Emodinamica Caratterizzazione di roditori modelli di ipertensione arteriosa polmonare

Summary

L'ipertensione arteriosa polmonare (PAH) è una malattia delle arteriole polmonari che porta alla loro obliterazione e allo sviluppo di insufficienza ventricolare destra. I modelli di roditori di PAH sono fondamentali per comprendere la fisiopatologia della PAH. Qui dimostriamo la caratterizzazione emodinamica, con cateterismo cardiaco destro ed ecocardiografia, nel topo e nel ratto.

Abstract

L'ipertensione arteriosa polmonare (PAH) è una malattia rara della vascolarizzazione polmonare caratterizzata da apoptosi delle cellule endoteliali, proliferazione della muscolatura liscia e obliterazione delle arteriole polmonari. Ciò a sua volta si traduce in insufficienza ventricolare destra (RV), con morbilità e mortalità significative. I modelli di PAH nei roditori, nel topo e nel ratto, sono importanti per comprendere la fisiopatologia alla base di questa rara malattia. In particolare, diversi modelli di PAH possono essere associati a diversi gradi di ipertensione polmonare, ipertrofia del ventricolo destro e insufficienza del ventricolo destro. Pertanto, una caratterizzazione emodinamica completa di topi e ratti con PAH è fondamentale per determinare gli effetti dei farmaci o delle modificazioni genetiche sulla malattia.

Qui dimostriamo le procedure standard per la valutazione della funzione ventricolare destra e dell'emodinamica in modelli di PAH sia di ratto che di topo. L'ecocardiografia è utile per determinare la funzione del ventricolo destro nei ratti, sebbene ottenere viste standard del ventricolo destro sia difficile nel topo sveglio. L'accesso per il cateterismo cardiaco destro è ottenuto dalla vena giugulare interna nei topi e nei ratti a torace chiuso. Le pressioni possono essere misurate utilizzando tubi in polietilene con un trasduttore di pressione del fluido o un catetere di pressione micromanometrico miniaturizzato. L'analisi dell'ansa pressione-volume può essere eseguita nel torace aperto. Dopo aver ottenuto l'emodinamica, il roditore viene soppresso. Il cuore può essere sezionato per separare la parete libera del ventricolo destro dal ventricolo sinistro (LV) e dal setto, consentendo una valutazione dell'ipertrofia del ventricolo destro utilizzando l'indice di Fulton (RV/(LV+S)). Quindi i campioni possono essere raccolti dal cuore, dai polmoni e da altri tessuti, se necessario.

Introduction

L'ipertensione arteriosa polmonare (PAH) è una malattia del sistema vascolare polmonare associata a infiltrazione di cellule infiammatorie, la proliferazione della muscolatura liscia e l'apoptosi delle cellule endoteliali. Questi cambiamenti si traducono in obliterazione delle arteriole polmonari, successivamente portando a ventricolo destro (RV) disfunzione e insufficienza cardiaca. Al fine di comprendere la fisiopatologia sottostante PAH e insufficienza RV in PAH, sono stati sviluppati una serie di diversi modelli, tra cui modelli genetici e farmacologici, per lo studio di questa malattia (recensito altrove ^1,2).

Di q....

Protocol

Tutte le procedure descritte seguono le linee guida per la cura degli animali della Duke University School of Medicine.

1. Prima di iniziare la procedura

Nota: prima di qualsiasi procedura di animali, in modo che l'autorizzazione istituzionale adeguato è stato ottenuto. Come per tutte le procedure, utilizzare appropriate antidolorifici per assicurare che non ci sia la sofferenza degli animali.

1. cateteri a filo con soluzione salina sterile eparinizzata (100 U / ml) per garantire la pervietà. Segnare un punto dalla punta del catetere equivalente alla lunghezza dal cuore alla metà del collo (circa 4....

Results

Come giusto cateterizzazione cardiaca nei roditori è in genere una procedura terminale che non è applicabile a follow-up longitudinale, l'ecocardiografia è un'ottima alternativa non invasiva per lo screening e il follow-up ^12. Mentre polmonare sistolica pressione arteriosa in PAH umana sulla ecocardiografia è di solito derivato da rigurgito della tricuspide che di solito è semplice da ottenere nella vista apicale, una tale visione non è affidabile ottenuto in roditori, impedendo la stima della pressione arter.......

Discussion

I protocolli qui descritti descrivono una caratterizzazione completa dell'emodinamica e della funzione ventricolare destra in modelli di ipertensione polmonare di roditori. Sebbene il cateterismo cardiaco destro, come descritto qui, sia una procedura terminale, la mortalità associata all'ecocardiografia è minima, il che consente lo screening e il follow-up della progressione della malattia. Tuttavia, analogamente ai pazienti con PH che hanno un marcato aumento della mortalità con anestesia¹⁷, nella nostra espe.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Sistema di imaging Vevo 2100 (120V)	VisualSonics, inc.	VS-11945
Vevo 2100	VisualSonics, inc.
Trasduttori meccanici ad alta frequenza	VisualSonics, inc.	MS250, MS550D, MS400
Gel per ultrasuoni Parker	Laboratori Inc.	01-08
PowerLab 4/35	ADInstruments	ML765
Labchart 8	ADInstruments
Trasduttore BP con rubinetto e cavo	ADInstruments	MLT1199
Kit di calibrazione del trasduttore BP	ADInstruments	MLA1052
Catetere a pressione Mikro-Tip per topo		Millar SPR-1000	Catetere alternativo disponibile da Scisense FT111B (topo) e FT211B (ratto)
Catetere a pressione Mikro-Tip per ratto	Millar	SPR-513	Catetere alternativo disponibile da Scisense FT111B (topo) e FT211B (ratto)
Millar Mikro-Tip  catetere ad ansa PV ultraminiaturizzato per topi	Millar	PVR-1035	Catetere alternativo disponibile da Scisense FT112 (topo)
Catetere ad ansa PV ultra miniaturizzato Millar Mikro-Tip per ratti	Millar	SPR-869	Catetere alternativo disponibile da Scisense FT112 (topo)
Sistema fotovoltaico Millar MPVS-300	Millar	MPVS-300
4-0 Treccia nera di seta Bobina da 100 iarde	Roboz Surgical	SUT-15-2
6-0 Treccia nera di seta Rocchetto da 100 iarde	Roboz Surgical	SUT-14-1
Forbici per iride, delicate, Forbici da dissezione Integra Miltex	VWR	21909-248
VWR, punta affilata/smussata	VWR	82027-588
VWR Forbici delicate, 4 1/2 "	VWR	82027-582
Emostati a due stelle, Excelta	VWR	63042-090
Formalina tamponata neutra	VWR	89370-094
Crotaline	Sigma	C2401
SU5416	Tocris Biosciences	3037
3.5X-45X Boom Stand Stereo microscopio zoom trinoculare	AmScope	SM-3BX
PE (tubo in polietilene)-10	Braintree Scientific Inc	PE10 36 FT
PE (tubo in polietilene)-50	Braintree Scientific Inc	PE50 36 FT
PE (tubo in polietilene)-60	Braintree Scientific Inc	PE60
	Kent Scientific	ACV-1205S
Piattaforma chirurgica multifunzionale Surgisuite	Kent Scientific	Surgisuite
	Kent Scientific	SURGI-5002
Camera di induzione per anestesia	VetEquip	941443
Contenitore per filtro per gas per anestesia	Kent Scientific	ACV-2001
Ogiva per roditori	VetEquip	921431