La valutazione non invasiva della Cardiac Anomalie in Experimental Autoimmune miocardite da Risonanza Magnetica Imaging Microscopy nel mouse

Sommario

Questo studio dimostra il successo dell'affermazione della risonanza magnetica come strumento non invasivo per valutare le anomalie cardiache nei topi affetti da miocardite autoimmune. I dati indicano che la tecnica può essere utilizzata per monitorare la progressione della malattia negli animali vivi.

Abstract

La miocardite è una infiammazione del miocardio, ma solo circa il 10% di questi spettacoli manifestazioni cliniche interessate della malattia. Per studiare gli eventi del sistema immunitario di lesioni del miocardio, vari modelli murini di miocardite sono stati ampiamente utilizzati. Questo studio ha coinvolto sperimentale miocardite autoimmune (EAM) indotto con miosina cardiaca catena pesante (MyHC)-α 334-352 in A / J topi; gli animali colpiti sviluppano miocardite linfocitica ma senza segni clinici evidenti. In questo modello, l'utilità di microscopia a risonanza magnetica (MRM) come modalità non invasiva per determinare le cardiaci cambiamenti strutturali e funzionali in animali immunizzati con MyHC-α 334-352 è mostrato. EAM e topi sani sono stati ripresi con un 9.4 T (400 MHz) 89 millimetri scanner foro centrale verticale dotato di una sonda di imaging a radiofrequenza 4 centimetri millepiedi e 100 g / cm gradienti triple assi. Immagini cardiache sono state acquisite da animali anestetizzati utilizzando una sequenza di impulsi cine-based gradient-echo, e l'animaLS sono stati monitorati dalla respirazione e pulsossimetria. L'analisi ha rivelato un aumento dello spessore della parete ventricolare in topi EAM, con una corrispondente diminuzione del diametro interno dei ventricoli, se confrontato con topi sani. I dati suggeriscono che i cambiamenti morfologici e funzionali nei cuori infiammati possono essere non invasiva monitorato da MRM di animali vivi. In conclusione, MRM offre un vantaggio di valutare la progressione e regressione delle lesioni miocardiche in malattie causate da agenti infettivi, così come la risposta alle terapie.

Introduzione

L'insufficienza cardiaca è la causa principale delle morti, e miocardite è una causa predominante di insufficienza cardiaca nei giovani adolescenti ^1. La maggior parte dei pazienti affetti da miocardite rimangono asintomatici e la malattia viene spontaneamente risolti ^2. Tuttavia, il 10-20% dei soggetti colpiti in grado di sviluppare malattie croniche, portando a cardiomiopatia dilatativa (DCM) ^3. Vari modelli animali sono stati sviluppati per studiare la patogenesi immunitaria di miocardite. La malattia può essere indotta in miocardite-suscettibile A / J e topi Balb / c immunizzando gli animali con miosina cardiaca catena pesante....

Protocollo

DICHIARAZIONE ETICA:

Tutte le procedure di polizia sono state condotte in conformità con le linee guida per la cura e l'uso di animali da laboratorio e approvati dalla University of Nebraska-Lincoln, Lincoln, NE.

1. Induzione di autoimmune sperimentale miocardite

1. Preparare la soluzione sciogliendo peptide MyHC-α 334-352 in 1x PBS ad una concentrazione finale di 2 ml mg/1.5.
2. Preparare la tossina della pertosse (PT) aggiungendo 1 ml di PBS sterile 1x in una fiala contenente 50 mg di PT liofilizzate per ottenere una concentrazione magazzino di 50 ng / ml. Prendere 20 ml d....

Risultati

In questa relazione, viene mostrato l'utilità della tecnica MRM come una modalità non invasiva per determinare i cambiamenti strutturali e funzionali nei cuori di animali affetti da EAM. La miocardite è stata indotta in A / J topi immunizzando gli animali con MyHC-α 334-352 in CFA ^7, e gli animali sono stati sottoposti ad esperimenti MRM al giorno 21 post-vaccinazione. La rappresentazione MRM è stata effettuata su animali vivi in ​​anestesia isoflurano a 9.4 T (400 MHz per i protoni), utilizzando un magne.......

Discussione

Questo studio descrive la procedura MRM e la sua utilità come strumento non invasivo per verificare anomalie cardiache in topi affetti da miocardite autoimmune. Poiché le caratteristiche istologiche di EAM assomigliano miocardite postinfettiva degli esseri umani, modelli murini sono comunemente impiegati per delineare i meccanismi immunitari di lesioni miocardiche ^23-25. Tuttavia, gli animali affetti da miocardite appaiono clinicamente normali, e la diagnosi è fatta sulla base di istologia al termine degli es.......

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Myhc-a 334-352 (DSAFDVLSFTAEEKAGVYK)	Neopeptide, Cambridge, MA		Negozio a 4 ° C
CFA	Sigma Aldrich, St Louis, MO	5881	Negozio a 4 ° C
MTB H37Rv estratto	Difco Laboratories, Detroit, MI	231141	Store a 4 ° C
PT	Elenco Biologicals Laboratories, Campbell, CA	181	Negozio a 4 ° C
1x PBS	Corning, Manassas, VA	21-040-CV	Store a 4 ° C
Isoflurano	Piramal Healthcare, Mumbai, India	NDC66794-013-25
Topi femmina A/J	Jackson Laboratories, Bar Harbor, ME	646
Luer-lok sterile 1 ml di sirringa	BD, Franklin Lakes, NJ	309628
Luer-lok sterile 3 ml di sirringa	BD, Franklin Lakes, NJ	309657
Ago sterile, 18 G	BD, Franklin Lakes, NJ
Ago sterile, 27 1/2 G	BD, Franklin Lakes, NJ	305109
Rubinetto a 3 vie	Smiths Medical ASD, Inc. Dublin, OH	MX5311L
bende di garza Kerlix	Covidien, Mansfield, MA	6720
Kimwipes	Kimberly-Clark Professional, Roswell, GA	34155
Protouch Stockinette	Medline Industries, Mundelein, IL	30-1001
Forbici e pinze chirurgiche sterili	INOX tool Corporation
Micro forno	GE Healthcare,
Sistema di terapia del caldo e del freddo ThermiPAQ	Theramics Corporation, Springfield, IL
Lampada riscaldante per rettili	Energy Savers Unlimited, Inc. Carson, CA
Nastri trasporatori 3M	Target Corporation, MN
Up and Up Unguento antibiotico polimixina B solfato/bacitracina/neomicina solfato	Target Corporation, MN
North Safety DeciDamp-2PVC tappi per le orecchie in schiuma	North Safety Prodotti, Smithfield, RI
Applicatore con punta in cotone, 6' ’ gambo di legno	Jorgensen Laboratories, Inc. Loveland, CO
Camera di induzione per anestesia	Summit Anesthesia Solutions, Ann Harbor, MI
Sistema di supporto per anestesia Summit per la regolazione del flusso di anestesia.	Summit Anesthesia Solutions, Ann Harbor, MI
Supporto per animali appositamente progettato	Agilent Technologies, Santa Clara, CA
Bickford  Omnicon F/Aria  unità di filtraggio del gas per anestesia	A.M. Bickford, Inc. Wales Center, NY
Modulo pulsossimetro, sistema di monitoraggio e gating per piccoli animali compatibile con la risonanza magnetica.	Strumenti per piccoli animali, Inc. Stony Brook, NY
Bombola di ossigeno	Matheson-Tri Gas, zona centro-settentrionale, Lincoln, NE
Regolatore del gas	Western Medica, West Lake, OH
Modulo di interruzione del segnale, sistema di monitoraggio e gating per piccoli animali compatibile con la risonanza magnetica	Small Animal Instruments, Inc. Stony Brook, NY
Scanner MR con foro centrale verticale da 9,4 T (400 MHz) da 89 mm	Agilent Technologies, Santa Clara, CA
Bobina RF per micro-imaging da 4 cm	Agilent Technologies, Santa Clara, CA
Monitor PC SAM	Small Animal Instruments, Inc. Stony Brook, NY
Software di analisi delle immagini mediche quantitative	http://segment.heiberg.se;   Segmento v1.8 R1430,  Medviso, regione di Oresunds, Svezia
Software Matlab	The Mathworks, Inc. Natick, MA
			Computer-Sistema operativo Unix

305195 Rotoli di