Murine प्रोस्टेट माइक्रो-विच्छेदन और सर्जिकल बधिया
Summary
यह पांडुलिपि प्रोस्टेट सूक्ष्म विच्छेदन और प्रयोगशाला माउस में शल्य चिकित्सा बधिया करने के लिए प्रोटोकॉल का वर्णन है। हम भी इन प्रोटोकॉल द्वारा उत्पादित प्रतिनिधि परिणामों को दर्शाती है। अंत में, हम फायदे और इन प्रोटोकॉल के उपयोग पर चर्चा की।
Abstract
Mouse models are used extensively to study prostate cancer and other diseases. The mouse is an excellent model with which to study the prostate and has been used as a surrogate for discoveries in human prostate development and disease. Prostate micro-dissection allows consistent study of lobe-specific prostate anatomy, histology, and cellular characteristics in the absence of contamination of other tissues. Testosterone affects prostate development and disease. Androgen deprivation therapy is a common treatment for prostate cancer patients, but many prostate tumors become castration-resistant. Surgical castration of mouse models allows for the study of castration resistance and other facets of hormonal biology on the prostate. This procedure can be coupled with testosterone reintroduction, or hormonal regeneration of the prostate, a powerful method to study stem cell lineages in the prostate. Together, prostate micro-dissection and surgical castration opens up a multitude of opportunities for robust and consistent research of prostate development and disease. This manuscript describes the protocols for prostate micro-dissection and surgical castration in the laboratory mouse.
Introduction
प्रोस्टेट अमेरिका में पुरुषों में कैंसर का सबसे आम साइट है। लगभग 220,000 पुरुषों को हर साल प्रोस्टेट कैंसर के साथ का निदान किया जाएगा, और लगभग 27,000 पुरुष अपनी बीमारी 1 का शिकार होगा। पुरुषों अमेरिका 1 में प्रोस्टेट कैंसर के निदान के लिए एक जीवन भर 7 में 1 जोखिम है। सौम्य प्रोस्टेट hyperplasia (BPH), एक उम्र से संबंधित प्रोस्टेट के noncancerous इज़ाफ़ा, यह भी एक व्यापक हालत, 80 2 से अधिक पुरुषों की 80% से अधिक प्रभावित हो रहा है। इस तरह के रूप में, प्रोस्टेट काफी शोध का ध्यान केंद्रित है।
माउस मॉडल व्यापक रूप से इस्तेमाल किया गया है प्रोस्टेट 3 के रोगों का अध्ययन करने के लिए। कुल मिलाकर, माउस प्रोस्टेट ग्रंथि मानव 4 के एक उत्कृष्ट प्रतिनिधि है, लेकिन वहाँ समानता और माउस और मानव प्रोस्टेट शरीर रचना विज्ञान और शरीर विज्ञान 5 के बीच मतभेद हैं। दोनों प्रजातियों में, प्रोस्टेट मूत्राशय के आधार पर स्थित है, मूत्रमार्ग के आसपास। मानव प्रोस्टेट ग्रंथि एक भी लोहो सकता है, चार जोनों में विभाजित: केंद्रीय, संक्रमण, परिधीय, और पूर्वकाल fibromuscular स्ट्रोमा। पूर्वकाल, उदर, और dorsolateral: इसके विपरीत, माउस प्रोस्टेट मूत्रमार्ग के आसपास विभिन्न पदों पर तीन बनती पालियों के होते हैं। एक सेलुलर स्तर पर, मुख्य अंतर यह मानव में ल्यूमिनल सेल अनुपात करने के लिए बेसल सेल के बारे में 1 है कि: 1 है, लेकिन यह 1: 4 चूहों 6 में। murine स्ट्रोमा भी मनुष्य के सापेक्ष चूहों में अलग है – मानव, अधिक व्यापक चिकनी पेशी है, जबकि मांसपेशियों परत murine प्रोस्टेट में बहुत पतली है। उचित पहचान, विच्छेदन, और माउस प्रोस्टेट की हैंडलिंग माउस प्रोस्टेट अनुसंधान के लिए आवश्यक हैं।
हार्मोन के स्तर में तेजी से विकास और दोनों मनुष्यों और चूहों में प्रोस्टेट ग्रंथि के homeostasis प्रभावित करते हैं। एस्ट्रोजन प्रोस्टेट विकास 7 में एक भूमिका निभा रहा है, प्रोस्टेट में सबसे महत्वपूर्ण हार्मोन टेस्टोस्टेरोन है। टेस्टोस्टेरोन ग्रंथियों के विकास के लिए आवश्यक है एकडी रखरखाव। या तो शारीरिक या रासायनिक बधिया के बाद, वयस्क प्रोस्टेट apoptose में ल्यूमिनल कोशिकाओं का लगभग 90%, और ग्रंथि सिकुड़ती। टेस्टोस्टेरोन बधिया की शर्तों के तहत एक व्यक्ति को पुनः शुरू किया जाता है, प्रोस्टेट पूरी क्षमता से खुद को पुनर्जीवित करने में सक्षम है। टेस्टोस्टेरोन भी प्रोस्टेट कैंसर, यही वजह है कि एण्ड्रोजन अभाव चिकित्सा आमतौर पर इस्तेमाल किया चिकित्सीय रणनीति है ड्राइव करने के लिए लगता है। हालांकि, कई प्रोस्टेट कैंसर एण्ड्रोजन के अभाव के लिए प्रतिरोधी हो जाते हैं। इसके अलावा, प्रोस्टेट कैंसर के उपचार के लिए एण्ड्रोजन अभाव चिकित्सा के दौर से गुजर पुरुषों बधिया और पुनर्जीवित शर्तों के चक्र से गुजरना। माउस में, शल्य बधिया, टेस्टोस्टेरोन reintroducing द्वारा प्रोस्टेट के हार्मोनल उत्थान के साथ-साथ, जिसके साथ बधिया प्रतिरोध और प्रोस्टेट पर टेस्टोस्टेरोन साइकिल चालन के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण है।
इस अनुच्छेद में, हम चर्चा करेंगे और उचित तकनीक है जिसके द्वारा locat के लिए प्रदर्शन करेंगेई और सूक्ष्म काटना एक माउस प्रोस्टेट, साथ ही एक माउस नपुंसक शल्य चिकित्सा करने के लिए।
Protocol
Representative Results
Discussion
प्रोस्टेट सूक्ष्म विच्छेदन पालि-विशिष्ट प्रयोग और माउस प्रोस्टेट के विश्लेषण (चित्रा 1) के लिए अनुमति देता है। अनुवांशिक इंजीनियर माउस मॉडल में, phenotypes एक पालि कि दूसरों में नहीं देखा जाता है में द?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस पांडुलिपि में आंकड़े से कुछ उदारता बार्ट ओ विलियम्स की प्रयोगशाला द्वारा प्रदान किया गया। लेखकों अनुदान राष्ट्रीय कैंसर संस्थान द्वारा समर्थित हैं U54CA143803, CA163124, CA093900, और CA143055।
Materials
| Surgical tools | Roboz | Various | |
| Formaldehyde | Sigma | F8775 | |
| OCT medium | VWR | 25608-930 | Must be placed on dry ice to freeze, and stored at -80C |
| PBS | Life Technologies | 10010 | |
| Isoflurane | Johns Hopkins | Also available from vendors online | |
| Cautery Pen | Medline | ESCT002 | |
| Silk suture | AD Surgical | M-S330R19 | |
| Surgical Wound Clips | Roboz | RS-9265 |
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