Summary

الهيكل العظمي إجراءات خزعة العضلات البشرية باستخدام تقنية التعديل بيرجستروم

Published: September 10, 2014
doi:

Summary

The purpose of this video is to present the modified Bergström skeletal muscle biopsy technique on human subjects.

Abstract

تقنية خزعة عن طريق الجلد تمكن الباحثين والأطباء لجمع عينات أنسجة العضلات والهيكل العظمي. تقنية آمنة وفعالة للغاية. يصف هذا الفيديو تقنية خزعة عن طريق الجلد باستخدام إبرة بيرجستروم تعديل الهيكل العظمي للحصول على عينات من الأنسجة العضلية من الوحشية المتسعة من البشر. تتكون الإبرة بيرجستروم من قنية الخارجي مع فتحة صغيرة ('نافذة') على جانب طرف ومبزل الداخلي مع شفرة قطع في نهاية البعيدة. تحت التخدير والعقيم الظروف المحلية، ومتقدمة الإبرة في الهيكل العظمي والعضلات من خلال شق في الجلد والأنسجة تحت الجلد، ورباط. بعد ذلك، يتم تطبيق الشفط إلى مبزل الداخلي، يتم سحبها مبزل الخارجي مرة أخرى، يتم استخلاص الأنسجة العضلية الهيكلية في إطار من قنية الخارجي بواسطة الشفط، ويتم إغلاق مبزل الداخلي بسرعة، وبالتالي قطع أو تقليم عينة أنسجة العضلات والهيكل العظمي . يتم تدوير الإبرة 90 °60، ويتم قطع آخر. ويمكن تكرار هذه العملية ثلاث مرات. هذه التقنية قطع متعددة تنتج عادة عينة من 100-200 ملغ أو أكثر في الاشخاص الاصحاء ويمكن أن يتم مباشرة قبل وأثناء وبعد نوبة من التمارين الرياضية أو تدخل الآخرين. بعد خلع الملابس بعد خزعة من موقع شق، استئناف أنشطتها المواضيع عادة الحياة اليومية على الفور، ويمكن أن تشارك بشكل كامل في النشاط البدني القوي في غضون 48-72 ساعة. يجب تجنب المواضيع ممارسة المقاومة الثقيلة لمدة 48 ساعة للحد من مخاطر فتق في العضلات من خلال شق في اللفافة.

Introduction

يتم استخدام تقنية خزعة عن طريق الجلد أو "شبه المفتوحة" للحصول على عينات أنسجة العضلات والهيكل العظمي من المرضى من البشر والموضوعات البحثية. وينسب دوشين (1806-1875) كأول لبناء إبرة مع مبزل للحصول على العضلات والهيكل العظمي من المواضيع الحية من خلال الخزعة عن طريق الجلد 1. في عام 1960، قدم بيرجستروم إبرة الخزعة عن طريق الجلد مماثلة لتلك التي وصفها دوشين 2-4. بعد عشرين عاما، ايفانز وآخرون. 5 تعديل هذه التقنية من خلال تطبيق الشفط من خلال مبزل قطع الإبرة بيرجستروم. هذا التعديل يمكن أن تعزز العائد من الأنسجة 3- إلى 5 أضعاف 6،7 ويعمل في إعدادات الأبحاث السريرية والطبية الحيوية. هذا الأسلوب له وسوف تستمر في تعزيز تشخيص الاعتلالات العضلية وفهمنا لبنية ووظيفة العضلات والهيكل العظمي.

تقنية خزعة العضلات عن طريق الجلد هي straightforward. عندما يتم بشكل صحيح، مع الالتزام الصارم تقنية العقيم، والمخاطر المرتبطة بها تكاد تكون معدومة. ويعتبر إجراء خزعة العضلات كأداة الفحص للمشاريع البحثية. بعض المؤسسات الأكاديمية تسمح بتدريب الباحثين أعضاء هيئة التدريس مع دكتوراه، مع وجود إشراف الطبيب مباشرة، والحصول على الخزعات العضلية والبعض الآخر يتطلب طبيب المجلس معتمدة لأداء هذه التقنية. فريق خزعة ASU كان أداء بنجاح على أكثر من 1،600 الخزعات العضلية خلال 13 عاما الماضية 8-15. والغرض من هذا الفيديو هو وصف تعديل بيرجستروم إبرة عن طريق الجلد خزعة العضلات تقنية 5 الهيكل العظمي للحصول على عينات من الأنسجة العضلية من الوحشية المتسعة من البشر.

Protocol

الإجراء الهيكل العظمي والعضلات كما هو موضح يتبع المبادئ التوجيهية للمجلس المراجعة المؤسساتي جامعة ولاية الآبالاش. ملاحظة: ويتألف الفريق من المشغل (دكتوراه أو MD تدريب في تقنية خزعة)، واحد على الأقل، ولكن من الناحية المثالية، ثلا?…

Representative Results

إجراء خزعة العضلات كما هو موضح أعلاه يسمح للباحث بسرعة وباستمرار لجمع عينات أنسجة العضلات والهيكل العظمي. العائد نموذجي في صحية، والموضوعات الرياضية هو 200 ملغ أو أكثر في مسار واحد مع مقاطع 3-4. يأخذ الإجراء 15-20 دقيقة، ومعظمها ينفق استعدادا لشق. في الدراسات القائمة على ?…

Discussion

يوفر هذا الفيديو ملخص خطوة بخطوة لإجراء خزعة العضلات الهيكلية المستخدمة في مختبر الأداء الإنسان ASU. هذا الإجراء، مع تعديلات صغيرة، وقد استخدمت لجمع ما يقرب من 1600 الخزعات العضلية خلال السنوات ال 13 الماضية. وقد وفرت عينات الخزعة العضلية البيانات الهامة في التحقيقات ال…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

أي تمويل لإعلان.

Materials

Name of Material / Equipment Company Catalog Number Comments /  Description
Bergström biopsy needle, 5 x 100mm Stille Surgical Inc. 119-29187-50 1 ea
Durasorb blue pad Fisher 22-031-340 case of 300
Prep Razor Disposable Moore Medical 89760 1 ea
Shave Cream Moore Medical 92869 1 can
Alcohol Swab Moore Medical 98721 box/200
Povidone-iodine Swabsticks (3 pack) Moore Medical 90691 pack of 50
Face masks Fisher 19-039-690 case of 50
Sterile Gloves; sz 6.5 Moore Medical 68128 box of 50 pairs
Sterile Gloves; sz 7.0 Moore Medical 68129 box of 50 pairs
Sterile Gloves; sz 8.5 Moore Medical 68132 box of 50 pairs
Fenestrated Towel Drape Moore Medical 92712 case of 50
Lidocaine (1% HCl, w/o Epi Dealmed 427902 30cc vial
Ethyl Chloride spray Dealmed 386020 3.5 fl. Oz. bottle
5 mL syringe w/ 21G needle Fisher 14-827-48 case of 100
25G 5/8" needle Fisher 14-826AA case of 100
25G 1 1/2" needle Fisher 14-826-49 case of 100
Single-Use Scalpels  w/ #11 blade Fisher 0-8927-5B box of 20
60 mL Syringe Fisher 13-689-8 case of 40
~30 inch extension tubing Fisher 14-169-7A roll of 50ft
Metal stopcock Fisher 01-290-38 each
Polypropylene tubing connector w/ tapered ends, 3.2 to 5.5 mm Fisher 15-315-28A case of 100
Yellow pipette tips (1-200 µL) Fisher 02-681-2 cut off  ~15-18 mm of the tip
Topical surgical adhesive Medline MSC091076 case of 36 tubes
Topical surgical adhesive Medline MSC091076Z box of 6 tubes
Butterfly stitches (adhesive strips) 1/2" x 4" (6 per pack) Moore Medical 93050 box/300
Bandadge, Strip, 3/4 x 3 in. Fisher 19-027-202 pack of 100
Adhesive bandage (5m rolls) Fisher 19-027-768 case of 36
1" paper surgical tape Fisher 19-027-761 case of 12
Sutures (4-0 reverse cutting, FS2) Moore Medical 82926 box of 36
4 x 4 sterile gauze pads Moore Medical 66949 pkg/50
2 x 2 non-sterile gauze pads Moore Medical 37336 pkg/200
3 x 4 Non-Adherent Pads Moore Medical 74389 bx/100
Autoclave bags 3.5 x 9 Moore Medical 40390 box of 200
Autoclave bags 5.25 x 10 Moore Medical 40391 box of 200
Autoclave indicator tape Moore Medical 31608 box of 250
Lab Coats—small Fisher 23-900-520A  10/pk
Lab Coats—medium Fisher 23-900-520B  10/pk
Lab Coats—large Fisher 23-900-520C  10/pk
Germicidal Disposable Cloth Wipes Moore Medical 62879 Can/160

Riferimenti

  1. Duchene, G. B. A. Recherches sur la paralysie musculaire pseudohypertrophique ou paralysie myo-sclerosique. Arch Gen Med. 11 (30), (1868).
  2. Bergstrom, J. Muscle electrolytes in man. Determined by neutron activation analysis on needle biopsy specimens. Scand J Clin Lab Invest (England). 14, (1962).
  3. Bergstrom, J. Percutaneous needle biopsy of skeletal muscle in physiological and clinical research). Scand J Clin Lab Invest. 35, 609-616 (1975).
  4. Bergstrom, J., Hultman, E. A study of the glycogen metabolism during exercise in man. Scand J Clin Lab Invest. 19, 218-228 (1967).
  5. Evans, W. J., Phinney, S. D., Young, V. R. Suction applied to a muscle biopsy maximizes sample size. Med Sci Sports Exerc. 14, 101-102 (1982).
  6. Hennessey, J. V., Chromiak, J. A., Della Ventura, S., Guertin, J., MacLean, D. B. Increase in percutaneous muscle biopsy yield with a suction-enhancement technique. J Appl Phys. 82, 1739-1742 (1997).
  7. Tarnopolsky, M. A., Pearce, E., Smith, K., Lach, B. Suction-modified Bergstrom muscle biopsy technique: experience with 13,500 procedures. Muscl., & Nerve. 43, 717-725 (2011).
  8. Nieman, D. C., et al. Carbohydrate ingestion influences skeletal muscle cytokine mRNA and plasma cytokine levels after a 3-h run. J Appl Physiol. 94, 1917-1925 (2003).
  9. Nieman, D. C., et al. Influence of carbohydrate ingestion on immune changes after 2 h of intensive resistance training. J Appl Physiol. 96, 1292-1298 (2004).
  10. Utter, A. C., et al. Carbohydrate supplementation and perceived exertion during prolonged running. Med Sci Sports Exerc. 36, 1036-1041 (2004).
  11. Nieman, D. C., et al. Muscle cytokine mRNA changes after 2.5 h of cycling: influence of carbohydrate. Med Sci Sports Exerc. 37, 1283-1290 (2005).
  12. Nieman, D. C., et al. Effects of quercetin and EGCG on mitochondrial biogenesis and immunity. Med Sci Sports Exerc. 41, 1467-1475 (2009).
  13. Nieman, D. C., et al. Quercetin’s Influence on Exercise Performance and Muscle Mitochondrial Biogenesis. Med Sci Sports Exerc. 42, 338-345 (2010).
  14. Dumke, C. L., et al. Quercetin’s effect on cycling efficiency and substrate utilization. Appl Physiol Nut Metab. 34, 993-1000 (2009).
  15. Nieman, D. C., et al. Quercetin’s influence on exercise-induced changes in plasma cytokines and muscle and leukocyte cytokine mRNA. J Appl Physiol. 103, 1728-1735 (2007).
  16. . Guideline for Disinfection and Sterilization in Healthcare Facilities. http://www.cdc.gov/hicpac/Disinfection_Sterilization/toc.html. , (2008).
  17. Faria, F. E., et al. The onset and duration of mobilization affect the regeneration in the rat muscle. Histol Histopath. 23, 565-571 (2008).
  18. Carlson, B. M., Shepard, B., Komorowski, T. E. A histological study of local anesthetic-induced muscle degeneration and regeneration in the monkey. J Ortho Res. 8, 485-494 (1990).
  19. Yagiela, J. A., Benoit, P. W., Buoncristiani, R. D., Peters, M. P., Fort, N. F. Comparison of myotoxic effects of lidocaine with epinephrine in rats and humans. Anesth Analg. 60, 471-480 (1981).
  20. Coyle, E. F., Coggan, A. R., Hemmert, M. K., Ivy, J. L. Muscle glycogen utilization during prolonged strenuous exercise when fed carbohydrate. J Appl Physiol. 61, 165-172 (1986).
  21. Gibala, M. J., et al. Brief intense interval exercise activates AMPK and p38 MAPK signaling and increases the expression of PGC-1alpha in human skeletal muscle. J Appl Physiol. 106, 929-934 (1985).
  22. Phillips, S. M., Tipton, K. D., Ferrando, A. A., Wolfe, R. R. Resistance training reduces the acute exercise-induced increase in muscle protein turnover. Am J Physiol. 276, 118-124 (1999).
  23. Davis, J. M., Murphy, E. A., Carmichael, M. D., Davis, B. Quercetin increases brain and muscle mitochondrial biogenesis and exercise tolerance. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 296, 1071-1077 (2009).
  24. Vissing, K., Andersen, J. L., Schjerling, P. Are exercise-induced genes induced by exercise. FASEB J. 19, 94-96 (2005).
  25. Lundby, C., et al. Gene expression in human skeletal muscle: alternative normalization method and effect of repeated biopsies. Eur J Appl Physiol. 95, 351-360 (2005).
  26. Coyle, E. F., Coggan, A. R., Hemmert, M. K., Ivy, J. L. Muscle glycogen utilization during prolonged strenuous exercise when fed carbohydrate. J Appl Physiol. 61, 165-172 (1985).
check_url/it/51812?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Shanely, R. A., Zwetsloot, K. A., Triplett, N. T., Meaney, M. P., Farris, G. E., Nieman, D. C. Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergström Technique. J. Vis. Exp. (91), e51812, doi:10.3791/51812 (2014).

View Video