Summary

쥐에서 심장 마비에 대한 세포 기반 치료 : 심근 경색에 대한 두 개흉술 및 세포 및 Biomatrix의 심 외막 이식

Published: September 22, 2014
doi:

Summary

설치류 모델에서 LAD 결찰에 의한 심근 경색을 치료하는 biograft의 주입은 통상적으로 두 개의 심장 절개 수술을 요구하고있다. 사망률 감소 및 세포와 연관된 고체 및 젤라틴 biomatrices의 정착을위한 최적의 조건을 제공하기 위해, 최소 침습 절차가 개발되었다.

Abstract

심장 세포 치료는 세포와 관련된 바이오 물질의 관심과 주입을 증가 얻고있다 심근 세포의 전달을 최적화하는 중요한 문제가되고있다. 심근 경색의 설치류 모델 (MI) 동맥 (LAD) 결찰은 일반적으로 개흉술을 통해 수행 된 내림차순 좌전 구성된; 흉골 절개를 통해 초 오픈 심장 수술은 전통적 치료의 심 외막 응용 프로그램에 대한 수행되었습니다. LAD 결찰 모델의 설명 때문에, 수술 후 사망률은 그러나 두 번째 수술이 중요한 남아있다, 35~13% 떨어졌다. 통증과 감염을 수술 후 회복을 개선하고 줄이기 위해 최소 침습 수술이되게됩니다. 두 thoracotomies는, LAD 결찰에 대한 초기 치료 한 외막 투여 제를 실시 하였다. 고체 또는 젤 타입의 행렬과 관련된 세포로 구성된 Biografts는 경색 아칸소에 적용되었다개. 이 6 주 후에 실시 심 초음파 검사에 의해 확인으로 LAD 결찰은 심장 기능의 손실이 발생했습니다. Goldner 심장 섹션에서 수행 트리 크롬 염색 전층 흉터 형성을 확인했다. 제 1 및 제 2 수술은 덜이 10 %, 수술 후 사망률되었습니다.

Introduction

19 세기 말부터, 심혈관 질환은 선진국에서 번호를 하나의 연쇄 살인범을 유지하고있다. 그 중에서도, 관상 동맥 질환은 주요 원인을 나타낸다. 심근 경색 (MI)과의 급성기 결과는 점진적으로 만성 위상 및 중증 심부전으로 개발 부적응 리모델링옵니다. 최근 상당한 기술과 치료의 발전에도 불구하고, 때문에 심장 마비의 진행에 이환율과 사망률은 여전히 하나를 성장하고있다. 이러한 맥락에서, 세포 요법은 심부전 향해 질병의 진행을 정지하고 심근 최근에 식별 된 재생 능력을 자극하는 새로운 치료 옵션으로 증가 관심을 얻고있다. 실험 및 임상 연구는 다양한 세포 유형의 심장 이식 후 얻은 유익한 효과의 강력한 증거를 제공하고 있습니다. 주요 결과는 개선 cardi 포함교류 수축 기능, 좌심실 재 형성을 감소 경색 크기를 감소하고, 경색 지역에 혈관 밀도를 증가했다. 그러나, 세포 주입 후 세포 수가 낮은 유지율은 중요한 단점이 남아 있었다. 셀 전달이의 향상을 biomatrix와 세포의 협회는 최근 연구자 및 임상 이익을 육성했다.

관상 동맥 (LAD)를 좌전 하행의 결찰 전층 경색과 성숙한 흉터 결과 작은 동물 모델에서 MI에 대한 기준 방법입니다. MI의 만성 단계에 적용 세포 치료는 두번째 수술 적 치료가 필요합니다. 중간 흉골 보통 세포 또는 biografts의 외막 주입 심근 내 주입을 허용하도록 수행된다. 이러한 침습적 수술은 사망률, 수술 후 회복 시간, 통증, 감염의 위험을 증가시킨다. 여기에 제시된 최소 침습 접근 방식뿐만 아니라 그러한 편견을 방지 할뿐만 아니라 O를 제공합니다치료 응용 프로그램에 대한 마음의 ptimal 접근성. MI 및 젤 타입 biomatrix과 관련된 세포의 심 외막 이식 왼쪽 늑간 thoracotomies를 통해 심장 박동 상태에서 수행됩니다.

Protocol

참고 : 루이스 남성과 여성 쥐, 200~220그램이 표준 실험실 조건 (12 시간 빛과 어둠 사이클, 광고 무제한으로 물과 음식, IVC 케이지)에서 보관 하였다. 모든 동물은 동물 보호에 FELASA와 스위스 법의 권고 사항을 준수하여 처리 하였다. 1 셀 준비 : 골수에서 중간 엽 줄기 세포 분리 5 분 동안 유도 챔버 내에 5 % 이소 플루 란 및 2 O 5 L / 분으로 래트를 마취. 마…

Representative Results

모든 동물은 thoracotomies 후 1 시간 이내에 회복되었다. 상처 치유가 빠른이었다. 어떤 감염이나 부종은 관찰되지 않았다. 이중 좌측 개흉술은 심장에 최적의 액세스에게 (그림 1)을 허용했다. 통증 및 수술 후 사망률이 낮았다. 동물은 수술에서 빠르게 회복하고 (그림 2) 체중이 증가. 카플란 마이어 생존 %가 첫번째 개흉술에 대한 96 %이었다. (104) 위에 4…

Discussion

LAD의 영구 결찰은 돌이킬 수없는 심근 손상이 발생합니다. 먼저 동물 모델은 그 이후 만성 MI에 대한 표준과 적합한 모델로 간주되어왔다. 1960 4에 기재 하였다. 그 안정성과 재현성 MI 5에 대한 치료의 실험 평가를 허용했다. 초기 설명을 다음과 같은 개선 된 절차는 35-13% 6의 수술 사망률을보고 하였다.

예상대로, LAD 결찰은 이주 내에 관찰 장애인 심장…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

저자는 교수 헨드릭 Tevaearai 및 연구의 초기 부분에 대한 재정 지원에 대한 외과학 교실을 주셔서 감사합니다.

Materials

Name of Material/ Equipment Company Catalog Number Comments/Description
POLYSORB 3-0 suture COVIDIEN UL 204
POLYSORB 5-0 suture COVIDIEN UL 202
SURGIPRO II 7-0 Suture COVIDIEN VP904X
CATHETER INSYTE 14G BD 381267
INSPIRA ADVANCED VOLUME CONTROLLED VENTILATOR HARVARD APPARATUS 557058
DUMONT #7 Forceps FST Germany 11274-20
Fibrin sealant BAXTER 1501441 TISSEEL Glue, Frozen -20°C
CASTROVIEJO EYE SPECULA HARVARD APPARATUS 72-8925 use as retractor for the ribs
IMDM Glutamax Gibco 31980
Pen/Strep Gibco 15140
FBS PAA Clone       A15-101
bone scissors Fine Science Tols 16044-10
Red Blood Cell Lysis Solution Gentra Systems D-50k1
Accutase cell detachment solution Stem cell technology 7920

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Citazione di questo articolo
Frobert, A., Valentin, J., Cook, S., Lopes-Vicente, J., Giraud, M. Cell-based Therapy for Heart Failure in Rat: Double Thoracotomy for Myocardial Infarction and Epicardial Implantation of Cells and Biomatrix. J. Vis. Exp. (91), e51390, doi:10.3791/51390 (2014).

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