Summary

In-situ-Druckbelastung und Correlative Nichtinvasive Bildgebung des Knochen parodontalen Ligament-Zahn-Faser-Joint

Published: March 07, 2014
doi:

Summary

In dieser Studie wird die Verwendung eines in situ-Ladevorrichtung in Verbindung mit Mikro-Röntgenstrahl-Computertomographie zur gemeinsamen Faser Biomechanik diskutiert. Experimentelle Anzeigen erkennbar mit einer Gesamtänderung der Gelenkbiomechanik gehören: 1) reaktionäre Kraft-Verschiebung, dh Zahnbewegung innerhalb der Alveole und ihre reaktionäre Antwort auf Laden, 2) drei-dimensionale (3D) räumliche Konfiguration und Morphometrie, dh geometrische Verhältnis der Zahn mit der Alveole und 3) Veränderungen der Auslesungen 1 und 2 aufgrund einer Änderung in Lastachse, dh konzentrische oder exzentrische Belastung.

Abstract

Diese Studie zeigt eine neuartige Biomechanik Testprotokoll. Der Vorteil dieses Protokolls umfaßt die Verwendung eines in situ-Ladevorrichtung, um eine hochauflösende Röntgenmikroskops gekoppelt ist, wodurch die Visualisierung interner Strukturelemente unter simulierten physiologischen Belastungen und Nässe. Experimentelle Proben gehören intakte Knochen Desmodont (PDL)-Zahn-Faser Gelenke. 1) reaktionäre Kraft-Verschiebung: Zahnverschiebung innerhalb der Alveole und ihre reaktionäre Antwort auf Laden, 2) drei-dimensionale (3D) räumliche Konfiguration Ergebnisse werden drei wichtige Merkmale des Protokolls, wie sie können, um Organebene Biomechanik angewendet werden, veranschaulichen und Morphometrie: geometrische Beziehung des Zahns mit der Alveole und 3) Veränderungen der Auslesungen 1 und 2 aufgrund einer Änderung der Ladeachse, also von konzentrisch zur exzentrischen Belastungen. Die Wirksamkeit der vorgeschlagenen Protokoll wird durch die Kopplung mechanischer te ausgewertet werdenStachel Anzeige in die 3D-Morphometrie und die allgemeine Biomechanik des Gelenks. Darüber hinaus wird diese Technik auf die Notwendigkeit der Versuchsbedingungen äquilibrieren speziell reaktionären Lasten vor Erwerb Tomogramme von Faserverbindungen hervorzuheben. Es sei darauf hingewiesen, dass die vorgeschlagene Protokoll beschränkt sich auf die Prüfung Proben unter ex-vivo-Bedingungen, und dass die Verwendung von Kontrastmitteln Weichgewebe mechanische Antwort visualisieren könnte zu falschen Schlüssen über die Gewebe-und Organebene Biomechanik führen werden.

Introduction

Mehrere experimentelle Methoden weiterhin verwendet werden, um die Biomechanik des diarthrodialen und Faserverbindungen zu untersuchen. Spezifisch für die Zahnorgan Biomechanik Verfahren umfassen die Verwendung von Dehnungsmessstreifen 1-3, Spannungsoptik Verfahren 4, 5, Moiré-Interferometrie 6, 7, elektronischen Specklemuster-Interferometrie 8 und digitale Bildkorrelation (DIC) 9-14. In dieser Studie beinhaltet das innovative Konzept nichtinvasiven Bildgebung mit Röntgenstrahlen, um die inneren Strukturen eines Fasergelenk freizulegen (mineralisierten Geweben und deren Schnittstellen aus weicheren Zonen und Schnittstellen Gewebe wie Bänder) bei Belastung entspricht in vivo-Bedingungen. Ein in situ-Ladevorrichtung mit einem Mikroröntgenmikroskops gekoppelt verwendet. Die Last-Zeit-und Kraft-Verschiebungskurven wird als Mol-Interesse in einem frisch geernteten Ratte Hemi-Unterkiefer geladen gesammelt werden. Die main Ziel der Ansatz in dieser Studie präsentiert wird, um die Wirkung von dreidimensionalen Morphologie der Zahn-Knochen durch den Vergleich Bedingungen bei betonen: 1) Leerlauf und unter Last, und wenn 2) konzentrisch und exzentrisch geladen. Wodurch die Notwendigkeit für Schnitt Proben und Experimente auf ganze Organe intakt unter feuchten Bedingungen durchführen wird für maximale Erhaltung der 3D-Spannungszustand zu ermöglichen. Es öffnet sich ein neues Gebiet der Untersuchung dynamischer Prozesse im Verständnis des Komplexes unter verschiedenen Belastungsszenarien.

In dieser Studie wurden die Methoden zur Prüfung PDL Biomechanik innerhalb einer intakten Fasergelenk einer Sprague Dawley-Ratte, wird ein Joint als optimale Biotechnik als Modellsystem beschrieben werden. Die Experimente werden in der Reihenfolge auf drei wichtige Merkmale des gemeinsamen markieren, wie sie Organebene beziehen, umfassen Biomechanik-Simulation des Kauens Lasten unter hydratisierten Bedingungen. Die drei Punkte sind: 1) reaktionäre Kraft-Verschiebung:Zahnbewegung innerhalb der Alveole und reaktionären Reaktion auf Belastung, 2) dreidimensionale (3D-) räumlichen Konfiguration und Morphometrie: geometrische Beziehung des Zahns mit der Alveole und 3) Veränderungen der Auslesungen 1 und 2 aufgrund einer Änderung in Ladeachse, also von konzentrischen exzentrischen Lasten. Die drei grundlegenden Auslesungen der vorgeschlagenen Technik kann angewendet werden, um die adaptive Natur der Gelenke bei Wirbeltieren entweder aufgrund von Veränderungen in der funktionellen Anforderungen und / oder Krankheiten zu untersuchen. Veränderung der zuvor genannten Anzeigen, insbesondere die Korrelation zwischen reaktionären Lasten mit Verschiebung, und die daraus resultierenden reaktionären Last-Zeit-und Kraft-Verschiebungskurven bei verschiedenen Belastungsraten können angewendet werden, um Veränderungen in der Gesamt Joint Biomechanik markieren. Die Wirksamkeit der vorgeschlagenen Protokoll wird durch die Kopplung der mechanischen Prüfung Anzeige in die 3D-Morphometrie und die allgemeine Biomechanik des Gelenks ausgewertet werden.

Protocol

Tier Gehäuse und Euthanasie: Alle Tiere in dieser Demonstration verwendet wurden unter keimfreien Bedingungen in Übereinstimmung mit den Richtlinien der Institutional Animal Care und Verwenden Committee (IACUC) und dem National Institute of Health (NIH) untergebracht. Geben Tiere mit Standard-Fest-Pellet Rattenfutter und Wasser ad lib. Euthanize Tiere über eine Zwei-Schritt-Verfahren zur Erstickung mit Kohlendioxid, bilaterale Thorakotomie gemäß dem Standardprotokoll von UCSF d…

Representative Results

Die Einschätzung der Ladevorrichtung "backlash", "Pushback", Steifigkeit und Drift-System unter einer konstanten Last Backlash: Zwischen Be-und Entladen des Zyklus gibt es eine Pause von 3 Sekunden, während der umgekehrte Räder innerhalb des Motors, bevor wahr Entladen beginnt, dh als die Probe zieht weg von der Aufsatzbacke (Abbildung 3). Dieser Zeitraum wird als ein Spiel in dem System, das einen Zeitabschni…

Discussion

Der erste Schritt bei der Schaffung dieses Protokoll beteiligt Bewertung der Steifigkeit der Laderahmen mit Hilfe eines starren Körpers. Basierend auf den Ergebnissen wurde die Steifigkeit signifikant höher, die die Verwendung der Ladevorrichtung zum weiteren Testen von Proben mit deutlich geringeren Steifigkeitswerte. Der zweite Schritt markiert die Fähigkeit des Instrumentes, um verschiedene Steifigkeitswerte unter Verwendung von zwei Phasen der Lade-Entlade-Kurve, die durch einen starren Körper, PDMS-Materialien …

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Die Autoren erkennen an finanzieller Unterstützung NIH / NIDCR R00DE018212 (SPH), NIH/NIDCR-R01DE022032 (SPH), NIH / NIDCR T32 DE07306 (AJ, JDL), NIH / NCRR S10RR026645, (SPH) und die Abteilung für Präventive und Restaurative Zahnwissenschaften und Orofacial Wissenschaften, UCSF. Darüber hinaus sind die Autoren erkennen Xradia Graduate Fellowship (AJ), Xradia Inc., Pleasanton, CA.

Die Autoren danken Dr. Kathryn Grand, UCSF für ihre Unterstützung bei der Nachbearbeitung von Daten; Drs. Stephen Weiner und Gili Naveh, Weizmann Institute of Science, Rehovot, Israel, Dr. Ron Shahar, The Hebrew University of Jerusalem, Israel für ihre speziell für die in-situ-Ladevorrichtung aufschlussreiche Diskussionen. Die Autoren möchten auch Biomaterialien und Bioengineering MicroCT Imaging Facility an der UCSF für den Einsatz von Mikro-XCT-und in-situ-Ladevorrichtung danken.

Materials

Bard Parker Blade BD MEDC-001054
AFM metal disk Ted Pella 16218
Polymethyl methacrylate  GC America N/A
Uni-Etch Bisco E5502EBM
Optibond Solo Plus Kerr Corp N/A
Filtek Flow 3M N/A
Hurculite Ultra Kerr 34346
Tris buffer Mediatech Inc. N/A
Articulating paper
Phosphotungstic Acid Sigma Aldrich HT152

Riferimenti

  1. Popowics, T. E., Rensberger, J. M., Herring, S. W. Enamel microstructure and microstrain in the fracture of human and pig molar cusps. Arch. Oral Biol. 49, 595-605 (2004).
  2. Jantarat, J., Palamara, J. E., Messer, H. H. An investigation of cuspal deformation and delayed recovery after occlusal loading. J. Dent. 29, 363-370 (2001).
  3. Jantarat, J., Panitvisai, P., Palamara, J. E., Messer, H. H. Comparison of methods for measuring cuspal deformation in teeth. J. Dent. 29, 75-82 (2001).
  4. Asundi, A., Kishen, A. A strain gauge and photoelastic analysis of in vivo strain and in vitro stress distribution in human dental supporting structures. Arch. Oral Biol. 45, 543-550 (2000).
  5. Asundi, A., Kishen, A. Advanced digital photoelastic investigations on the tooth-bone interface. J. Biomed. Opt. 6, 224-230 (2001).
  6. Wang, R. Z., Weiner, S. Strain-structure relations in human teeth using Moire fringes. J. Biomech. 31, 135-141 (1998).
  7. Wood, J. D., Wang, R., Weiner, S., Pashley, D. H. Mapping of tooth deformation caused by moisture change using moire interferometry. Dent. Mater. 19, 159-166 (2003).
  8. Dong-Xu, L., et al. Modulus of elasticity of human periodontal ligament by optical measurement and numerical simulation. Angle Orthod. 81, 229-236 (2011).
  9. Li, J., Li, H., Fok, A. S., Watts, D. C. Multiple correlations of material parameters of light-cured dental composites. 25, 829-836 (2009).
  10. Zhang, D., Arola, D. D. Applications of digital image correlation to biological tissues. J. Biomed. Opt. 9, 691-699 (2004).
  11. Zhang, D., Mao, S., Lu, C., Romberg, E., Arola, D. Dehydration and the dynamic dimensional changes within dentin and and enamel. Dent. Mater. 25, 937-945 (2009).
  12. Qian, L., Todo, M., Morita, Y., Matsushita, Y., Koyano, K. Deformation analysis of the periodontium considering the viscoelasticity of the periodontal. 25, 1285-1292 (2009).
  13. Lin, J. D., et al. Biomechanics of a bone-periodontal ligament-tooth fibrous joint. J. Biomech. , (2012).
  14. Qian, L., Todo, M., Morita, Y., Matsushita, Y., Koyano, K. Deformation analysis of the periodontium considering the viscoelasticity of the periodontal. 25, 1285-1292 (2009).
  15. Huelke, D. F., Castelli, W. A. The blood supply of the rat mandible. Anat. Rec. 153, 335-341 (1965).
  16. Chiba, M., Komatsu, K. Mechanical responses of the periodontal ligament in the transverse section of the rat mandibular incisor at various velocities of loading in vitro. J. Biomech. 26, 561-570 (1993).
  17. Natali, A. N., et al. A visco-hyperelastic-damage constitutive model for the analysis of the biomechanical response of the periodontal ligament. J. Biomech. Eng. 130, (2008).
  18. Naveh, G. R., Shahar, R., Brumfeld, V., Weiner, S. Tooth movements are guided by specific contact areas between the tooth root and the jaw bone: A dynamic 3D microCT study of the rat molar. J. Struct. Biol. 177, 477-483 (2012).
  19. Lin, J. D., et al. Biomechanics of a bone-periodontal ligament-tooth fibrous joint. J. Biomech. 46, 443-449 (2013).
  20. Metscher, B. D. MicroCT for comparative morphology: simple staining methods allow high-contrast 3D imaging of diverse non-mineralized animal tissues. BMC Physiol. 9, 11 (2009).
  21. Carrillo, F., et al. Nanoindentation of polydimethylsiloxane elastomers: Effect of crosslinking, work of adhesion, and fluid environment on elastic modulus (vol 20, pg 2820). J. Mater. Res. 21, 535-537 (2006).
  22. Hiiemae, K. M. Masticatory function in the mammals. J. Dent. Res. 46, 883-893 (1967).
  23. Hunt, H. R., Rosen, S., Hoppert, C. A. Morphology of molar teeth and occlusion in young rats. J. Dent. Res. 49, 508-514 (1970).
  24. Komatsu, K., Sanctuary, C., Shibata, T., Shimada, A., Botsis, J. Stress-relaxation and microscopic dynamics of rabbit periodontal ligament. J. Biomech. 40, 634-644 (2007).
  25. Lin, J. D., et al. Biomechanics of a bone-periodontal ligament-tooth fibrous joint. J. Biomech. 46, 443-449 (2013).
  26. Quintarelli, G., Zito, R., Cifonelli, J. A. On phosphotungstic acid staining. I. J. Histochem. Cytochem. 19, 641-647 (1971).
  27. Quintarelli, G., Cifonelli, J. A., Zito, R. On phosphotungstic acid staining. II. J. Histochem. Cytochem. 19, 648-653 (1971).
  28. Quintarelli, G., Bellocci, M., Geremia, R. On phosphotungstic acid staining. IV. Selectivity of the staining reaction. J. Histochem. Cytochem. 21, 155-160 (1973).
  29. Crabtree, W. N., Murphy, W. M. The value of ethanol as a fixative in urinary cytology. Acta Cytol. 24, 452-455 (1980).
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Citazione di questo articolo
Jang, A. T., Lin, J. D., Seo, Y., Etchin, S., Merkle, A., Fahey, K., Ho, S. P. In situ Compressive Loading and Correlative Noninvasive Imaging of the Bone-periodontal Ligament-tooth Fibrous Joint. J. Vis. Exp. (85), e51147, doi:10.3791/51147 (2014).

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