चूहे आज़ादी से चलती टेलीमेटरी का उपयोग में लंबे समय तक रक्तचाप माप
Summary
The goal of this protocol is to assess systemic blood pressure in conscious freely moving mice using implantable radio-telemetry devices.
Abstract
नई vasoactive एजेंटों के विकास के दौरान, धमनी रक्तचाप की निगरानी नए प्रस्तावित दवाओं की प्रभावकारिता के मूल्यांकन के लिए महत्वपूर्ण है। दरअसल, अनुसंधान आनुवंशिक रूप से परिवर्तित चूहों का उपयोग कर नए संभावित चिकित्सीय लक्ष्यों की खोज पर ध्यान केंद्रित एक विश्वसनीय, लंबी अवधि के प्रणालीगत धमनी दबाव भिन्नता के मूल्यांकन की आवश्यकता है। वर्तमान में, चल चूहों में रक्तचाप की लंबी अवधि के माप प्राप्त करने के लिए स्वर्ण मानक implantable रेडियो ट्रांसमीटर, जो धमनी केन्युलेशन की आवश्यकता का उपयोग करता है। इस तकनीक को tethering के लिए की आवश्यकता समाप्त, निरोधक, या जानवरों के जो आंकड़े को नमूने के दौरान तनाव और कलाकृतियों का परिचय anesthetizing। हालांकि, कैथीटेराइजेशन के माध्यम से चूहों में धमनी रक्तचाप की निगरानी धमनियों के छोटे आकार की वजह से नहीं बल्कि चुनौतीपूर्ण हो सकता है। यहाँ हम रेडियो ट्रांसमीटरों और मन्या धमनी सी के एक सफल चमड़े के नीचे आरोपण के लिए महत्वपूर्ण कुंजी मार्ग वर्णन करने के लिए एक कदम दर कदम गाइड पेशचूहों में annulation। हम यह भी बाद सर्जरी वसूली की अवधि के बाद स्वतंत्र रूप से चलती चूहों से लिया लंबी अवधि रक्तचाप गतिविधि के उदाहरणों में शामिल हैं। इस प्रक्रिया के बाद एक साथ कई जानवरों से विश्वसनीय प्रत्यक्ष रक्तचाप रिकॉर्डिंग की अनुमति देगा।
Introduction
उच्च रक्तचाप हृदय रोगों के लिए प्रमुख जोखिम कारकों में से एक है, यकीनन यह विकसित और विकासशील दोनों देशों 1 में एक प्रमुख सार्वजनिक स्वास्थ्य समस्या है। प्रयोगात्मक उच्च रक्तचाप के कई पशु मॉडल मनुष्य 2 में मनाया उन लोगों की तरह उच्च रक्तचाप से ग्रस्त प्रतिक्रियाओं की नकल करने के लिए विकसित किया गया है। दूसरों के अलावा, चल माउस उत्पत्ति और उच्च रक्तचाप के लिए पुरानी जोखिम के परिणामों के विश्लेषण में विवो अनुमति देता है उच्च रक्तचाप की प्रगति का अध्ययन करने के लिए एक उत्कृष्ट मॉडल का प्रतिनिधित्व करता है।
रक्तचाप (बीपी) चूहों में निगरानी कई शरीर विज्ञान और उच्च रक्तचाप और दिल की विफलता 3, 4 के रूप में रोगों के pathophysiology में शामिल तंत्र को जानने के लिए शोधकर्ताओं ने मदद की है। दरअसल, माउस जीनोम के हेरफेर उच्च रक्तचाप 5, 6 के अध्ययन के लिए ट्रांसजेनिक या जीन-लक्षित मॉडल उपयुक्त की पीढ़ी की अनुमति दी। हालांकि, यहां तक कोमल हेरफेरहोश में चूहों के excitements कि संभावित डाटा अधिग्रहण के दौरान कलाकृतियों को पेश कर सकते हैं, जबकि बेहोश करने की क्रिया या tranquilizers का उपयोग गहराई से रक्तचाप 7 को प्रभावित कर लाती है। इन पहलुओं को विशेष रूप से महत्वपूर्ण हैं और जब लंबी अवधि बीपी निगरानी का प्रयास विचार में लिया जाना चाहिए।
वहाँ चूहों में बीपी को रिकॉर्ड करने के कई तरीके हैं, और वर्तमान में उपलब्ध सबसे आम तकनीकों के बीच एक तुलना कहीं और 8 चर्चा की गई है, 9। हालांकि, बीपी माप के लिए अहा सिफारिशों निष्कर्ष निकाला है कि बीपी के इंट्रा-धमनी माप क्योंकि आम तौर पर सीधे बीपी मापने के लिए समय 10 के एक विस्तारित अवधि के दौरान उनकी क्षमता की पसंद कर रहे हैं। रेडियो टेलीमेटरी धमनी दबाव के प्रत्यक्ष माप के साथ मिलकर जाग में शारीरिक कार्यों की निगरानी और स्वतंत्र रूप से प्रयोगशाला पशुओं चलती है, जबकि तनाव और पर्यावरण की दृष्टि से जुड़े कलाकृतियों 9, 11 को न्यूनतम करने के लिए राज्य के अत्याधुनिक विधि है।रेडियो टेलीमेटरी स्वतः कई होश में जानवरों से रक्त के दबाव, हृदय गति, शरीर का तापमान और पशु गतिविधि इकट्ठा करने की क्षमता प्रदान करता है।
हालांकि इस पद्धति कई प्रयोगशालाओं में बहुत लोकप्रिय होता जा रहा है, चूहों में रेडियो टेलीमेटरी आरोपण तकनीकी रूप से चुनौतीपूर्ण हो सकता है। यहाँ हम एक कदम-दर-कदम प्रोटोकॉल चूहों में एक दबाव transducer प्रत्यारोपण करने के लिए कैसे दिखाता है कि दिखा। तकनीक माउस शरीर में जांच के चमड़े के नीचे प्रविष्टि शामिल है, गर्दन को कैथेटर चैनल और महाधमनी चाप के पास आगे छोड़ दिया मन्या धमनी के माध्यम से। दूर से कब्जा कर लिया डेटा कंप्यूटर मॉनीटर पर लाइव दिखाए जाते हैं। आंकड़े यह भी "बंद लाइन" विश्लेषण के लिए जमा हो जाती है।
Protocol
Representative Results
Discussion
Implantable रेडियो टेलीमेटरी काफी पिछले एक दशक में सुधार हुआ है; छोटे आकार की जांच के लिए पशु प्रत्यारोपण कम दर्दनाक बनाता है, लंबे समय तक बैटरी जीवन लागत को कम करने में मदद करता है, और स्वतंत्र दूरमापी आवृत्ति?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
This work was supported by the National Institutes of Health (NIH/NHLBI) [Grant no. HL114869] and the support from UTHSC to SM.
Materials
| Small animal anesthesia system | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, USA | low-Flow small animal anesthesia system | |
| Pad warmer and mouse termometer | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, USA | allows monitoring body temperature, and homeothermic control in small animals. | |
| Binocular Microscope | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, USA | KSCXTS-1121 | binocular body with boom stand pole and top LED. |
| Hemostat Forceps | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, USA | INS750451 | used to clamp blood vessels or tag sutures |
| Small metal Clips, 7mm, Stainless Steel | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, USA | INS750344 | used for skin closure |
| Betadine solution | Purdue Products L.P., Stamford, CT, USA | NDC-67618-150-01 | 10% povidone iodine topical solution |
| Normal saline solution | Abott Laboratories | 04930-04-10 | Needed for preventing tissue from drying. |
| Nair (Hair remover lotion) | Needed for fur removal from the site of incision/surgery. | ||
| Braide silk suture | Teleflex Medical OEM, Coventry, Connecticut, USA | Size 5.0, 6.0, 7.0 | |
| Ethanol | 2716 | 70% ethanol for disinfection | |
| Spring scissors | Fine Science Tool | 15000-10 | for minor dissection |
| Scissors (angled to side) | Fine Science Tool | 14063-011 | No. 3 handle |
| Scalpel blade | 2976-0 | No. 10 | |
| Forceps (curved) | Fine Science Tool | 11150-10 | for holding tissue |
| Forceps (straight) | Fine Science Tool | 11151-10 | for holding tissue |
| Needle holder | Fine Science Tool | 12002-12 | for suturing |
| Fine needle nose Forceps | Fine Science Tool | ||
| Isoflurane | Henry Schein Animal Health, Melville, New York, USA | a general inhalation anesthetic agent | |
| Sterilizer | Benchmark Scientific, 116 Corporate Blvd, South Plainfield, NJ, USA | B1000 | sterilize surgical tools in 5-10 seconds using infrared heating |
| Gauze Pads | Johnson & Johnson, New Brunswick, NJ, USA | JJ8513 | to use for wound cleaning, prepping, scrubbin or dressing. |
| Telemetry Device | Data Sciences International, St. Paul, MN, USA | DSI-PA-C10 | to record blood pressure in freely moving mice |
| Telemetry receiver system coumpled with a PC | Data Sciences International, St. Paul, MN, USA | ||
| small Tubing | Instech Laboratories, Plymouth Meeting, PA USA | BTPE-90 | |
| Vessel Cannulation Forceps, 13cm, 0.5mm OD | World Precision Instruments | 503374 | special vessel cannulation forceps. |
| Tissue adhesive | 3M Animal Care Products, St. Paul, MN, USA | NAC No.: 11380041 | use to close minor wounds, often eliminating the need for sutures and/or bandages |
| Weighing scale | BB300 | Precision Analytical Laboratory Balance |
Riferimenti
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