Cilt Mikro-Greftler Üretimi için Yeni Bir Ayrıştırma Yöntemi sonra doku karakterizasyonu
Summary
protokol yeni bir yöntem, insan doku ayrıştırmak ve kollajen sünger ile birlikte, deri lezyonlarının tedavisinde kullanıma hazır insan biyo-kompleksleri doğuran otolog mikro greft oluşturmak açıklar. Bundan başka, bu sistem, mekanik ayrıştırma sonra farklı zamanlarda mikro greft hücre canlılığı korur.
Abstract
Birkaç yeni yöntemler akut ve kronik deri lezyonları için bir adım tedaviler sağlamak amacıyla, ameliyat sırasında otolog hücre süspansiyonları elde etmek için biyoteknoloji alanında geliştirilmiştir. Ayrıca, travma, diyabet, enfeksiyon ve diğer nedenlere bağlı kronik fakat akut yaraların yönetimi, zorlu kalır. Bu çalışmada, tek bir hastanın cilt dokusuna ve klinik uygulama otolog mikro greft oluşturmak için yeni bir yöntem açıklanmaktadır. Ayrıca, deri, de-epidermized dermis (DED) ve çok-organ ve / veya çok doku donörlerin dermis türetilen cilt dokusuna in vitro biyolojik karakterizasyonu de yapıldı. Bütün dokular bize canlı mikro greft elde etmek için izin, bu yeni protokolün göre ayrıştırılmış bulundu. Özellikle, bu yenilikçi protokol deri lezyonları uygulanacak hazır otolog mikro greftler ve kollajen sünger tarafından bestelenen biyo-kompleksleri oluşturmak mümkün olduğunu bildirdi. CliniBir bacak lezyon otolog biyo-komplekslerinin cal uygulaması da yeniden epitalization süreci ve lezyonun yumuşaklık hem de bir gelişme göstererek, bildirildi. Buna ek olarak, in vitro bir model bu sistem ile, mekanik ayrıştırma sonra hücre canlılığı, kültür kadar yedi (7) gün süre ile uzun süre devam eder gösterdi. Ayrıca ayrıştırma elde edilen hücre havuzu yüksek rejeneratif potansiyeli, doku yenilenmesi ve onarım süreçlerinde önemli bir rol meydana mezenkimal kök hücreleri dahil olmak üzere çeşitli hücre tiplerinin, oluştuğunu, akış sitometri analizi ile saptanmıştır. Son olarak, Ağar levhalarına kültüre Bu prosedür mikro greft kısırlığı tutar in vitro olarak gösterilmiştir. Özet olarak, klinisyen, uygun bir steril ve en sık görülen biyolojik scaffo tek başına ya da kombinasyon halinde uygulanabilir mikro greft kullanıma hazır tek bir adımda elde etmek için yeni bir reaktif yaklaşım, umut verici bir araç olabilir sonucunalds.
Introduction
Son yıllarda, birçok yeni yöntemler akut ve kronik deri lezyonlarında tek adım tedaviler sağlamak amacıyla ameliyat sırasında otolog hücre süspansiyonları elde etmek için biyoteknoloji alanında geliştirilmiştir. Ayrıca, travma, diyabet, enfeksiyonlar ve diğer nedenlere bağlı akut ama esas kronik yaraların yönetimi, zorlu kalır. Kronik yaralar sağlık sistemleri, dünya çapında 1 üzerinde çok büyük bir mali yük neden ciddi bir küresel sağlık sorunu haline gelmiştir montaj kanıtlar vardır.
deri lezyonlarının tedavisi başarı oranını artırmak için, (hücre geliştirme dahil) geniş bir manipülasyon olmaması ve steril koşullar bakımı hemen hasarlı alan üzerinde uygulanabilen bir hücresel süspansiyon oluşturmak için, gerekli olan Hastalar, böylece bu tür hücre fabrikalarında olarak temiz oda daha uzun bir işlem önler. Stküçük bir deri biyopsisi, öğütme, santrifüjleme ve diğer ayırma yöntemlerinin (örneğin, enzimatik veya mekanik) arasında Arting, sık sık bir büyüme ortamında kültürlenebilir bir hücresel süspansiyon elde etmek için kullanılır. Tüm bu yöntemler, genellikle hücre yapıları vurgulayarak ve hücre canlılığının bir azalmaya yol açan, uygulama, uzun bir süre gerektirir. Bir diğer önemli bir yönü zarar görmüş alanların onarmak, örneğin, klinisyenler tarafından kullanılmak üzere hazır bir otolog hücre süspansiyonu elde etmektir. Ayrıca, iyi otolog doku greftleri sonunda indüksiyon ve iletim 2, 3 ilkeleri ile alıcı sitesine hayatta transfer prosedürleri hayatta olduğu saptanmıştır. İdeal greft dokusu hazır olması ve düşük antigenesiti ve donör saha morbiditesi 4 olmalıdır.
Bu delillerden, bu çalışmanın ilk amacı için uygun otolog biyo-kompleksleri oluşturmak oldudoku onarımında klinik uygulama. Bu amaçla, bu protokol ile ayrıştırılmış edildi deri dokulardan başlayarak otolog mikro greft elde etmek için bir yeni bir yöntem tarif. Bir olgu sunumu da burada kollajen sünger ile birlikte bu protokolü tarafından elde edilen otolog mikro greftler bir klinik uygulama olarak tarif edilir. Bu yaklaşım, daha önce insan dokularıyla 5 mekanik ayrıştırma etkili olduğu rapor edilmiştir ve greft ve dermal dokularda 6,7 rejenerasyonu için hem de oral çene cerrahisi 8-10 bağlantı dokularının rejeneratif terapisi için klinik olarak kullanılmaktadır .
Buna ek olarak, bu çalışmanın ikinci amacı da bu protokol tarafından kendi ayrıştırma sonrası deri dokuların biyolojik karakterizasyonu oldu. Bu amaçla, cilt dokusuna farklı homolog numuneler farklı çoklu organ gövde alanından türetilmişve / veya çoklu doku bağış Emilia Romagna Bölge Cilt Bankası nakli için dokular (CNT 2013) hasat, işleme Ulusal Kuralları takip eden ve dağıtan işlenmiştir.
Olgu Sunumu:
Trafik kazası nedeniyle karmaşık bir travma gösteren 35 yaşındaki kadın hasta Ancona Hastanesi Yoğun Bakım Ünitesi'ne yatırıldı. Hastada bir açık yara ve eksternal fiksatör ile stabilize bir bileşik kırık bacak bir enfeksiyon gösterdi. Iki radikal debridman ve yara negatif basınç terapisi (VAC tedavisi) sonra temiz oldu ve periost sağlıklı göründü, biz kurtarma iki ay sonra protokol uygulandı. Bu sistem ile ayrıştırma sonra, elde edilen mikro-greftler, daha sonra lezyon tamir üzerindeki etkinliğini araştırmak için implante edildi kollajen sünger ile biyo-kompleksleri oluşturmak için kullanıldı.
Protocol
Representative Results
Discussion
Bu ön çalışma. Zaten mikro greftler implantların 9 etkinliğini, 10 optimize etmek için, diğer klinik uygulamalarda bildirilen Bu protokol ile elde edilen mikro greftler, kollajen sünger ile kombine edilebilir olduğunu gösterdi Özellikle, bu çalışma bio kapasitesini bildirdi komplekslerdeki klinik uygulamadan 30 gün sonra, bir bacak lezyon yara iyileşmesi adjuvan, mikro-greft ve kolajen süngeri oluşmuştur. Ayrıca, in vitro sonuçlar hemen mekanik ayrıştırma sonra da 24 saat ve …
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Yazarlar flow sitometri analizi gerçekleştirmek çalışmaya katkıda bulunmak için teşekkürler Dr. Federica Zanzottera istiyoruz.
Materials
| Rigenera Machine | Human Brain Wave | 79210R | |
| Rigeneracons | Human Brain Wave | 79450S | |
| MTT | Roche Diagnostic GmbH | 11465007001 | |
| RPMI medium | PBI International | 733-2292 | |
| DMEM medium | PBI International | F 0415 | |
| Antibiotics | Biological Industries PBI | 03-038-1 | |
| Antibodies for FACS Analysis | eBiosciences | code 12-1469 for CD146-P; code 17-0349 for CD34-APC | |
| Columbia agar | BioMerieux Company | 43041 | |
| Condress® | Abiogen Pharma | collagen sponge used for bio-complexes | |
| DMSO | Bioniche Pharma USA LLC, Lake Forest, IL | ||
| NaCl solution | Fresenius Kabi, Bad Homburg, Germany | ||
| Xylene | Carlo Erba |
Riferimenti
- Sen, C. K., et al. Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy. Wound Repair Regen. 17, 763-771 (2009).
- Ellis, E., Sinn, D. Use of homologous bone grafts in maxillofacial surgery. J Oral Maxillofac Surg. 51, 1181-1193 (1993).
- Nguyen, A., Pasyk, K. A., Bouvier, T. N., Hassett, C. A., Argenta, L. C. Comparative study of survival of autologous adipose tissue taken and transplanted by different techniques. Plast Reconstr Sur. 85, 378-389 (1990).
- Abuzeni, P. Z., Alexander, R. W. Enhancement of Autologous Fat Transplantation With Platelet Rich Plasma. AJCS. 18 (2), 59-70 (2001).
- Trovato, L., et al. A New Medical Device Rigeneracons Allows to Obtain Viable Micro-Grafts from Mechanical Disaggregation of Human Tissues. J Cell Physiol. , (2015).
- Zanzottera, F., Lavezzari, E., Trovato, L., Icardi, A., Graziano, A. Adipose Derived Stem Cells and Growth Factors Applied on Hair Transplantation Follow-Up of Clinical Outcome. JCDSA. 4 (4), 268-274 (2014).
- Giaccone, M., Brunetti, M., Camandona, M., Trovato, L., Graziano, A. A New Medical Device, Based on Rigenera Protocol in the Management of Complex Wounds. J Stem Cells Res, Rev & Rep. 1 (3), 3 (2014).
- Aimetti, M., Ferrarotti, F., Cricenti, L., Mariani, G. M., Romano, F. Autologous dental pulp stem cells in periodontal regeneration: a case report. Int J Periodontics Restorative Dent. 34 (3), s27-s33 (2014).
- Graziano, A., Carinci, F., Scolaro, S., D’Aquino, R. Periodontal tissue generation using autologous dental ligament micro-grafts: case report with 6 months follow-up. AOMS. 1 (2), 20 (2013).
- Brunelli, G., Motroni, A., Graziano, A., D’Aquino, R., et al. Sinus lift tissue engineering using autologous pulp micro-grafts: A case report of bone density evaluation. J Indian Soc Periodontol. 17 (5), 644-647 (2013).
- Ellner, P. D., Stoessel, C. J., Drakeford, E., Vasi, F. A new culture medium for medical bacteriology. Am J Clin Pathol. 45, 502-504 (1966).
