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Articolo metodologico

Preparazione facile di Internamente auto-assemblato Lipid particelle stabilizzati da nanotubi di carbonio

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DOI:

10.3791/53489

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19 febbraio 2016

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In questo articolo

Sommario

Segnaliamo un'applicazione intelligente di nanotubi di carbonio per la stabilizzazione cinetica di particelle lipidiche che contengono nanostrutture auto-assemblate nei loro nuclei. La preparazione di particelle lipidiche richiede concentrazioni piuttosto basse di nanotubi di carbonio che ne consentono l'uso in applicazioni biomediche come la somministrazione di farmaci.

Abstract

Vi presentiamo un metodo facile per preparare particelle lipidiche nanostrutturati stabilizzati con nanotubi di carbonio (CNT). A parete singola (incontaminato) e multi-pareti (funzionalizzati) CNT sono utilizzati come stabilizzatori per la produzione di emulsioni (O / W) olio-in-acqua di tipo Pickering. I lipidi cioè, Dimodan U e Phytantriol sono usati come emulsionanti, che in acqua in eccesso di auto-assemblano in fase Pn3m cubica bicontinuous. Questa fase altamente viscoso è frammentato in particelle più piccole che utilizzano un ultrasonicatore sonda in presenza di stabilizzanti tensioattivi convenzionali o CNT come fatto qui. Inizialmente, i nanotubi di carbonio (polvere) vengono dispersi in acqua seguita da un'ulteriore ultrasuoni con il lipide fuso per formare l'emulsione finale. Durante questo processo, i nanotubi di carbonio vengono rivestiti con molecole lipidiche, che a loro volta si presume circondare le goccioline lipidiche a formare un'emulsione particellare che è stabile per mesi. La dimensione media delle particelle lipidiche nanostrutturati CNT-stabilizzati è in submicron range, che regge bene il confronto con le particelle stabilizzata con tensioattivi convenzionali. Piccola dati angolo di raggi X dispersione conferma il mantenimento della fase cubica originale Pn3m nelle dispersioni lipidi CNT-stabilizzati rispetto alla fase lipidica puro (stato bulk). spostamento Blu e abbassamento delle intensità di G caratteristico e bande di CNT osservati in spettroscopia Raman G 'caratterizzano l'interazione tra CNT superficie e lipidi molecole. Questi risultati suggeriscono che le interazioni tra i CNT e lipidi sono responsabili per la loro stabilizzazione reciproca in soluzioni acquose. Poiché le concentrazioni di CNT impiegate per la stabilizzazione sono molto bassi e molecole lipidiche sono in grado di funzionalizzare i nanotubi di carbonio, la tossicità dei CNT dovrebbe essere insignificante mentre la loro biocompatibilità è notevolmente migliorata. Pertanto la presente approccio trova un grande potenziale in varie applicazioni biomediche, per esempio, per sviluppare sistemi nanocarrier ibridi per la consegna di multiple molecole funzionali come in terapia di combinazione o politerapia.

Introduzione

Nel corso degli ultimi decenni, la nanotecnologia è emerso come un potente strumento in particolare nel campo dello sviluppo preclinico della medicina per combattere le malattie noti come il cancro 1. In questo contesto, le strutture in nanoscala con dimensioni <1.000 nm sono ampiamente esplorato come veicolo di consegna di varie biomolecole attive come la droga, proteine, acidi nucleici, i geni e gli agenti di diagnostica per immagini 1-4. Queste biomolecole o sono incapsulati all'interno delle nanoparticelle o coniugati sulla superficie delle nanoparticelle e sono rilasciati al sito di azione trigger come pH o 5,6 temperatura. A....

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Protocollo

Attenzione: CNT utilizzati in questo lavoro sono sotto forma di nanoparticelle che possono avere rischi aggiuntivi rispetto ai loro omologhi di massa. L'inalazione di grafite, sia naturali che sintetici, può causare pneumoconiosi 62 simile a pneumoconiosi dei lavoratori del carbone. Inoltre, vi sono preoccupazioni relative alla tossicità di nanostrutture a base di carbonio e alcuni dei precedenti studi suggeriscono tossicità acuta e cronica associata con l'inalazione di CNT 63-68. Quindi, evitare l'inalazione di polvere fine CNT e gestire con grande cura. Se inalato, portare all'aria aperta. Se la respirazione è difficile, utilizzare l'ossigeno p....

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Risultati

I seguenti risultati rappresentano a) la stabilità di dispersioni, b) la distribuzione delle dimensioni delle particelle lipidiche, c) il tipo di auto-assemblaggio e d) la prova per il rivestimento lipidico del CNT. La stabilità delle dispersioni (figura 2) è stato monitorato utilizzando una fotocamera da 5 MP con auto-focus e flash LED.

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Discussione

Stabilizzazione delle particelle lipidiche
Tre differenti CNT vengono utilizzati per stabilizzare le dispersioni lipidi; due dei quali sono multi-murata e funzionalizzati con -OH e gruppi -COOH, e uno è unico murato e non funzionalizzati (incontaminata). Il CNT variato in formato come segue (diametro x lunghezza): MWCNT-COOH: 9.5 nm x 1,5 micron; MWCNT-OH: 8-15 nm x 50 micron; SWCNT: 1-2 nm x 1-3 micron. I nanotubi di carbonio in polvere sono stati dispersi in acqua dalla sonda ultra-sonicazione........

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Dichiarazioni

Non abbiamo nulla da rivelare.

Ringraziamenti

Vorremmo ringraziare il Dott Matthew J. Baker, ora presso l'Università di Strathclyde, Glasgow per il supporto con esperimenti Raman e Mr. Nick Gaunt per la sua prima opera di questo progetto.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Dimodan UDanisco15312Negozio a 4  °C. Non pericoloso. Irritante per gli occhi e la pelle.
Fitantriolo (> 95%, GC)TCI Europe N.V.P1674Negozio a 4  °C. Non pericoloso. Irritante per gli occhi e la pelle.
Nanotubi di carbonio a parete singola (90%)Nanostrutturato & Materiali amorfi, Inc.1246YJSConservare a temperatura ambiente. Lontano dalla luce diretta. Irritante per gli occhi, la pelle e le vie respiratorie.
Nanotubi di carbonio funzionalizzati con acido carbossilico a parete multipla (>  80% base Caron, >  8% acido carbossilico funzionalizzato)Sigma-Aldrich Co. LLC 755125Conservare a temperatura ambiente. Lontano dalla luce diretta. Provoca grave irritazione agli occhi. Può causare irritazione delle vie respiratorie.
Nanotubi di carbonio funzionalizzati idrossilati a parete multipla grafitati (99,9%)Nanostrutturato e Materiali amorfi, Inc. (NanoAmor)1224YJFConservare a temperatura ambiente. Lontano dalla luce diretta. Irritante per gli occhi, la pelle e le vie respiratorie.
Pluronic F127Sigma-Aldrich Co. LLC P2443BioReagent, adatto per colture cellulari. Non è una sostanza o miscela pericolosa. Conservare a temperatura ambiente.
Acetone (99,5%)Fisher Scientific 10134100Liquido facilmente infiammabile. Provoca grave irritazione agli occhi. Può causare sonnolenza o vertigini.
Barattoli con coperchi sciolti e avvolgenti (375  ml)VWR International Ltd216-3308
Becher, 1.000 mlFisher Scientific 12942161per impieghi gravosi, forma bassa, con beccuccio e graduazioni
Pipetta in vetro Pasteur (lunghezza 150 mm) con bulbo in latticeFisher Scientific 
Provetta per microcentrifuga tappo a scatto conico 1,5  mlFisher Scientific 
SpatolaFisher Scientific 
Agitatore magnetico riscaldanteFisher Scientific 
Barre di agitazione magnetiche (cilindriche, PTFE opaco, 30  mm x 7  mm (l x diametro))Fisher Scientific 
Ago (0,9 mm x 40  Terumo UK LtdMN-2038MQ
Set di supporti per storta - Con supporto, morsetto, base, asta, gomma a 3 ganasce e testa di sterzoCamlab Ltd, Regno Unito1177157
Attrezzatura per l'acqua MilliporeBarnstead Nanopure, Thermoscientific, USA
Progen Genfuge 24D Microcentrifuga digitaleProgen ScientificC-2400
Sonda ultra-sonicatore, con 13 mm SONICS, Vibracell,  Fotocamera USA
da 5 MP con autofocus e flash LEDSamsung Galaxy Fame Fotocamera
Spettrometro RamanHoriba Jobin-Yvon LabRAM HR800 Spettrometro
Mastersizer 3000 Malvern Instruments Ltd, Malvern, Regno Unito
Diffusione di raggi X a piccolo angolo (SAXS)Telecamera SAXSpace (Anton Paar, Graz, Austria), apparecchiature per la generazione di raggi X (ISO-DEBYEFLEX3003, GE Inspection Technologies GmbH), circuito chiuso dell'acqua (Chilly 35, HYFRA, Germania). 
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Riferimenti

  1. Peer, D., et al. Nanocarriers as an emerging platform for cancer therapy. Nature Nanotech. 2, 751-760 (2007).
  2. White, R. R., Sullenger, B. A., Rusconi, C. P. Developing aptamers into therapeutics. J. Clin. Invest. 106, 929-934 (2000).
  3. Itaka, K., Chung, U. I., Kataoka, K. ....

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Ristampe e permessi

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