Un seno cancro al cervello metastasi modello del mouse viene stabilito con ecografia guidata iniezione intracardiaca delle cellule MDA-MB231/Br-GFP. Sviluppo delle metastasi intracraniche multifocali è stato monitorato longitudinalmente utilizzando ad alta risoluzione di 9.4 T MRI.
È richiesta un abbonamento a JoVE per visualizzare questo contenuto. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Articolo metodologico
Ultrasound Imaging guidata intracardiaca iniezione di sviluppare un modello murino di Breast Cancer metastasi cerebrali Seguito da longitudinale MRI
In questo articolo
Sommario
Abstract
Metastasi cerebrali Cancro al seno, che si verificano nel 30% dei pazienti con carcinoma mammario in stadio IV, è associata ad alta mortalità. La sopravvivenza mediana è di soli 6 mesi. È fondamentale disporre di adeguati modelli animali per imitare la diffusione emodinamico delle cellule metastatiche nello scenario clinico. Qui, stiamo introducendo l'uso di piccolo ecografia animale per guidare un'iniezione accurata delle cellule tumorali mammarie tropicale cervello nel ventricolo sinistro di topi nudi atimici. MRI longitudinale viene utilizzato per valutare iniziazione intracranica e la crescita delle metastasi cerebrali. Iniezione intracardiaca ecoguidata garantisce non solo un'iniezione accurata e pertanto un più alto tasso di successo, ma anche diminuito significativamente il tasso di mortalità, rispetto al nostro precedente procedura manuale. In vivo alta risoluzione MRI permette la visualizzazione di lesioni iperintense multifocali, piccolo come 310 micron di diametro sulle immagini T 2-pesate a tre settimane dopo l'iniezione. Follow-up MRI rivela la crescita del tumore intracranico e aumento del numero di metastasi che distribuiscono in tutto il cervello.
Introduzione
Cervello metastasi è il tumore maligno intracranica più comune negli adulti. La prognosi è estremamente povero, con una sopravvivenza mediana di 4-6 mesi, anche con un trattamento aggressivo. Il cancro al seno è uno dei tre principali tumori primari con alta morbilità di metastasi cerebrali 1-3. Diverse linee di cancro al seno brain-tropico sono in grado di sviluppare metastasi cerebrali dopo intracardiaca o iniezione intracarotidea 4. Iniezione diretta di cellule tumorali nel ventricolo sinistro può ignorare il letto capillare polmonare e quindi aumentare l'incidenza di formare metastasi cerebrali minimizzando metastasi viscerali. La linea ....
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Protocollo
Tutte le procedure di animali sono stati approvati dal Comitato Istituzionale cura degli animali ed uso del University of Texas Southwestern Medical Centro.
1. Preparazione delle cellule MDA-MB231/Br-GFP
- Recuperare e coltivare le cellule MDA-MB231/Br-GFP (gentilmente fornite da DRS. Palmieri e Steeg, NCI) in DMEM contenente 10% FBS, 1% glutamina e 1% di penicillina / streptomicina.
- Osservare la condizione delle cellule e colore del mezzo, e sostituire medio ogni 2-3 giorni.
- Trypsinize e raccogliere le cellule quando l'80% di confluenza è raggiunto, come indicato dal passo 1.3.1-1.3.5:
- Rimuovere ....
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Risultati
Con l'alta risoluzione spaziale della RM (78 micron di risoluzione aereo), lesioni iperintense possono essere identificati piccolo come 310 micron di diametro (Figura 2). Dal momento che le metastasi in questo studio sono molto piccoli e lo sviluppo di necrosi ed edema è minima, la lesione iperintensa su magliette immagini 2-pesate davvero rappresentato la massa tumorale.
MRI studi longitudinali permettono la valutazione vivo non invasiva della cresci.......
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Discussione
Nel presente studio, abbiamo dimostrato che l'ecografia iniezione ventricolare sinistra di imaging guidata garantisce l'accuratezza modo che è stata osservata ogni animale in questo studio sviluppato metastasi cerebrali e non la morte degli animali. La bellezza di iniezione immagine-guida è che il percorso di penetrazione dell'ago della pelle e, infine, nel ventricolo sinistro può essere monitorato e regolato sotto la foto, che è distinta dalla procedura manuale che richiede severe punti di repere anatomici .......
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Dichiarazioni
Nessun conflitto di interessi dichiarati.
Ringraziamenti
Siamo grati a Drs. Diane Palmieri e Patricia Steeg di NSC per averci fornito le cellule MDA-MB231Br. Ringraziamo il Dr. Ralph Mason, Mr. Jason Reneau e la signora Ramona Lopes per il supporto tecnico e collegiale. Questo lavoro è stato sostenuto in parte dal IDEA DOD Awards W81XWH-08-1-0583 e W81XWH-12-1-0317. Esperimenti di risonanza magnetica sono stati eseguiti in Advanced Imaging Research Center, una struttura NIH BTRP # P41-RR02584, e l'iniezione intracardiaca ecoguidata è stato eseguito con VisualSonics Vevo 770 sotto 1S10RR02564801.
....Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| DMEM | HyClone | SH30022.01 | |
| Tripsina | Mediatech | 25-051-C1 | |
| Contatore di cellule automatico | BioRad | TC10 | |
| Isoflurano | Baxter International Inc. | 1001936060 | |
| Sistema di imaging ad alta risoluzione VisualSonics Vevo 770 | Visual Sonics Inc. | ||
| Magnete a foro orizzontale da 9,4 T con sistema Varian INOVA Unity | Agilent | ||
| Composto O.C.T | Sakura Finetek USA | 4583 |
Riferimenti
- Schouten, L. J., et al. Incidence of brain metastases in a cohort of patients with carcinoma of the breast, colon, kidney, and lung and melanoma. Cancer. 94, 2698-2705 (2002).
- Lin, N. U., et al. CNS metastases in breast cancer. J. Clin. O....
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Ristampe e permessi
Esplora altri articoli
