Diagnostic Ultrasound Imaging di funzione mouse Diaframma
Summary
Diagnostica ecografica ha dimostrato di essere efficace nella diagnosi delle diverse malattie respiratorie in soggetti umani e animali. Dimostriamo un protocollo ecografia completa utilizzata da laboratorio del Dr. Zuo per analizzare la cinetica del diaframma in particolare in modelli murini. Questa è anche una tecnica di ricerca non invasiva che può fornire informazioni quantitative sulla funzione dei muscoli respiratori mouse.
Abstract
Analisi Funzione di roditore muscoli scheletrici respiratorio, in particolare il diaframma, viene comunemente eseguita isolando strisce muscolari utilizzando procedure chirurgiche invasive. Anche se questo è un metodo efficace di valutazione in vitro dell'attività diaframma, esso comporta un intervento chirurgico non-sopravvivenza. L'applicazione di non invasiva ecografia come una procedura in vivo è utile in quanto non solo riduce il numero di animali sacrificati, ma è adatto anche per monitorare la progressione della malattia in topi vivi. Così, il nostro metodo di imaging ad ultrasuoni può probabilmente contribuire allo sviluppo di nuove terapie che alleviano lesione muscolare indotto da varie malattie respiratorie. In particolare, nella diagnosi clinica delle malattie polmonari ostruttive, ecografia ha il potenziale di essere utilizzato in combinazione con altri test standard per rilevare l'insorgenza precoce di affaticamento muscolare diaframma. Nel protocollo attuale, si descrive come valutare con precisione diaframma contractilità in un modello murino utilizzando una tecnica diagnostica ecografica.
Introduction
Recentemente, tecniche di imaging ad ultrasuoni di diagnostica sono state applicate a modelli murini di ipertensione renovascolare e pancreas 1,2 cancro. Tuttavia, queste tecniche non sono stati ampiamente utilizzati in roditori respiratoria saggio di funzione muscolare. Pertanto, abbiamo sviluppato un metodo di imaging ad ultrasuoni di diagnostica come un valido strumento per le valutazioni in vivo longitudinali di mobilità del diaframma nei topi.
Ci sono diversi vantaggi per diagnostica ecografica. Per esempio, è invasivo, sicuro, portatile, e consente misurazioni in tempo reale ad un costo relativamente basso 3. In particolare, alcuni dispositivi ad ultrasuoni a bassa frequenza sono stati in grado di rilevare air trapping, una caratteristica clinica della malattia polmonare ostruttiva cronica (BPCO) con lieve a grave limitazione al flusso aereo 4. Così, diagnostica ecografica può servire come un metodo di screening facilmente accessibile e riproducibile per il monitoraggio in tempo reale di disturbi respiratori.
Tecniche di imaging ad ultrasuoni di diagnostica sono spesso applicati agli animali più grandi o soggetti umani. Tuttavia, ci sono stati un numero limitato di studi di imaging ad ultrasuoni su modelli murini, che è probabilmente dovuto alle sfide di eseguire ultrasuoni su soggetti di piccole dimensioni. Il protocollo attuale delinea una nuova procedura per misurare la funzione diaframma nel topo. Inoltre, anche se ci sono stati diversi studi sui roditori sulla funzione del diaframma, la maggior parte dei risultati sono stati ottenuti isolando fasce muscolari direttamente dall'animale eutanasia 5-7. Al contrario, utilizzando un metodo di imaging diagnostico ad ultrasuoni in vivo per analizzare l'attività diaframma diminuirebbe il numero di animali sacrificati per la sperimentazione. Inoltre, i trattamenti a lungo termine incentrati sul rafforzamento della membrana contrattilità possono essere valutati con precisione con gli ultrasuoni in modelli di roditori senza sacrificare animali.
S copi "> Nel nostro laboratorio, abbiamo sviluppato un metodo efficace per la visualizzazione e l'analisi dell'attività diaframma mouse usando una macchina ad ultrasuoni, che aiuta la comprensione della funzione di diaframma in vivo, evita metodi invasivi agli animali, e facilita lo sviluppo di terapeutica trattamenti per la disfunzione respiratoria.Protocol
Representative Results
Discussion
Il protocollo sperimentale attuale sviluppa diagnostici tecniche di imaging ad ultrasuoni specifica dell'attività diaframma in un modello murino mediante un approccio non invasivo vivo. Le impostazioni di apparecchi per anestesia sono valori approssimati, che possono essere leggermente adattate per ciascun animale in quanto topi individuo può rispondere in modo diverso ad anestesia. Per evitare somministrazione anestesia improprio, è importante controllare regolarmente i segni vitali del topo co…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Questo lavoro è sostenuto da finanziamenti del Fondo UO generale G110 e ricerca di eccellenza Fondo della ricerca biomedica e OSU-HRS Fondo 013.000. Gli autori desiderano ringraziare Lauren Chen per la sua assistenza nella preparazione di questo manoscritto.
Materials
| Veterinary digital ultrasonic diagnostic imaging system | Edan | DUS 3 VET | Ultrasound parameters include: frequency of 6.5 MHz, Depth of 29 mm. Note: An equivalent ultrasound machine may be used for this protocol |
| Micro-convex array transducer | Edan | C611 | Or equivalent |
| GE Logiq i hand-carried unit (HCU) | GE Healthcare | GE Logiq i hand-carried unit (HCU) | Or equivalent |
| GE 12 MHz linear array probe | GE Healthcare | 12L-RS | Or equivalent |
| Veterinary anesthetic vaporizer | Webster Veterinary | Serial #: W422021 | Isoflurane was exclusively used with this vaporizer (or equivalent). A custom made induction chamber for anesthesia was assembled for initial anesthesia. Maintenance anesthesia was performed using a nose cone |
| Isothesia (Isoflurane, USP) | Butler Schein | 29405 250ML PVL | Or equivalent |
| Enviro-pure anesthesia absorbing canister | Surgivet Smiths Medical PM, Inc. | Part #: 32373B10 | Or equivalent |
| Ultrasound transmission gel | HM Sonic | N/A | Or equivalent |
| Puralube vet ointment | Puralube | NDC 17033-211-38 | Or equivalent |
| Deltaphase isothermal pad | Braintree Scientific Inc. | 39DP | Or equivalent |
| Hair remover | Nair | N/A | Or equivalent |
| Electric razor | Remington | HC-5015 | Or equivalent |
| Surgical tape | 3M Micropore | 1530-1 | Or equivalent |
| Gauze sponges | Dynarex | 3262 | Or equivalent |
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