La tecnica della cuffia accorcia e facilita il modello di trapianto eterotopico di cuore cervicale nei topi, evitando anastomosi di sutura tecnicamente impegnative di piccoli vasi. I dettagli tecnici mostrati in questo video paper dovrebbero consentire ai ricercatori di stabilire questo modello nei loro laboratori.
È richiesta un abbonamento a JoVE per visualizzare questo contenuto. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Articolo metodologico
Eterotopico cervicale trapianto cardiaco nei topi
In questo articolo
Sommario
Abstract
Il trapianto eterotopico di cuore cervicale nei topi è uno strumento prezioso nella ricerca sui trapianti e cardiovascolare. La tecnica della cuffia semplifica notevolmente questo modello evitando difficili anastomosi di sutura di piccoli vasi, riducendo così il tempo di ischemia calda. Rispetto all'impianto di innesto addominale, il modello cervicale è meno invasivo e l'innesto impiantato è facilmente accessibile per ulteriori esami di follow-up. Le anastomosi vengono eseguite tirando l'aorta ascendente dell'innesto sopra la cuffia con l'arteria carotide comune del ricevente e tirando l'arteria polmonare principale sopra la cuffia con la vena giugulare esterna. La selezione della dimensione appropriata del bracciale e la completa mobilizzazione dei vasi sono importanti per una rivascolarizzazione di successo. Il danno da ischemia-riperfusione (I/R) può essere ridotto al minimo perfondendo l'innesto con una soluzione cardioplegica e mediante ipotermia. In questo articolo, forniamo dettagli tecnici per una tecnica di cuffia semplificata e migliorata, che dovrebbe consentire ai chirurghi con competenze microchirurgiche di base di eseguire la procedura con un alto tasso di successo.
Introduzione
Il modello di trapianto di cuore è spesso utilizzato per studiare / R-infortunio io, rigetto post-trapianto vasculopatia e l'efficienza degli agenti immunomodulatori. Modelli murini uniscono numerosi vantaggi come la immunologico noto e background genetico, la disponibilità di molti ceppi inbred e transgenici e relativamente bassi costi sperimentali.
Nel 1973, una tecnica di trapianto di cuore addominale nei topi è stato descritto da Corry et al 1. In questo modello innesti vengono rivascolarizzati entro end-to-side anastomosi dell'aorta ascendente alla aorta addominale del destinatario e della principale arter....
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Protocollo
Tutti gli esperimenti sono stati approvati dal tedesco Heart Center di Monaco di Baviera e il governo della Baviera, Germania (Gz. 55.2-1-54-2532.3-17-13). Gli animali sono stati alloggiati in una specifica struttura gratuito patogeno e hanno ricevuto assistenza umana in conformità ai "Principi di laboratorio cura degli animali" formulate dalla Società Nazionale per la ricerca medica e la "Guida per la cura e l'uso di animali da laboratorio" fornita dalla National Academy di Scienze e pubblicato dal National Institutes of Health (NIH pubblicazione n. 86-23, rivisto 1985).
NOTA: Un set completo di strumenti di microchirurgia sterili, tra cui due pinze curve....
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Risultati
La nostra squadra ha potuto svolgere con successo la tecnica descritta dopo circa 20 interventi chirurgici di formazione. La parte più difficile è per rovesciare la parete del vaso della carotide sul bracciale, perché gira facilmente avanti e tentativi multipli può portare alla lacerazione della parete. Dopo il periodo di formazione, il tempo operatorio totale media era di 60 ± 8 min. Circa 20 minuti sono necessari per la raccolta dei donatori, 25 minuti per la preparazione dei vasi cervicali e 15 minuti per anastomosi .......
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Discussione
Abbiamo completato oltre 200 trapianti cardiaci con una percentuale di successo superiore al 90% in diversi contesti sperimentali. Con la tecnica qui descritta, la procedura completa può essere eseguita entro 60 minuti da un chirurgo esperto. Preparando i vasi cervicali prima reperimento di organi, il tempo totale ischemia innesto può essere limitata a 20 min. Tempo per l'impianto (tempo di ischemia calda) è molto più breve con la tecnica gambetto rispetto alla tecnica di sutura 16.
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
M.-A. Deutsch è supportato da Dr. Rusche Forschungsprojekt (2014) Deutsche Stiftung für Herzforschung e Deutsche Gesellschaft für Thorax- Herz- und Gefäßchirurgie. M. Krane è supportato da Deutsche Stiftung für Herzforschung (F/37/11), Deutsches Zentrum für Herz Kreislauf Forschung (DZHK B 13-050A; DZHK B 14-013SE) e Deutsche Forschungsgemeinschaft (KR3770/7-1; KR3770/9-1)
....Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Pinza JFC-7.2 | S& T | P-00036 | Punta curva 0,20 mm |
| Dilatatore per vasi D-5a | S& T | S-00124 | |
| Forbice Adventita | S & T | S-00102 | |
| Morsetto vascolare B-1V | S& T | S-00396 | |
| Yasargil Clip | Peter Lazic | 65.097 | 3,5 mm di lunghezza |
| Pinze bipolari | Micromed | 148-100-011 | punta 0,25 mm |
| Tubi in poliimmide | River Tech Medical | 19-24 calibro | |
| 8,0 legature di seta | Catgut | ||
| Custodiol HTK soluzione | Essential Pharmaceuticals |
Riferimenti
- Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. Heart transplantation in congenic strains of mice. Transplant Proc. 5, 733-735 (1973).
- Chen, Z. H. A technique of cervical heterotopic heart transplantation in mice. Transplantation. 52, 1099-1101 (1991).
- Martins, P.....
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Ristampe e permessi
