Summary

चूहे में Heterotopic सरवाइकल हृदय प्रत्यारोपण

Published: August 25, 2015
doi:

Summary

The cuff technique shortens and facilitates the model of heterotopic cervical heart transplantation in mice by avoiding technically challenging suture anastomoses of small vessels. The technical details shown in this video paper should allow researches to establish this model in their laboratories.

Abstract

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies this model by avoiding challenging suture anastomoses of small vessels thereby reducing warm ischemia time. In comparison to abdominal graft implantation the cervical model is less invasive and the implanted graft is easily accessible for further follow-up examinations. Anastomoses are performed by pulling the ascending aorta of the graft over the cuff with the recipient’s common carotid artery and by pulling the main pulmonary artery over the cuff with the external jugular vein. Selection of appropriate cuff size and complete mobilization of the vessels are important for successful revascularization. Ischemia-reperfusion (I/R) injury can be minimized by perfusing the graft with a cardioplegic solution and by hypothermia. In this article, we provide technical details for a simplified and improved cuff technique, which should allow surgeons with basic microsurgical skills to perform the procedure with a high success rate.

Introduction

हृदय प्रत्यारोपण मॉडल अक्सर मैं / आर-चोट, allograft अस्वीकृति, पोस्ट-प्रत्यारोपण Vasculopathy और immunomodulating एजेंटों की दक्षता की जांच करने के लिए प्रयोग किया जाता है। माउस मॉडल में जाना जाता प्रतिरक्षात्मक और आनुवंशिक पृष्ठभूमि, कई जन्मजात और ट्रांसजेनिक तनाव और अपेक्षाकृत कम प्रयोगात्मक लागत की उपलब्धता जैसे कई फायदे गठबंधन।

1973 में, चूहों में पेट हृदय प्रत्यारोपण की एक तकनीक पहले Corry एट अल 1 से वर्णित किया गया था। इस मॉडल में ग्राफ्ट प्राप्तकर्ता के उदर महाधमनी के लिए और अवर रग Cava करने के लिए मुख्य फेफड़े के धमनी के आरोही महाधमनी के अंत करने के पक्ष anastomoses द्वारा revascularized कर रहे हैं। 1991 में, चूहों में गर्भाशय ग्रीवा के हृदय प्रत्यारोपण के लिए एक सिवनी तकनीक चेन एट अल 2 से वर्णित किया गया था। इस मॉडल में एक प्रतिगामी कोरोनरी धमनी छिड़काव जीआर के आरोही महाधमनी करने के लिए प्राप्तकर्ता के कैरोटिड धमनी के सम्मिलन द्वारा स्थापित हैपिछाड़ी। शिरापरक रक्त सही आलिंद, सही वेंट्रिकल में कोरोनरी साइनस के माध्यम से नालियों और प्राप्तकर्ता बाहरी गले की नस (चित्रा 1) में फेफड़े के धमनी के माध्यम से अलग हो जाता है। पेट भ्रष्टाचार दाखिल करने से इसकी तुलना में गर्भाशय ग्रीवा मॉडल कम आक्रामक है और भ्रष्टाचार के सतही स्थान अतिरिक्त अनुवर्ती परीक्षाओं (जैसे टटोलने का कार्य, इकोकार्डियोग्राफी, intravital प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी) 3,4 के लिए एक बहुत ही आसान पहुँच सक्षम बनाता है।

तकनीकी सुधार 5,6 के बावजूद, इस मॉडल की एक अधिक व्यापक उपयोग सम्मिलन रिसाव और घनास्त्रता के एक उच्च घटना के साथ छोटे जहाजों के sutured anastomoses प्रदर्शन करने के लिए तकनीकी कठिनाइयों के कारण सीमित किया गया है। 1991 में, Matsuura एट अल। पोत दीवार बहुत ग्रीवा हृदय प्रत्यारोपण 7 के मॉडल सुविधा है, जो एक कृत्रिम सिलेंडर, पर everted है जिसमें कफ तकनीक की शुरुआत की। तकनीक फू थाrther गुर्दे 8, अग्नाशय 9, अंग 10, यकृत 11,12, फेफड़ों 13,14 और नाड़ी प्रत्यारोपण 15 सहित विभिन्न प्रयोगात्मक प्रत्यारोपण मॉडल के लिए अपनाया। सिवनी तकनीक की तुलना आवश्यक anastomoses के लिए समय और, इस प्रकार, गर्म ischemia के समय कम है और में कफ तकनीक 16 का उपयोग काफी कम संवहनी उलझने हैं। इसके अलावा, यह एक उच्च सफलता दर के साथ कार्रवाई करने के लिए microsurgery में थोड़ा प्रशिक्षण के साथ सर्जनों सक्षम बनाता है। कफ तकनीक का एक नुकसान यह है कि मस्तिष्क छिड़काव बदल सकता है, जो आम मन्या धमनी की शर्त बंधाव है।

इस वीडियो को पत्र में हम चूहों में गर्भाशय ग्रीवा के हृदय प्रत्यारोपण के लिए एक बेहतर और सरल कफ तकनीक मौजूद है।

Protocol

सभी प्रयोगों जर्मन हार्ट केंद्र म्यूनिख और बावरिया, जर्मनी (gz। 55.2-1-54-2532.3-17-13) सरकार द्वारा अनुमोदित किया गया। पशु एक विशिष्ट रोगज़नक़ मुक्त सुविधा में रखे और चिकित्सा अनुसंधान के लिए राष्ट्रीय सोसायटी और ?…

Representative Results

हमारी टीम को सफलतापूर्वक लगभग 20 प्रशिक्षण सर्जरी के बाद वर्णित तकनीक प्रदर्शन कर सकता है। सबसे चुनौतीपूर्ण हिस्सा है कि यह आसानी से वापस flips और अधिक प्रयासों के दीवार की फाड़ करने के लिए नेतृत्व कर सकते…

Discussion

हम विभिन्न प्रयोगात्मक सेटिंग में 90% से अधिक सफलता दर के साथ 200 से अधिक हृदय प्रत्यारोपण पूरा कर लिया है। यहाँ वर्णित तकनीक के साथ, पूरी प्रक्रिया को एक अनुभवी सर्जन से 60 मिनट के भीतर किया जा सकता है। अंग क…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

M.-A. Deutsch is supported by Dr. Rusche Forschungsprojekt (2014) Deutsche Stiftung für Herzforschung and Deutsche Gesellschaft für Thorax- Herz- und Gefäßchirurgie. M. Krane is supported by Deutsche Stiftung für Herzforschung (F/37/11), Deutsches Zentrum für Herz Kreislauf Forschung (DZHK B 13-050A; DZHK B 14-013SE) and Deutsche Forschungsgemeinschaft (KR3770/7-1; KR3770/9-1)

Materials

Forceps JFC-7.2 S&T P-00036 Curved tip 0.20 mm
Vessel dilatator D-5a S&T S-00124
Adventita scissor S&T S-00102
Vascular clamp B-1V S&T S-00396
Yasargil Clip Peter Lazic 65,097 3.5 mm lenght
Bipolar forceps Micromed 148-100-011 tip 0.25 mm
Polyimide tubes River Tech Medical 19-24 gauge
8.0 silk ligatures Catgut
Custodiol HTK solution Essential Pharmaceuticals

Riferimenti

  1. Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. Heart transplantation in congenic strains of mice. Transplant Proc. 5, 733-735 (1973).
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Citazione di questo articolo
Ratschiller, T., Deutsch, M., Calzada-Wack, J., Neff, F., Roesch, C., Guenzinger, R., Lange, R., Krane, M. Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice. J. Vis. Exp. (102), e52907, doi:10.3791/52907 (2015).

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