Descriviamo una nuova tecnica per il trapianto addominale eterotopico cuore-polmone (HAHLT) nei ratti. La configurazione del trapianto si traduce in una circolazione dell'innesto parzialmente caricata, consentendo una valutazione funzionale diretta. Questo modello può essere impiegato per studi acuti o cronici sulla funzione e sullo stato immunologico del trapianto trapiantato.
È richiesta un abbonamento a JoVE per visualizzare questo contenuto. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Articolo metodologico
Rat eterotopico addominale Cuore / Trapianti Single-polmone in una configurazione del volume-caricato
In questo articolo
Sommario
Abstract
Qui, descriviamo una nuova tecnica per il trapianto addominale eterotopico cuore-polmone (HAHLT) nei ratti. La configurazione dell'innesto di trapianto prevede l'anastomosi della vena cava inferiore (IVC) del donatore rispetto all'IVC ricevente e dell'aorta ascendente (Ao) del donatore all'Ao addominale del ricevente. I lobi polmonari superiori e medi destri sono conservati e funzionano come condotti per il flusso sanguigno dal cuore destro al cuore sinistro.
Ci sono diversi vantaggi nell'usare questa tecnica, e si presta a una vasta gamma di applicazioni. Poiché l'innesto viene trapiantato in una configurazione che consente il carico di volume diamico, la funzione cardiaca può essere valutata direttamente in vivo. L'uso di cateteri di conduttanza pressione-volume consente la caratterizzazione dei parametri emodinamici dipendenti dal carico e indipendenti dal carico. L'innesto può essere convertito in una configurazione caricata applicando un morsetto all'IVC infraepatico del ricevente. Descriviamo tecniche chirurgiche modificate sia per le operazioni del donatore che per quelle del ricevente e una strategia ideale di protezione del miocardio. A seconda dell'obiettivo sperimentale, questo modello può essere adattato per l'uso in studi sia acuti che cronici sulla funzione del trapianto, sullo stato immunologico e sulle condizioni di carico ventricolare variabili. Le vie aeree che conducono al polmone trapiantato sono preservate e consentono la riventilazione polmonare acuta. Ciò facilita l'analisi degli effetti del sangue misto venoso e arterioso che fornisce perfusione coronarica al trapianto.
Un limite di questo modello è la sua complessità tecnica. C'è una curva di apprendimento significativa per i nuovi operatori, che idealmente dovrebbero essere guidati nella tecnica. Un background di formazione chirurgica è vantaggioso per coloro che desiderano applicare questo modello. Nonostante la sua complessità, miriamo a presentare il modello in un formato chiaro e facilmente applicabile. A causa della somiglianza fisiologica di questo modello con il trapianto ortotopico e della sua vasta gamma di applicazioni di studio, è probabile che lo sforzo investito nell'apprendimento della tecnica valga la pena.
Introduzione
Il primo modello di roditore di trapianto di cuore addominale eterotopico (HAHT) è stato descritto da Abbott e colleghi nel 19641. Questa tecnica, e le successive modifiche, sono state ampiamente applicate per caratterizzare la funzione dell'innesto di trapianto e lo stato immunologico. La maggior parte delle tecniche HAHT descritte coinvolge un cuore non carico di volume2,3. Sono stati descritti modelli di HAHT che coinvolgono ventricoli carichi di volume, ma sono spesso limitati in uno o più aspetti.
Il trapianto eterotopico di cuore-polmone addominale (HAHLT) con un ventricolo sinistro (LV) carico di volume è stato ....
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Protocollo
Tutti gli animali sono stati alloggiati e curati in conformità con le linee guida istituzionali per la cura e l'uso di animali da laboratorio nazionale e. Approvazione etica per questo protocollo è stato concesso dalla University of Comitato Animal Care della Columbia Britannica. Maschio, ratti Sprague-Dawley di peso compreso tra 300-450 g sono stati utilizzati per questo protocollo.
1. donatori Operazione
- Hanno circa 100 ml di cardioplegia (RT) in vaso cilindrico collegato alla (IV) tubi catetere endovenoso lungo da un rubinetto a 3 vie. Utilizzare un supporto per elevare il matraccio a circa 80 centimetri al di sopra dell....
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Risultati
La tecnica HAHLT sopra descritta è molto tecnico e richiede grande attenzione ai dettagli. Tabella 1 evidenzia alcuni dei fattori chiave associati con successo contro le procedure fallimentari, e può essere utilizzato come una guida per la risoluzione di problemi tecnici.
Dopo l'aorta destinatario è sbloccata, l'innesto arterie coronarie dovrebbero essere considerati a riempirsi di sangue ossigenato. Di conseguenza, il miocardio dovrebbe diventare rosa e ben irrorato.......
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Discussione
Il successo con la tecnica descritta qui basarsi su diversi fattori. Key tra i quali sarà garantire la stabilità di entrambi i donatori e riceventi, adottando meticolosa tecnica operatoria che è sicuro e associata con una minima perdita di sangue, garantendo completo arresto cardioplegico con raffreddamento trapianto uniforme, riducendo al minimo il tempo ischemico totale, e adeguatamente de-onda l'innesto. Come riconosciuto in precedenza, la complessità tecnica della tecnica è il suo limite principale.
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
Mark J. Kearns riceve sostegno da parte del personale medico del programma UBC Investigator (aggiudicati attraverso il Royal College dei Medici Chirurghi del Canada), e la UBC 4YF Dottorato Fellowship.
John H. Boyd è un Sanitorium associazione nazionale e Michael Smith Fondazione per la ricerca sulla salute Scholar. Finanziamenti attraverso CIHR. Gli autori desiderano ringraziare il Dr. M. Allard e Richard Wamboldt per la loro assistenza con l'installazione e manutenzione di apparecchiature di perfusione.
....Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Celsior Cardioplegic Soution | Genzyme | La soluzione viene mantenuta in ghiaccio durante tutta la procedura. Prepariamo la nostra soluzione, con lievi modifiche. | |
| Ventilatore per roditori | Apparecchio Harvard | modello 683 | |
| Monitor dei segni vitali | Nonin | modello 9847V | Visualizza SpO2 e frequenza cardiaca. |
| Cannule IV | Jelco | 3063 | 24 - 26 G x 3/4" cannule. |
| Tubo IV | CareFusion | MP9259-C | Tubo di collegamento di lunghezza corta (18 cm). |
| Clip chirurgiche | Teleflex Medical | 001204 | Clip di legatura in titanio Horizon. |
| Suture | Ethicon, Sharpoint | LA54G, AK-0107 | bobina di seta 3-0 e sutura 9-0 in prolene (a braccio singolo, ago DR5). |
| Strumenti chirurgici | Non applicabile | Non applicabile | Gli strumenti utilizzati sono generici e possono essere acquistati da qualsiasi azienda di forniture chirurgiche. |
Riferimenti
- Abbott, C. P., Lindsey, E. S. A technique for heart transplantation in the rat. Arch Surg. 89 (1964), 649-652 (1964).
- Ma, Y., Wang, G. Comparison of 2 heterotopic heart transplant techniques in rats: cervical and abdominal heart. Exp Clin Transplant.
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Ristampe e permessi
Esplora altri articoli
Trapianto eterotopico addominale di cuore e polmonetrapianto di cuore e polmone di rattoconfigurazione di carico volumetricoanastomosi della vena cava inferioreanastomosi dell'aorta ascendentecatetere di conduttanza pressione-volumestrategia di protezione miocardicari-ventilazione polmonare acutavalutazione dinamica del carico volumetricorequisiti di formazione chirurgica
