Precondizionamento ischemico remoto (RIP) è un metodo di tessuti condizionamento contro lo stress dannoso. Abbiamo stabilito un metodo di ischemia telecomando verso l'arto posteriore, gonfiando un bracciale sfigmomanometro per 5-10 min. Le capacità neuroprotettive del RIP sono stati dimostrati in un modello di degenerazione retinica nei roditori.
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Articolo metodologico
Arto Remote ischemica precondizionamento: una tecnica neuroprotettivo nei roditori
In questo articolo
Sommario
Abstract
Ischemia subletali protegge i tessuti contro successiva, ischemia più gravi attraverso la aumenta i meccanismi endogeni nel tessuto colpito. Ischemia subletali è stato anche dimostrato di upregulate meccanismi protettivi nei tessuti remoti. Un breve periodo di ischemia (5-10 minuti) nella arto posteriore dei mammiferi induce risposte auto-protettivo nel cervello, polmoni, cuore e retina. L'effetto è noto come precondizionamento ischemico remota (RIP). E 'un modo terapeutico promettente per proteggere organi vitali, ed è già in fase di sperimentazione clinica per il cuore e il cervello lesioni. Questa pubblicazione illustra un metodo minimamente invasivo controllato di fare un arto - specificamente dell'arto posteriore di un ratto - ischemico. Un sfigmomanometro sviluppato per l'uso nei neonati umani è collegato ad un misuratore di pressione manuale e utilizzato per applicare pressione 160 mmHg attorno alla parte superiore degli arti posteriori. Una sonda progettato per rilevare la temperatura della pelle è utilizzato per verificare l'ischemia, registrando il calo della temperatura della pelle causata da occlusione indotta pressione delle arterie delle gambe, e l'aumento della temperatura che segue rilascio del bracciale. Questo metodo di RIP offre protezione alla retina topo contro i danni indotti luce brillante e degenerazione.
Introduzione
La sopravvivenza di più, forse tutti, i tessuti a fronte di stress metabolico può essere migliorata prima condizionata con un periodo di ischemia subletale 1,2. Precondizionamento ischemico (IP) in termini pratici è l'esposizione del tessuto di ischemia subletali, prima che le esperienze tessuto stressanti più gravi, ad esempio un successivo insulto ischemico. In modelli animali, IP fornisce una protezione notevole al cervello, retina, cuore e polmoni 3-6. Di conseguenza, le osservazioni in pazienti colpiti da ictus hanno mostrato un legame tra precedenti attacchi ischemici transitori e migliori risultati clinici 7,8. IP protegge ....
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Protocollo
Affermazione Etica: Il protocollo segue le linee guida per la cura degli animali dell'Università di Sydney, AEC # 5657. Anestesia è stato approvato dal comitato etico degli animali (Università di Sydney, AEC # 5657).
1. apparecchiature Preparazione
- Utilizzare in tempo reale il monitoraggio della temperatura della pelle. Accendere computer e hardware di acquisizione dati.
- Software di registrazione della temperatura aperta e regolare impostazione temperatura tra 30-35 ° C e la frequenza di campionamento per ogni 100 msec.
- Opzionale: Inserire termometro rettale per garantire la temperatura interna rimane st....
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Risultati
Un bracciale di pressione sanguigna elevata sopra 160 mmHg blocca il flusso di sangue al arto posteriore come si vede chiaramente nella figura 1B. La mancanza di ossigenazione dei tessuti determinato una riduzione temperatura del piede dell'animale per un protocollo ischemia-riperfusione (Figura 2). La temperatura del piede (33 ° C) è stata inferiore a quella temperatura interna ed affidabile ridotta durante l'elevazione pressione della cuffia (31 ° C), che sorge quando il bracciale è s.......
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Discussione
Roditore ischemia degli arti posteriori è stata indotta con successo con uno sfigmomanometro manuale e cuff fornire neuroprotezione ai fotorecettori della retina. Un risultato in linea con ischemico condizionata indotto la protezione dei fotorecettori da un infortunio leggero 9,28.
In sostanza, l'ischemia a distanza provoca breve ossigeno privazione ai tessuti. Quindi, a distanza precondizionamento ischemico ha molte somiglianze con condizionata ischemica o tolleranza ischemic.......
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Dichiarazioni
L'autore non ha nulla da rivelare.
Ringraziamenti
L'autore è grato per l'assistenza della signora Sharon Spana (Università di Sydney) nel monitoraggio, nella gestione e nella sperimentazione dei roditori. L'autore desidera ringraziare il Prof. Jonathan Stone e il Dr. Dan Johnstone per l'assistenza nella preparazione di questo manoscritto. Il supporto per il finanziamento del dottorato è stato fornito dall'Università di Sydney e dall'Australian Center for Excellence in Vision.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Sfigmomanometro aneroide manuale DuraShock serie Gold | Welch Allyn | DS56 | Sfigmomanometro manuale |
| Neonato [misura 2] 1 tubo, confezione da 10 | Welch Allyn | 5082-102-1 | Bracciale per la pressione sanguigna degli arti |
| Adattatore Luer lock | Welch Allyn | 5082-178 | Adattatore per bracciale neonatale |
| Pod termistore AD | Instruments | Unità di temperatura cutanea | ML 309 |
| Sonda per la temperatura della pelle | AD Instruments | MLT 422/A | |
| Powerlab, hardware di acquisizione a 4 canali | AD Instruments | PL 35044 | |
| Sistema di coperte omeotermiche con sonda flessibile | Harvard Appartus | 507222F | |
| Asciugamano | opzionale: ischemia remota da sveglio | ||
| Isoflo - 100% isoflurano (250 ml) | Abbot Animal Health | 05260-05 | opzionale: anestetico per inalazione ischemia remota |
| Ketamil - ketamina 100 mg/ml (50 ml) | Troy Laboratories Pty Ltd | opzionale: ischemia remota anestetica iniettabile | |
| Xylium - Xilazina 100 mg/ml (50 ml) | Troy Laboratories Pty Ltd | opzionale: ischemia remota anestetica iniettabile |
Riferimenti
- Meller, R., Simon, R. P. Tolerance to Ischemia-an Increasingly Complex Biology. Translational Stroke Research. 4 (1), 40-50 (2013).
- Sun, J., et al.
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Ristampe e permessi
