Farelerde Heterotopik Servikal Kalp Nakli
Summary
The cuff technique shortens and facilitates the model of heterotopic cervical heart transplantation in mice by avoiding technically challenging suture anastomoses of small vessels. The technical details shown in this video paper should allow researches to establish this model in their laboratories.
Abstract
The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies this model by avoiding challenging suture anastomoses of small vessels thereby reducing warm ischemia time. In comparison to abdominal graft implantation the cervical model is less invasive and the implanted graft is easily accessible for further follow-up examinations. Anastomoses are performed by pulling the ascending aorta of the graft over the cuff with the recipient’s common carotid artery and by pulling the main pulmonary artery over the cuff with the external jugular vein. Selection of appropriate cuff size and complete mobilization of the vessels are important for successful revascularization. Ischemia-reperfusion (I/R) injury can be minimized by perfusing the graft with a cardioplegic solution and by hypothermia. In this article, we provide technical details for a simplified and improved cuff technique, which should allow surgeons with basic microsurgical skills to perform the procedure with a high success rate.
Introduction
Kalp nakli modeli sıkça I / R-yaralanma, allogreft reddini, nakil sonrası vaskülopatisinin ve imünmodüller ajanların etkinliğini araştırmak için kullanılır. Fare modelleri bilinen immünolojik ve genetik geçmişleri, birçok kendilenmiş ve transgenik suşları ve nispeten düşük maliyetlerle deneysel durumu gibi birçok avantaj birleştirir.
1973 yılında, farelerde abdominal Kalp nakli bir teknik ilk Corry ark 1 tarafından tarif edilmiştir. Bu modelde greftler alıcının abdominal aorta ve vena kava inferior ana pulmoner arter çıkan aort uç-yan anastomoz ile revaskülarize edilmektedir. 1991 yılında, farelerde rahim kalp transplantasyonu için olan bir dikiş tekniği Chen ve ark 2 tarafından tarif edilmiştir. Bu modelde bir retrograd koroner arter perfüzyon gr çıkan aorta alıcının karotis arter anastomoz tarafından kurulanKıç. Venöz kan sağ atriuma, sağ ventrikül içine koroner sinüs yoluyla drene ve alıcı dış şahdamarından (Şekil 1) içine pulmoner arter yoluyla atılır. Karın greft implantasyonu ile karşılaştırıldığında servikal modeli daha az invaziv ve greft yüzeysel konumu ek izlem muayeneleri (örn palpasyon, ekokardiyografi, intravital floresan mikroskopi) 3,4 için çok kolay erişilebilirlik sağlar.
Teknik gelişmelere 5,6 olmasına rağmen, bu modelin daha yaygın kullanımı anastomoz kaçağı ve tromboz insidansının yüksek olan küçük damarların dikilir anastomoz gerçekleştirmek için teknik zorluklar nedeniyle sınırlı kalmıştır. 1991 yılında, Matsuura ve ark. damar duvarı büyük ölçüde servikal Kalp nakli 7 modelini kolaylaştıran bir sentetik silindir, üzerinde dışa dönük olduğu kaf tekniğini tanıttı. Tekniği fu oldurther renal 8, pankreas 9, bacak 10, hepatik 11,12, 13,14 akciğer ve damar nakli 15 de dahil olmak üzere çeşitli deneysel modeller için transplant kabul etmiştir. Dikiş tekniği ile karşılaştırıldığında gereken anastomozlar için zaman ve böylece sıcak iskemi süresi kısadır ve içinde manşet tekniği kullanılarak 16 daha az vasküler komplikasyonları vardır. Ayrıca, yüksek başarı oranı ile işlemi gerçekleştirmek için mikrocerrahi az eğitim ile cerrahlar sağlar. Manşet tekniğinin bir dezavantajı serebral perfüzyon değiştirebilir karotis arter, bir önkoşul ligasyonu olduğunu.
Bu videoyu yazıda farelerde servikal Kalp nakli için geliştirilmiş ve basitleştirilmiş manşet tekniği sunuyoruz.
Protocol
Representative Results
Discussion
Biz çeşitli deneysel ortamlarda% 90 üzerinde bir başarı oranı ile 200 kalp nakli tamamladık. Burada anlatılan teknik ile, tam bir prosedür, deneyimli bir cerrahın 60 dakika içinde yapılabilir. Organ ihale öncesi servikal damarları hazırlayarak toplam greft iskemi süresi 20 dakika ile sınırlı olabilir. Implantasyon (sıcak iskemi süresi) için zaman sütür tekniği 16 oranla manşet tekniği kullanılarak önemli ölçüde daha kısadır.
Bunun yerine sadece da…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
M.-A. Deutsch is supported by Dr. Rusche Forschungsprojekt (2014) Deutsche Stiftung für Herzforschung and Deutsche Gesellschaft für Thorax- Herz- und Gefäßchirurgie. M. Krane is supported by Deutsche Stiftung für Herzforschung (F/37/11), Deutsches Zentrum für Herz Kreislauf Forschung (DZHK B 13-050A; DZHK B 14-013SE) and Deutsche Forschungsgemeinschaft (KR3770/7-1; KR3770/9-1)
Materials
| Forceps JFC-7.2 | S&T | P-00036 | Curved tip 0.20 mm |
| Vessel dilatator D-5a | S&T | S-00124 | |
| Adventita scissor | S&T | S-00102 | |
| Vascular clamp B-1V | S&T | S-00396 | |
| Yasargil Clip | Peter Lazic | 65,097 | 3.5 mm lenght |
| Bipolar forceps | Micromed | 148-100-011 | tip 0.25 mm |
| Polyimide tubes | River Tech Medical | 19-24 gauge | |
| 8.0 silk ligatures | Catgut | ||
| Custodiol HTK solution | Essential Pharmaceuticals |
Riferimenti
- Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. Heart transplantation in congenic strains of mice. Transplant Proc. 5, 733-735 (1973).
- Chen, Z. H. A technique of cervical heterotopic heart transplantation in mice. Transplantation. 52, 1099-1101 (1991).
- Martins, P. N. Assessment of graft function in rodent models of heart transplantation. Microsurgery. 28, 565-570 (2008).
- Schramm, R., et al. The subepicardial microcirculation in heterotopically transplanted mouse hearts: an intravital multifluorescence microscopy study. J Thorac Cardiovasc Surg. 134, 210-217 (2007).
- Liu, F., Kang, S. M. Heterotopic heart transplantation in mice. J Vis Exp : JoVE. 238, (2007).
- Gong, W., et al. Introduction of modified cervical cardiac transplant model in mice. Exp Clin Transplant. 10, 158-162 (2012).
- Matsuura, A., Abe, T., Yasuura, K. Simplified mouse cervical heart transplantation using a cuff technique. Transplantation. 51, 896-898 (1991).
- Chen, H., Zhang, Y., Zheng, D., Praseedom, R. K., Dong, J. Orthotopic kidney transplantation in mice: technique using cuff for renal vein anastomosis. PloS one. 8, e77278 (2013).
- Maglione, M., et al. A novel technique for heterotopic vascularized pancreas transplantation in mice to assess ischemia reperfusion injury and graft pancreatitis. Surgery. 141, 682-689 (2007).
- Sucher, R., et al. Orthotopic hind-limb transplantation in rats. J Vis Exp : JoVE. , (2010).
- Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47-50 (1979).
- Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. Orthotopic liver transplantation in rats. J Vis Exp : JoVE. , (2012).
- Okazaki, M., et al. A mouse model of orthotopic vascularized aerated lung transplantation. Am J Transplant. 7, 1672-1679 (2007).
- Suzuki, H., Fan, L., Wilkes, D. S. Development of obliterative bronchiolitis in a murine model of orthotopic lung transplantation. J Vis Exp : JoVE. , (2012).
- Zou, Y., et al. Mouse model of venous bypass graft arteriosclerosis. Am J Pathol. 153, 1301-1310 (1998).
- Zhou, Y., Gu, X., Xiang, J., Qian, S., Chen, Z. A comparative study on suture versus cuff anastomosis in mouse cervical cardiac transplant. Exp Clin Transplant. 8, 245-249 (2010).
- Niimi, M. The technique for heterotopic cardiac transplantation in mice: experience of 3000 operations by one surgeon. J Heart Lung Transplant. 20, 1123-1128 (2001).
- Arras, M., Autenried, P., Rettich, A., Spaeni, D., Rulicke, T. Optimization of intraperitoneal injection anesthesia in mice: drugs, dosages, adverse effects, and anesthesia depth. Comp Med. 51, 443-456 (2001).
