICGA dovrebbe diventare una pratica standard nella ricerca di AMD basata su modelli animali.
Introduzione
Indocianina angiografia verde (ICGA) è un test diagnostico per problemi di immagine legati ai vasi sanguigni negli occhi. Lo spettro di assorbimento ICG varia 790-805 nm mentre lo spettro di emissione varia 770-880 nm con il picco di emissione a 835 nm 1. Questo è diverso dall'altro colorante popolare, fluoresceina sodica, il cui spettro rientra nel campo del visibile. Lo spettro infrarosso permette ICG di penetrare attraverso l'epitelio pigmentato retinico (RPE), fluido sieroematico, e essudati lipidici, ognuno dei quali può facilmente bloccare la visualizzazione da base di sodio fluoresceina angiografia con fluoresceina (FA). ICG è del 98% legato....
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Protocollo
1. Preparazione degli strumenti
- La procedura viene eseguita in una sala operatoria in un impianto animale.
- Indossare mascherine, cuffie capelli, camici chirurgici, piede copertine sterili, guanti prima di iniziare l'esperimento.
- Riscaldare l'acqua in un becher a ~ 40 ° C su una piastra.
- Collocare un tampone sterile blu sulla cima di una piastra elettrica che verrà utilizzato successivamente per mantenere la temperatura corporea del mouse durante l'imaging. Accendere il riscaldamento pad.
- Preparare il sistema di imaging:
- Togliere il coperchio antipolvere e accendere il laser.
- Estrarre la....
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Risultati
Abbiamo eseguito andamento nel tempo ICGA in HtrA1 topi transgenici e fratellini WT di controllo, che sono entrambi sullo sfondo CD1. Il CD1 sfondo albino è stato scelto per facilitare indocianina angiografia con verde (ICGA) immagini (vedi la discussione). Alcuni aneurisma come dilatazioni cominciarono ad apparire nella prima fase nel topo HTRA1 (Figura 2, una freccia rossa indica la dilatazione sulla punta di una nave e un cerchio rosso indica un tipo di cluster di lesione polypoidal). Vasi coroideali.......
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Discussione
In questo studio, abbiamo dimostrato l'uso di ICGA per immagini delle lesioni della coroide in HtrA1 topi transgenici. Le caratteristiche del primo, mezzo, e fasi tardive della ICGA nel nostro modello di topo corrispondono il decorso bene negli studi umani 1. Questo è importante per fare meglio il confronto tra patologia e animali fenotipi umani, che sono di valore inestimabile per la ricerca sui meccanismi fisiopatologici e strategie di trattamento di condizioni relative alla coroide come AMD.
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Dichiarazioni
YF è un inventore di due brevetti pendenti che sono rilevanti per il modello di topo AMD utilizzato in questo lavoro. SK, ZB, e ADJ hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato sostenuto da NIH concedere 1R01EY022901, il Career Development Award da Research per prevenire la cecità (RPB), CMReeves & MA Reeves Foundation, E. Matilda Ziegler Foundation for the Blind, Cavalieri Templari Eye Foundation, e una sovvenzione illimitata al Dipartimento di Oftalmologia presso l'Università dello Utah da RPB. Ringraziamo Balamurali Ambati per l'assistenza tecnica sul Spectralis Multi-Modalità Imaging System e Zhang Tao per le discussioni e commenti sul manoscritto.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Sistema di imaging multimodale Spectralis | Heidelberg Engineering, Germania | SPECTRALIS HRA+OCT | |
| Soluzione oftalmica tropicale (1%) | Bausch & Lomb | NDC 24208-585-64 | per la dilatazione delle pupille |
| GenTeal Gel | Genteal | NDC 58768-791-15 | gel per gli occhi lubrificante trasparente |
| Ketamina | Vedco Inc | NDC 50989-996-06 | |
| Xilazina | Lloyd Laboratories | NADA 139-236 | |
| Acepromazina | Vedco Inc | NDC 50989-160-11 | |
| 32-G Ago | Steriject | PRE-32013 | |
| Siringa da 1 ml | BD | 309659 | |
| Indocianina verde | Pfaltz & Bauer | I01250 |
Riferimenti
- Duane, T. D., Tasman, W., Jaeger, E. A. Chapter 4a, Indocyanine Green Angiography. Duane's clinical ophthalmology on CD-ROM. , Lippincott Williams & Wilkins. Philadelphia. (2002).
- Alfaro, D. V. Age-related macular degeneration : a comprehensive textbook. , Lippincott Williams & Wilkins. (2006).
- Yannuzzi, L. A. Indocyanine green angiography: a perspective on use in the clinical setting. Am. J. Ophthalmol. 151, 745-751 (2011....
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Ristampe e permessi
