Summary

기니 돼지의 비 터미널 혈액 샘플링 기법

Published: October 11, 2014
doi:

Summary

알려진 모델 있지만, 기니 피그는 현재 실험 동물 과학 분야의 틈새 시장을 대표하는 제한된 데이터는 대부분의 절차의 실행에 사용할 수 있습니다. 여기에서 우리는 의식이나 마취 기니피그 중 생체 내 혈액 샘플링 기술의 비 터미널에 네 가지 방법을 제시한다.

Abstract

기니 돼지는 인간에게 여러 가지 생물학적 유사성을 가지고 실험 동물 모델 1-3을 검증하고 있습니다. 특정 방법론 대응 부족에 그러나, 기니아 피그의 사용은 현재 연구와 설명 데이터의 비교적 좁은 영역을 나타냅니다. 기니피그의 해부학 적 특징은 마우스 및 래트에 비해. 따라서 샘플링 기법을 조정함으로써 예컨대, 종 특이 차이를 수용 할 수 있도록, 다른 설치류 모델과 다소 상이 충분히 고품질의 샘플들을 획득하기 위해 필요하다. 생체 내 연구에서 모두 장기 및 단기 자주 샘플링 혈액을 반복하여 필요한만큼 기술의 선택은 물론 동물에서 응력 및 불편 함을 감소시키기 위해 고려해야 할뿐만 아니라 시료의 크기 및 접근의 요구 생존뿐만 아니라 준수하도록. 정맥혈 샘플 기니피그 등의 다수 위치에서 얻을 수있다., 복재 및 경정맥을정맥, 장점과 단점을 모두 포함하는 각 기술 4,5. 여기에, 우리는 의식이나 마취 기니 돼지 중 하나에 대 한 4 개의 서로 다른 혈액 샘플링 기법을 제시한다. 절차는 모든 비 터미널 절차는 실험 동물 (6) 혈액 수집을위한 가이드 라인을 초과하지 않는 양의 샘플 및 샘플의 수를 제공합니다. 모든 설명 방법은 철저한 테스트를 거쳤으며 우리의 연구 시설에서 연구에서 생체 내 혈액 샘플링 반복 적용되고있다.

Introduction

기니 피그 인해 비타민 C, 인간의 태반과 함께 효소와 지질 단백질 프로파일뿐만 아니라 공유 유사성을 대사 비교 혈장 단백의 영양 공급을위한 요구 사항으로 인체에 생물학적 유사성의 숫자로 가치 및 검증 실험 동물 모델 태아 개발 1-3,7,8. 이 기니피그 등의 비 알코올 지방간 질환, 심혈관 질환과 비타민 C 결핍증의 추정 효과뿐만 아니라, 예를 들면의 효과로 다이어트 관련 질병의 효과 연구를위한 매력적이고 적합한 모델을 만든다. 산모식이 개입을 개발 자손.

반복 채혈은 종종 생체 내 연구에서 모두 장기 및 단기 필요합니다. 인해 종 특이 해부학 차이 샘플링 기술의 변조는 다른 설치류 모델에 비해 기니피그의 혈액 시료를 얻기 위해 필요 <sup> 4,5. 따라서 샘플링 및 처리 모두에 대한 상이한 요건 및 옵션을 가지고, 이는 정맥과 동맥의 과정에서 변화를 포함하고, 또한 그 기니아 피그 테일이 없다. 복재 또는 눈꺼풀 정맥에서 샘플링, 동물에 최소한의 불편과 스트레스를 유발하고 3,9 마취가 필요하지 않습니다. 이 기술은 혈액 (100 ~ 400 μL), 예를 들면 소량의 샘플을 반복 할 수 있습니다., 혈장 생화학 적 마커를 결정합니다. 더 작은 샘플 크기 (50 내지 100 μL)에 충분한 경우,이 아주 쉽게 귀 정맥을 천공하여 얻을 수있다. 이 기술은 또한 의식적 동물에서 수행하고 10,11 혈당을 측정 할 때, 예를 들면 유용 할 수있다. 경정맥에서 샘플링은 혈액의 많은 양 (1 ~ 2 ㎖)의 수집을 위해 수 있지만 마취가 필요합니다.

여기에, 우리는 의식이나 마취 기니 돼지 중 하나에 대 한 4 개의 서로 다른 혈액 샘플링 기법을 제시한다. PROCedures 않은 모든 터미널 절차는 실험 동물 (6) 혈액 수집을위한 가이드 라인을 초과하지 않는 양의 샘플 및 샘플의 수를 제공합니다. 그것은 스트레스를 최소로 유지해야한다는 동물 복지뿐만 아니라 좋은 과학의 이해 관계에 있습니다. 따라서, 단지 잘 훈련 된 유능한 개인은 동물의 절차를 수행해야합니다.

Protocol

표시된 절차는 식품, 농업 및 수산부에서 덴마크의 동물 실험 검사관에 의해 승인 프로토콜에 따라 수행 하였다. 측면 복재 또는 눈꺼풀 정맥에서 1 혈액 샘플링 마취없이이 절차와 하나의 조사, 기니피그를 처리 하나, 그리고 하나의 샘플을 수집의 도움을 수행합니다. 혈관이 표시 될 때까지 전기 면도기와 뒷다리의 눈꺼풀 영역을 면도. 영역 천자 사이트 방?…

Representative Results

의식이나 마취 기니피그 하나로 비 종단 생체 채혈 기법 개의 상이한 접근법이 제시되었다.도 1 기니피그 가능한 천자 사이트에서 횡 복재 및 족부 혈관의 과정을 도시한다. 기니 돼지 귀의 등쪽 표면에 보이는 귀 정맥은 단지 매우 소량이 필요할 때 이러한 정맥 혈액 샘플링을 위해 사용될 수있는도 2에 도시되어있다. 경정맥 혈액 샘플링을위한 기니피그의 위치는…

Discussion

마우스 및 래트에 비해, 기니피그 자연에 의해 공포되고 침착 접근 및 스트레스를 줄이기 위해 올바르게 처리되어야한다. 보기의 동물 복지의 관점에서,주의 행동을 자연스럽게 우선 순위; 그러나,이도. 수집 된 데이터, 예를 들면에 불안 – 관련 효과의 위험을 줄일 스테로이드 증가한 혈중 농도, 12 글루코스 것이다. 마찬가지로, 일일 처리는 정상적인 절차에 동물을 습관화하고 더?…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

우리는 애니 B. 크리스텐센, 엘리자베스 V. 안데르센, 벨린다 B. Bringtoft 및 실험 의학, 프레데릭 스 버그 캠퍼스, 보건 의료 학부, 덴마크 코펜하겐 대학의학과에서 동물 관리인의 숙련 된 지원을 인정합니다. 야곱 Lønholdt는 절차를 촬영에서 자신의 뛰어난 기술 지원에 대해 감사한다. 이 연구는 생체 내 약리학과 코펜하겐의 대학에 대한 LIFEPHARM 센터에 의해 부분적으로 지원되었다.

Materials

Name of Material/ Equipment Company Catalog Number Comments/Description
Electric shaver Wella (Contura), Denmark 273207 Alternative product may be used. Multiple suppliers
Syringes  B.Braun-Omnifix-F, Germany 9161406V Alternative product may be used. Multiple suppliers
Needles BD Microlance,Spain 301156 Alternative product may be used. Multiple suppliers
Microvette collection tube  Sarstedt, D-51588Nümbrecht, Germany 201,288,100 Alternative product may be used. Multiple suppliers
Accu-Check analyzer Roche A/S Diagnostics, Denmark Alternative product may be used. Multiple suppliers
Heparin 5000 IE/ml LEO Pharma, Denmark Alternative product may be used. Multiple suppliers
Anesthesia Zoletil 50, Chemvet, Denmark Alternative product may be used. Multiple suppliers
Anesthesia Narcoxyl vet 20 mg/ml, Intervet, Denmark Alternative product may be used. Multiple suppliers
Anesthesia Torbugesic vet 10 mg/ml, Scanvet, Denmark Alternative product may be used. Multiple suppliers
Neutral eye ointment Alternative product may be used. Multiple suppliers
Gauze or a cotton swab  Alternative product may be used. Multiple suppliers
Disinfectant (70% alcohol) Alternative product may be used. Multiple suppliers

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Citazione di questo articolo
Birck, M. M., Tveden-Nyborg, P., Lindblad, M. M., Lykkesfeldt, J. Non-Terminal Blood Sampling Techniques in Guinea Pigs. J. Vis. Exp. (92), e51982, doi:10.3791/51982 (2014).

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