L'encefalopatia ipossico-ischemica a seguito di asfissia perinatale può essere studiata utilizzando modelli animali. Dimostriamo le procedure necessarie per stabilire un modello di suinetto di encefalopatia ipossico-ischemica neonatale.
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Articolo metodologico
Un modello di Piglet neonatale Hypoxic-ischemica Encefalopatia
In questo articolo
Sommario
Abstract
L'asfissia di nascita, che provoca ipossico-ischemica encefalopatia (HIE), incide per 0,66 milioni di morti nel mondo ogni anno, circa un quarto dei 2,9 milioni di morti neonatali nel mondo. Modelli animali di HIE hanno contribuito alla comprensione della fisiopatologia di HIE, e hanno messo in evidenza il processo dinamico che si verificano lesioni cerebrali a causa di asfissia perinatale. Così, studi su animali hanno suggerito una finestra di tempo per strategie di trattamento post-insulto. L'ipotermia è stato testato come trattamento per Holiday Inn Express in modelli pdiglet e successivamente dimostrato efficace in studi clinici. Varianti del modello sono stati applicati nello studio di metodi neuroprotettive adiuvanti e studi suinetti di xeno e melatonina hanno portato alla fase clinica I e II della sperimentazione 1,2. Il modello porcellino HIE è ulteriormente utilizzato per studi resuscitation- e emodinamici neonatali nonché in ricerche di anossia cerebrale a livello cellulare. Tuttavia, è tecnicamente difficileModello e variazioni nel protocollo può provocare o lesione cerebrale troppo lieve o troppo severa. In questo articolo, abbiamo dimostrato le procedure tecniche necessarie per la creazione di un modello stabile di maialino neonatale HIE. In primo luogo, il maialino neonato (<24 ore vecchio, mediano peso 1500 g) è anestetizzato, intubato, e monitorato in una configurazione paragonabile a quella che si trova in una terapia intensiva neonatale. Globale ipossia-ischemia è indotta abbassando la frazione di ossigeno inspiratorio per raggiungere ipossia globale, ischemia attraverso l'ipotensione e un EEG ampiezza linea piatta integrata (AEEG) indicativa di ipossia cerebrale. La sopravvivenza è promosso regolando l'ossigenazione in base alla risposta aEEG e la pressione sanguigna. Lesione cerebrale è quantificato istopatologia e la risonanza magnetica dopo 72 ore.
Introduzione
L'asfissia perinatale è una condizione grave e spesso imprevisti associati con ipossico-ischemica encefalopatia (HIE). L'obiettivo generale di questo protocollo è quello di dimostrare un modello di sopravvivenza dei suinetti di encefalopatia ipossico-perinatale ischemica. Questo modello può essere utilizzato per studiare l'effetto di vari gradi di ipossia-ischemia sul cervello neonatale e di trattamenti sperimentali in neuropatologia, la risonanza magnetica e spettroscopia (MRI e MRS) e biomarcatori nei fluidi corporei come sangue, liquido cerebrospinale e nelle urine . Il modello è anche dimostrato utile per studiare il sistema cardiovascolare, respirato....
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Protocollo
Il presente protocollo è stato approvato dal danese esperimenti con gli animali. Tutti gli animali sono stati anestetizzati prova durante tutta la procedura. La riproduzione di questo protocollo deve essere effettuata in conformità con l'etica nazionali e le linee guida sul benessere degli animali, e approvato dai comitati etici locali.
1. Gli animali
- Suinetti Landrace Danese <24 ore vecchio peso di circa 1.500 - 2.000 g.
2. Anestesia e manutenzione Fluidi
- Preparare le attrezzature necessarie per l'anestesia (Figura 1): una maschera per l'amministrazione....
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Risultati
Gli effetti dell'ipossia-ischemia sul cervello che si verificano durante l'insulto indotto sono documentate registrando la traccia dall'AEEG. Un aEEG traccia rappresentativa è mostrato in Figura 6.
Figura 6. Rappresentante traccia aEEG. Bassa ampiezza a causa di ipossia-ischemia.
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Discussione
A causa della sua complessità, il modello descritto può essere attuata solo in strutture accreditate e con esperienza nella ricerca animale. L'approvazione da parte dei comitati etici locali deve essere ottenuto prima dell'inizio degli esperimenti, ed ottimale del benessere degli animali deve essere garantita in ogni momento. Poiché il modello è basato sulla sopravvivenza degli animali sperimentali, è importante che un ambiente sterile viene mantenuta durante procedure invasive per prevenire le infezioni.
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
Gli autori desiderano ringraziare John Kristensen e Søren Braad Andersen del Dipartimento di Comunicazione, Ospedale Universitario di Aarhus, Danimarca, per il loro eccezionale aiuto con le riprese e il montaggio. Il tecnico animale Diana Gyldenløve e la veterinaria Birgitte Kousgaard, Istituto di Medicina Clinica dell'Ospedale Universitario di Aarhus, Danimarca, per l'assistenza nella cura degli animali. Questo studio è stato sostenuto dalla Fondazione Lundbeck, dalla Fondazione Laerdal per la Medicina Acuta, dalla Fondazione per la Ricerca della Regione della Danimarca Centrale, dalla Fondazione Augustinus, dalla Fondazione Aase e Ejnar Danielsens, dall'Istituto di ....
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Coperta pediatrica Warm-touch | Covidien | 5030840 | |
| Adesivo Apertrue Drape | Barrier | 915447 | |
| Utility Drape (sterile) 75x80 cm | Barriera | 800530 | |
| Neoflon | BD - Luer | 391350 | |
| Laringoscopio | Miller | 85-0045 | |
| Tubo endotracheale 2,5 mm | Covidien | 111-25 | |
| Tubo endotracheale 3,0 mm con cuffia | Unomedical | MM61110030 | |
| Tubo endotracheale 3,5 mm con cuffia | Unomedical | MM61110035 | |
| Macchina per anestesia | GE Healthcare | 1009-9002-000 | |
| EEG - elettrodi/elettrodo ad ago sottocutaneo monouso | Cephalon | ACCE120550 | |
| ECG - elettrodi | medtronic | 3010107-003 | |
| Elettrodi ECG per MR | philips | ACCE120550 | |
| Campionatore di sangue arterioso - aspiratore | Radiometro medico ApS | 956552 | |
| Poliuretano Catetere per vena ombelicale (5 Fr/Ch) | Covidien | 8888160341 | |
| Catetere per vena ombelicale in poliuretano (3,5 Fr/ch) | Covidien | 8888160333 | |
| Set di suture (misura 3-0) | Covidien | 8886 623341 | |
| BD Ago spinale 0,7x38mm | Aghi BD | 405254 | |
| Gas con 96% azoto / 4% | ossigeno Aria Liquide | su ordinazione | |
| Sistema NeuroMonitor (CFM) | Natus Medical Incorporated | OBM70002 |
Riferimenti
- Chakkarapani, E., et al. Xenon enhances hypothermic neuroprotection in asphyxiated newborn pigs. Annals of. 68, 330-341 (2010).
- Robertson, N. J., et al. Melatonin augments hypothermic neuroprotection in a perinatal asphyxia model. <....
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Ristampe e permessi
