Misurazione del Tempo di sopravvivenza in<em&gt; Brachionus</em&gt; Rotiferi: Sincronizzazione di materni Condizioni

Gen Kaneko; Tatsuki Yoshinaga; Kristin E. Gribble; David M. Welch; Hideki Ushio

doi:10.3791/54126

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Articolo metodologico

Misurazione del Tempo di sopravvivenza in

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DOI:

10.3791/54126

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22 luglio 2016

Gen Kaneko¹^,⁴ , Tatsuki Yoshinaga² , Kristin E. Gribble³ , David M. Welch³ , Hideki Ushio¹

¹Department of Aquatic Bioscience, Graduate School of Agricultural and Life Sciences, The University of Tokyo, ²School of Marine Biosciences, Department of Marine Biosciences, Kitasato University, ³Josephine Bay Paul Center for Comparative Molecular Biology and Evolution, Marine Biological Laboratory, ⁴School of Arts and Sciences, University of Houston-Victoria

In questo articolo

Sommario

I rotiferi sono zooplancton microscopici utilizzati come modelli in studi ecotossicologici e sull'invecchiamento. Qui forniamo un protocollo per la misurazione potente e riproducibile del tempo di sopravvivenza nei rotiferi Brachionus. La sincronizzazione delle condizioni di coltura nel corso di diverse generazioni è di particolare importanza perché la condizione materna influenza la storia di vita della prole.

Abstract

I rotiferi sono microscopici zooplancton cosmopoliti utilizzati come modelli negli studi ecotossicologici e sull'invecchiamento grazie ai loro numerosi vantaggi come la breve durata della vita, la facilità di coltura e la partenogenesi che consente la coltura clonale. Tuttavia, è necessaria cautela quando si misura il loro tempo di sopravvivenza in quanto è influenzato dall'età materna e dalle condizioni di alimentazione materna. Qui forniamo un protocollo per la misurazione potente e riproducibile del tempo di sopravvivenza nei rotiferi Brachionus a seguito di un'attenta sincronizzazione delle condizioni di coltura per diverse generazioni. Empiricamente, una scarsa sincronizzazione si traduce in una mortalità precoce e in una graduale diminuzione del tasso di sopravvivenza, con conseguente debole potenza statistica. Infatti, in tali condizioni, la restrizione calorica (CR) non è riuscita a prolungare significativamente la durata della vita di B. plicatilis, sebbene la longevità indotta dalla CR sia stata dimostrata con campioni di rotiferi ben sincronizzati in studi passati e presenti. Questo protocollo è probabilmente utile per altri modelli di invertebrati, tra cui il moscerino della frutta Drosophila melanogaster e il nematode Caenorhabditis elegans, perché in queste specie sono stati riportati anche effetti sull'età materna.

Introduzione

Rotiferi sono microscopici cosmopolita zooplancton (<1 mm), che costituiscono il phylum Rotifera ^1. Hanno un semplice piano corpo composto di circa 1.000 cellule somatiche, nonché un apparato ciliare ruota-come caratteristica denominata corona, che viene utilizzato per la locomozione e l'alimentazione. La maggior parte dei rotiferi appartengono a classi Monogononta o Bdelloidea, che contengono circa 1.600 e 500 specie, rispettivamente ^2. Rotiferi Monogonont hanno generalmente entrambe le fasi riproduttivo sessuale e asessuale (partenogenesi ciclico), mentre rotiferi bdelloid si riproducono per partenogenesi obbligatoria ^3. È così ....