마우스의 이소성 자궁 심장 이식
Summary
The cuff technique shortens and facilitates the model of heterotopic cervical heart transplantation in mice by avoiding technically challenging suture anastomoses of small vessels. The technical details shown in this video paper should allow researches to establish this model in their laboratories.
Abstract
The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies this model by avoiding challenging suture anastomoses of small vessels thereby reducing warm ischemia time. In comparison to abdominal graft implantation the cervical model is less invasive and the implanted graft is easily accessible for further follow-up examinations. Anastomoses are performed by pulling the ascending aorta of the graft over the cuff with the recipient’s common carotid artery and by pulling the main pulmonary artery over the cuff with the external jugular vein. Selection of appropriate cuff size and complete mobilization of the vessels are important for successful revascularization. Ischemia-reperfusion (I/R) injury can be minimized by perfusing the graft with a cardioplegic solution and by hypothermia. In this article, we provide technical details for a simplified and improved cuff technique, which should allow surgeons with basic microsurgical skills to perform the procedure with a high success rate.
Introduction
심장 이식 모델은 자주 I / R 상해, 동종 이식 거부 반응, 이식 후 혈관 및 면역 에이전트의 효율성을 조사하는 데 사용됩니다. 마우스 모델은 공지 된 면역 학적 및 유전 적 배경이 많은 근친 형질 전환 균주 및 상대적으로 낮은 비용의 실험 가용성과 같은 많은 이점을 결합한다.
1973 년 생쥐의 복부 심장 이식하는 기술이 먼저 코리 등 1에 의해 설명되었다. 이 모델에서 이식받는 사람의 복부 대동맥과 하대 정맥에 주 폐동맥의 상행 대동맥의 엔드 – 투 – 측 문합에 의해 revascularized된다. 1991 년 생쥐의 자궁 심장 이식 봉합 기술은 첸 등의 알 2에 의해 설명되었다. 이 모델에서 역행 관상 동맥의 관류는 GR의 상행 대동맥에받는 사람의 경동맥 동맥의 문합에 의해 설립선미. 정맥 혈액 우심방, 우심실에 관상 정맥동을 통해 배수 및받는 사람의 외부 경정맥 정맥 (그림 1)에 폐동맥을 통해 배출됩니다. 복부 이식 주입에 비해 자궁 모델은 덜 침습적이며, 이식의 표면 위치는 추가로 추적 검사 (예 촉진, 심장 초음파 검사, 생체 내에 형광 현미경) 3,4를위한 아주 쉽게 접근 할 수 있습니다.
기술 향상 5,6에도 불구하고,이 모델의보다 광범위한 사용은 문 합부 누출과 혈전증의 발생률이 높은과 작은 혈관의 봉합 문합을 수행하기 때문에 기술적 인 문제에 국한되고있다. 1991 년, 마츠우라 등. 혈관벽 크게 자궁 심장 이식 7의 모델을 용이하게 합성 실린더 위에 everted되는 커프 기술을 소개했다. 이 기술은 푸이었다rther 신장 (8), 췌장 (9), 사지 (10), 간 11, 12, 13, 14 폐 및 혈관 이식 (15) 등 다양한 실험 이식 모델에 채택했다. 봉합 기술에 비해 필요한 문합을위한 시간과, 따라서, 온 허혈 손상 시간이 짧고에 커프 (16)의 기술을 이용하여 상당히 적은 혈관 합병증이있다. 또한, 높은 성공률로 동작을 수행하도록 미세 작은 외과 훈련 할 수있다. 커프 기술의 단점은 대뇌 재관류를 변경할 수 경동맥의 결찰 필수이다.
이 비디오 논문에서는 생쥐의 자궁 심장 이식을위한 개선 및 단순화 된 커프 기술을 제시한다.
Protocol
Representative Results
Discussion
우리는 다양한 실험 설정에서 90 % 이상의 성공률과 200 개 이상의 심장 이식을 완료했습니다. 여기에 설명 된 기술로, 전체 절차는 숙련 된 의사에 의해 60 분 내에 완료 될 수있다. 장기 조달 전에 자궁 혈관을 제조함으로써, 총 그래프트 허혈 시간을 20 분으로 제한 할 수있다. 주입 (온 허혈 시간) 대 시간 봉합술 (16)에 비해 커프 기술을 이용하여 현저하게 짧다.
대신 ?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
M.-A. Deutsch is supported by Dr. Rusche Forschungsprojekt (2014) Deutsche Stiftung für Herzforschung and Deutsche Gesellschaft für Thorax- Herz- und Gefäßchirurgie. M. Krane is supported by Deutsche Stiftung für Herzforschung (F/37/11), Deutsches Zentrum für Herz Kreislauf Forschung (DZHK B 13-050A; DZHK B 14-013SE) and Deutsche Forschungsgemeinschaft (KR3770/7-1; KR3770/9-1)
Materials
| Forceps JFC-7.2 | S&T | P-00036 | Curved tip 0.20 mm |
| Vessel dilatator D-5a | S&T | S-00124 | |
| Adventita scissor | S&T | S-00102 | |
| Vascular clamp B-1V | S&T | S-00396 | |
| Yasargil Clip | Peter Lazic | 65,097 | 3.5 mm lenght |
| Bipolar forceps | Micromed | 148-100-011 | tip 0.25 mm |
| Polyimide tubes | River Tech Medical | 19-24 gauge | |
| 8.0 silk ligatures | Catgut | ||
| Custodiol HTK solution | Essential Pharmaceuticals |
Riferimenti
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