L'obiettivo di questo protocollo è valutare la pressione sanguigna sistemica in topi coscienti che si muovono liberamente utilizzando dispositivi di radio-telemetria impiantabili.
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Articolo metodologico
Misurazione della pressione sanguigna a lungo termine in topi liberi di muoversi utilizzando la telemetria
In questo articolo
Sommario
Abstract
Durante lo sviluppo di nuovi agenti vasoattivi, monitoraggio della pressione arteriosa è cruciale per valutare l'efficacia di nuovi farmaci proposti. In effetti, la ricerca incentrata sulla scoperta di nuovi potenziali bersagli terapeutici utilizzando topi geneticamente modificati richiede un giudizio affidabile a lungo termine della variazione di pressione arteriosa sistemica. Attualmente, il gold standard per l'ottenimento di misure a lungo termine della pressione sanguigna nei topi ambulatoriali utilizza impiantabili di radio-trasmettitori, che richiedono incannulamento arteria. Questa tecnica elimina la necessità di legare, immobilizzare o anestetizzare gli animali che introducono stress e manufatti durante il campionamento dei dati. Tuttavia, il monitoraggio della pressione arteriosa nei topi tramite cateterizzazione può essere piuttosto difficile a causa delle ridotte dimensioni delle arterie. Qui vi presentiamo una guida passo-passo per illustrare i passaggi chiave cruciali per un impianto sottocutaneo di successo di radio-trasmettitori e carotide cannulation nei topi. Abbiamo anche esempi di attività di pressione sanguigna a lungo termine presi dai topi liberi di muoversi dopo un periodo di recupero post-operatorio. A seguito di questa procedura consentirà registrazioni della pressione sanguigna diretta affidabili da più animali contemporaneamente.
Introduzione
L'ipertensione è uno dei principali fattori di rischio per le malattie cardiovascolari, senza dubbio si tratta di un grave problema di salute pubblica sia nei paesi sviluppati e in via di sviluppo 1. Diversi modelli animali di ipertensione sperimentale sono stati sviluppati per imitare risposte ipertensive come quelle osservate nell'uomo 2. Tra gli altri, il mouse ambulatoriale rappresenta un ottimo modello per studiare la genesi e la progressione dell'ipertensione permettendo nell'analisi vivo delle conseguenze dell'esposizione cronica a ipertensione.
La pressione sanguigna (BP) monitora....
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Protocollo
Etica dichiarazione: Tutte le procedure origine animale di cui in questo video-articolo è stato esaminato e approvato dal Comitato di cura e l'uso di animali (IACUC) presso l'Università del Tennessee Health Science Center.
Nota: utilizzare gli strumenti di microchirurgia sterili durante tutta la procedura chirurgica. Gli strumenti chirurgici possono essere sterilizzati utilizzando uno sterilizzatore infrarossa ad una temperatura ottimale di sterilizzazione 1.500 ° F (815,6 ° C). Telemetri possono essere riutilizzati, tuttavia, prima di inserirla nell'animale assicurarsi di sterilizzare l'intero trasmettitore secondo le istruzioni del produttore e che la punta del ....
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Risultati
I dati possono essere acquisiti in remoto da un ricevitore; tracce vengono visualizzate su uno schermo di computer per il controllo di qualità (Figura 1a). Dettagli come ID animale, pressione diastolica e pressione arteriosa sistolica sono indicate anche (Figura 1b). Arteriosa BP può essere registrata in continuo (24/7), o per brevi intervalli programmati (ad esempio, 60 sec acquisizione ogni ora). I dati possono essere memorizzati automaticamen.......
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Discussione
Impiantabile radio-telemetria è migliorata significativamente negli ultimi dieci anni; dimensioni più piccole della sonda rende l'impianto meno traumatica per l'animale, la durata della batteria prolungata aiuta a ridurre i costi, e le frequenze telemetro indipendenti eliminare le interferenze tra i ricevitori. Telemetria è considerato il metodo allo stato dell'arte per la raccolta di una vasta gamma di parametri fisiologici da animali liberi di muoversi senza artefatti dovuti all'uso di contenzione, int.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato sostenuto dal National Institutes of Health (NIH/NHLBI) [Grant no. HL114869] e il supporto da UTHSC a SM.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Sistema per anestesia per piccoli animali | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, USA | sistema per anestesia per piccoli animali a basso flusso | |
| Scaldapad e termometro per topi | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, USA | consente il monitoraggio della temperatura corporea e il controllo omeotermico nei piccoli animali | |
| Microscopio binoculare | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, USA | Corpo binoculare KSCXTS-1121 | con asta del supporto a braccio e |
| pinze emostatice | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, USA | INS750451 | utilizzato per bloccare i vasi sanguigni o etichettare le suture |
| Piccole clip metalliche, 7 mm, acciaio inossidabile | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, USA | INS750344 | utilizzato per la chiusura della pelle |
| Soluzione di betadina | Purdue Products L.P., Stamford, CT, USA | NDC-67618-150-01 | Soluzione topica di iodio povidone al 10% |
| Soluzione salina normale | Abott Laboratories | 04930-04-10 | necessaria per prevenire l'essiccazione dei tessuti. |
| Nair (lozione depilatoria) | necessario per la rimozione della pelliccia dal sito di incisione / chirurgia | ||
| Sutura di seta treccia | Teleflex Medical OEM, Coventry, Connecticut, USA | Taglia 5.0, 6.0, 7.0 | |
| Etanolo | 2716 | 70% etanolo per la disinfezione | |
| Forbici a molla | Strumento Fine Science | 15000-10 | per dissezione minore |
| Forbici (angolate lateralmente) | Strumento Fine Science | 14063-011 | Manico n. 3 Lama |
| bisturi | 2976-0 | N. 10 | |
| Pinze (curve) | Strumento Fine Science | 11150-10 | per trattenere i tessuti |
| Pinze (diritte) | Strumento Fine Science | 11151-10 | per trattenere i tessuti |
| Porta aghi | Strumento di scienza fine | 12002-12 | per sutura |
| Naso ad ago sottile Pinze | Strumento | ||
| Isoflurano | Henry Schein Salute animale, Melville, New York, Stati Uniti | un agente anestetico per inalazione generale | |
| Sterilizzatore | Benchmark Scientific, 116 Corporate Blvd, South Plainfield, NJ, USA | B1000 | sterilizzare gli strumenti chirurgici in 5-10 secondi utilizzando il riscaldamento a infrarossi |
| Garze Pads | Johnson & Johnson, New Brunswick, NJ, USA | JJ8513 | da utilizzare per la pulizia, la preparazione, lo sfregamento o la medicazione delle ferite Dispositivo di |
| telemetria | Data Sciences International, St. Paul, MN, USA | DSI-PA-C10 | per registrare la pressione sanguigna nei mouse che si muovono liberamente Sistema |
| di ricezione della telemetria accartocciato con un PC | Data Sciences International, St. Paul, MN, USA | ||
| Tubing | Instech Laboratories, Plymouth Meeting, PA USA | BTPE-90 | |
| Pinze per incannulamento dei vasi, 13 cm, 0,5 mm OD | World Precision Instruments | 503374 | speciali pinze per incannulamento dei vasi |
| Adesivo per tessuti | 3M Animal Care Products, St. Paul, MN, USA | NAC No.: 11380041 | utilizzare per chiudere piccole ferite, spesso eliminando la necessità di suture e/o bende |
| Bilancia analitica da laboratorio di precisione | BB300 |
Riferimenti
- Danaei, G., et al. The preventable causes of death in the United States: comparative risk assessment of dietary, lifestyle, and metabolic risk factors. PLoS Med. 6 (4), e1000058(2009).
- Dornas, W. C., Silva, M. E. Animal models ....
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Ristampe e permessi
