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Articolo metodologico

Terapia cellulare per insufficienza cardiaca nel ratto: Doppia Toracotomia per infarto miocardico e epicardico impianto di cellule e Biomatrix

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DOI:

10.3791/51390

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22 settembre 2014

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In questo articolo

Sommario

L'impianto di una biograft per trattare infarto del miocardio indotta da legatura LAD in un modello di roditore è convenzionalmente richiesto due operazioni a cuore aperto. Al fine di ridurre la mortalità e fornire le condizioni ottimali per la fissazione di biomatrici solidi e gelatinosi associati con le cellule, sono state sviluppate procedure minimamente invasive.

Abstract

Terapia cellulare cardiaca ha guadagnato crescente interesse e l'impianto di biomateriali associati con le cellule è diventata una questione importante per ottimizzare la consegna delle cellule del miocardio. Modello di roditore di infarto del miocardio (MI) composto da discendente anteriore sinistra (LAD) legatura è stata comunemente eseguita mediante una toracotomia; un secondo intervento a cuore aperto tramite una sternotomia viene tradizionalmente eseguita per l'applicazione epicardica del trattamento. Dal momento che la descrizione di LAD modello legatura, il tasso di mortalità post-operatoria è sceso 35-13%, comunque il secondo intervento chirurgico è rimasta critica. Al fine di migliorare il recupero post-intervento chirurgico e ridurre il dolore e l'infezione, procedure chirurgiche minimamente invasive sono presentati. Due toracotomie state eseguite, quello iniziale per LAD legatura e la seconda per il trattamento somministrazione epicardico. Biografts costituiti da cellule associate con matrici di tipo solido o gel sono stati applicati sulla ar infartuatoEA. LAD legatura comportato la perdita della funzione cardiaca, come confermato da ecocardiografia eseguita dopo 2 e 6 settimane. Colorazione tricromica Goldner eseguita su sezioni di cuore confermata la formazione della cicatrice transmurale. Ambulatori di primo e secondo portato a meno che il 10% la mortalità post-operatoria.

Introduzione

Dalla fine del 19 ° secolo, le malattie cardiovascolari è rimasto il serial killer numero uno nei paesi industrializzati. Tra questi, malattia coronarica rappresenta la eziologia principale. I risultati della fase acuta di infarto del miocardio (MI) ed è seguita da rimodellamento disadattivi che si sviluppa progressivamente verso una fase cronica e insufficienza cardiaca grave. Nonostante i recenti significativi progressi tecnologici e terapeutici, la morbilità e la mortalità dovute alla progressione dello scompenso cardiaco è ancora in crescita 1. In questo contesto, la terapia cellulare ha guadagnato crescente interesse come una nuova opzione ....

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Protocollo

NOTA: Lewis ratti maschi e femmine, 200-220 g sono stati alloggiati in condizioni standard di laboratorio (12 ore di luce e buio ciclo, ad libitum acqua e cibo, IVC gabbia). Tutti gli animali sono stati trattati in conformità con le raccomandazioni della FELASA e la legge svizzera sulla protezione degli animali.

1 Cella Preparazione: isolamento di cellule staminali mesenchimali dal midollo osseo

  1. Anestetizzare i ratti con isoflurano 5% O 2 e 5 L / min in una camera di induzione per 5 min. Posizionare muso dell'animale in un cono collegato al sistema di anestesia. Eseguire un pizzico punta o la coda per co....

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Risultati

Tutti gli animali recuperati entro 1 ora dopo toracotomia. La guarigione della ferita è stata rapida. È stata osservata nessuna infezione o edema.

La doppia toracotomia sinistra consentito un accesso ottimale al cuore (Figura 1). Il dolore e la mortalità post-operatoria erano bassi. L'animale recuperato rapidamente dalla chirurgia ed ha guadagnato peso (Figura 2). Kaplan Meir sopravvivenza percentuale è stata del 96% per il primo toracotomia. Quattro rat.......

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Discussione

La legatura permanente di LAD provoca danno miocardico irreversibile. Il primo modello animale è stato descritto nel 1960 4. Da allora, è stato considerato come un modello standard e adatto a MI cronica. La sua stabilità e riproducibilità consentito valutazione sperimentale delle terapie per MI 5. Miglioramento delle procedure di seguito la descrizione iniziale riportato un tasso di mortalità operatoria del 35-13% 6.

Come previsto, LAD legatura indotto funzio.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Ringraziamenti

Gli autori ringraziano il prof Hendrik Tevaearai e il Dipartimento di Chirurgia Cardiovascolare di sostegno finanziario per la parte iniziale dello studio.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Sutura Polysorb 3-0CovidienUL 204
Sutura Polysorb 5-0CovidienUL 202
Sutura Surgipro II 7-0 SuturaCovidienVP904X
Catetere Insyte 14 GBD381267
Inspira Ventilatore avanzato a volume controllatoApparecchio Harvard557058
pinza Dumont #7FST Germania11274-20
Fibrina SigillanteBaxter1501441TISSEEL Colla, Congelato -20 gradi C
Castroviejo Eye SpeculaHarvard Apparatus72-8925utilizzare come divaricatore per le costole
IMDM GlutaMAXGibco31980
Pen/StrepGibco15140
FBSPAA Clone          A15-101
Forbici per ossaStrumenti di scienze fini16044-10
Soluzione di lisi delle cellule del sangue rossaGentra SystemsD-50k1
Soluzione di distacco di cellule accutasedelle cellule staminali7920
Tecnologia

Riferimenti

  1. Gjesdal, O., Bluemke, D. A., Lima, J. A. Cardiac remodeling at the population level--risk factors, screening, and outcomes. Nat. Rev. Cardiol. 8, 673-685 (2011).
  2. Alcon, A., Cagavi Bozkulak, E., Qyang, Y. Regenerating functional heart tissue for myocardial repair.....

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Ristampe e permessi

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