من أجل فهم الفيزيولوجيا المرضية من السكتة الدماغية، فمن المهم استخدام نماذج يمكن الاعتماد عليها. هذه الورقة سوف تصف واحد من النماذج السكتة الدماغية الأكثر استخداما في الفئران، ويطلق عليه نموذج المتوسطة الدماغي انسداد الشريان (MCAo) (كما وصف خيوط داخل اللمعة أو نموذج خياطة) مع ضخه.
السكتة الدماغية هي السبب الرئيسي للوفاة في جميع أنحاء العالم، وتستمر لتكون واحدة من الأسباب الرئيسية للإعاقة الكبار على المدى الطويل. حوالي 87٪ من السكتات الدماغية هي الدماغية في الأصل وتحدث في أراضي الشريان الدماغي الأوسط (مولودية الجزائر). حاليا فقط إدارة الغذاء والدواء (FDA) وافقت المخدرات لعلاج هذا المرض الفتاك هو منشط البلازمينوجين النسيجي (TPA). ومع ذلك، منشط البلاسمينوجين النسيجي لديه نافذة العلاجية صغير لإدارة (3-6 ساعة)، وغير فعالة إلا في 4٪ من المرضى الذين يحصلون عليها بالفعل. يركز البحث الحالي على فهم الفيزيولوجيا المرضية من السكتة الدماغية من أجل العثور على الأهداف العلاجية المحتملة. وهكذا، ونماذج يمكن الاعتماد عليها هي الحاسمة، و(MCAo) نموذج MCA انسداد (تسمى أيضا داخل اللمعة خيوط أو خياطة نموذج) والتي تعتبر نموذج الجراحية الأكثر صلة سريريا من السكتة الدماغية، وهي إلى حد ما غير الغازية واستنساخه بسهولة. وعادة ما تستخدم نموذج MCAo مع القوارض، خاصة مع الفئران بسببإلى كل الاختلافات الجينية المتاحة لهذه الأنواع. نحن هنا وصف (وموجودة في شريط الفيديو) كيفية تنفيذ بنجاح نموذج MCAo (مع ضخه) في الفئران لتوليد بيانات موثوقة وقابلة للتكرار.
السكتة الدماغية هي السبب الخامس للوفاة في جميع أنحاء العالم، مع شخص واحد يموت من المرض كل 4 دقائق. أكثر من 800،000 الاميركيين يعانون من السكتة الدماغية كل عام، وهي ليست مدمرة فقط للمريض، ولكن أيضا لعائلاتهم. السكتة الدماغية هي السبب الرئيسي للعجز الكبار، ويقدر الإنفاق السنوي ليكون في ترتيب 36500000000 $ 1 على الرغم من عدد قليل جدا من خيارات العلاج يجري المتاحة.
منشط بلاسمينوجين النسيجي (TPA) هو الوحيد إدارة الغذاء والدواء (FDA) مرخصة المخدرات للسكتة الدماغية. ومع ذلك، فإنه لا تكون فعالة إلا إذا ما تم إعطاؤها للمرضى في غضون 3-6 ساعات من بداية السكتة الدماغية، وفي هذه الحالات فهي تستفيد سوى 4٪ من المرضى 2. وبالتالي، فمن الضروري أن يتم استخدام استنساخه، النماذج الحيوانية ذات الصلة سريريا من السكتة الدماغية للمساعدة في وضع استراتيجيات والعلاجات المحتملة لهذا المرض. ومن المهم أن نلاحظ أنه في المختبر </م> النماذج، في حين مفيدة في نمذجة بعض جوانب الخلل الدماغي، ليست قادرة على تلخيص التفاعلات الفسيولوجية المعقدة التي تحدث في الدماغ والأطراف إثر إصابته بجلطة. ونتيجة لذلك، في النماذج الحية ضرورية.
النوع الاكثر شيوعا من السكتات الدماغية هو في الأصل، وهو ما يمثل 87٪ من إجمالي السكتات الدماغية. السكتات الدماغية الأخرى نزيف داخل المخ (9٪) ونزيف تحت العنكبوتية (4٪)، وتسببت في معظم الأحيان من قبل الصمات إلى الشريان الدماغي الأوسط (مولودية الجزائر). ويعزى هذا إلى منحنى بارز في جذور مولودية الجزائر، الذي يسبب تدفق الصفحي الدم الى الدماغ لتصبح تعطلت. وMCA ينشأ من الشريان السباتي الداخلي (ICA) والطرق على طول التلم الجانبي، حيث الفروع والمشاريع في العقد القاعدية والسطوح الجانبية للالجبهي، الجداري والفص الصدغي، بما في ذلك المحرك الأساسي والقشرة الحسية. يتم إنشاء دائرة ويليس من الشرايين الدماغية الخلفية يجريتوصيل الشرايين الدماغية والخلفي التواصل الشرايين.
خيوط أو خياطة نموذج داخل اللمعة من MCAo هي واحدة من الأكثر استخداما في البحوث السكتة الدماغية. ومع ذلك، هناك بضعة أشكال مختلفة لهذا النموذج، وهذه هي على أساس ما إذا تم إدراج خييط في الشريان السباتي الخارجي (ECA، ووصف طريقة لونجا) 3، أو ما إذا كان يتم إدراجها في ICA (يدعى كويزومي طريقة) 4. في طريقة كويزومي، الشريان السباتي المشترك (CCA) على جانب الجراحة يجب أن تكون مرتبطة بشكل دائم إذا تم إزالة خيوط لمنع نزيف من شق في التقييم القطري المشترك، بينما في طريقة لونجا انها هي اللجنة الاقتصادية لأفريقيا يجب أن تكون مرتبطة 5 بشكل دائم . هنا سيتم استخدام طريقة لونجا ونحن نرى أن هذا هو أعلى بكثير، ونموذجا الجراحية أكثر أهمية سريريا من السكتة الدماغية. وعلاوة على ذلك، فإن استخدام حيدة ذات الرؤوس السيليكون، وخصوصا مع طريقة لونجا، وتنتج جدا MCAo استنساخه بدلا من الأحادية-اضعافها لهب، والتي غالبا ما تنتج انسداد ناقصة و / أو نزيف تحت العنكبوتية (6).
طريقة خيوط داخل اللمعة يمكن استخدامها كنموذج لل4،6 انسداد دائم أو مؤقت. لأداء نموذج عابرة، تتم إزالة خيوط بعد فترة من نقص التروية (على سبيل المثال، 30 دقيقة، 60 دقيقة، أو 2 ساعة) يسمح، وضخه إلى ذلك. هذا النموذج، إلى حد ما، يحاكي استعادة تدفق الدم بعد التدخل العفوي أو العلاجي (على سبيل المثال، إدارة TPA) إلى ليز جلطة الانسداد التجلطي في البشر. لنموذج دائم، هو بكل بساطة ترك خيوط في مكان لفترة من الوقت (على سبيل المثال، 24 ساعة)، حتى لا يحدث ضخه. ميزة أخرى لهذا الأسلوب خيوط داخل اللمعة هو حقيقة أن حج القحف لا تحتاج إلى أن يؤديها، والسماح للالجمجمة إلى أن تترك سليمة وتجنب أي تغيرات في الضغط داخل الجمجمة ودرجة الحرارة.
<p cمعشوقة = "jove_content"> في هذا الفيديو نحن لشرح كيفية تنفيذ ونجا طريقة خيوط داخل اللمعة للحث على MCAo وضخه. وتبين لنا أيضا كيفية تنفيذ النتيجة العصبية 18 نقطة وتحديد حجم احتشاء باستخدام 2،3،5-triphenyltetrazalium كلوريد (TTC) تلطيخ.منذ بدايته قبل 20 عاما، وقد تم استخدام نموذج MCAo للسكتة الدماغية البشرية التي تنطوي على إدخال خيوط في عدد كبير من الدراسات. ويرجع ذلك أساسا إلى حقيقة أنه يحاكي ما يحدث سريريا في الشكل الأكثر شيوعا من السكتة الدماغية (أي السكتة الدماغية). المخطط هو أكثر حساسية لنقص ت…
The authors have nothing to disclose.
This work was funded by the National Institute of Health, the National Heart Lung and Blood Institute (NIH and NHLBI; HL125572-01A1) and the LSUHSC-S start up fund to F.N.E. Gavins.
Male C57BL/6 mice | Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME | #000664 | |
Ketamine Hydrochloride | Morris & Dickson, Shreveport, LA | 67457-108-10 | |
Xylazine | Akorn, Inc, Lake Forest, IL | NADA# 139-236 | |
DC temperature control system | FHC, Bowdoin, ME | 40-90-8D | |
Mini rectal thermistor probe | FHC, Bowdoin, ME | 40-80-5D-02 | |
Heating pad | FHC, Bowdoin, ME | 40-90-2-06 | |
Clippers | Amazon, Bellevue, WA | #64800 | |
70% ethanol | Worldwide Medical Products, Bristol, PA | #51011023 | |
Dissecting microscope | Olympus, Center Valley, PA | SZ40 | |
Iris scissors (straight) | Fine Science Tools, Foster City, CA | 11251-20 | |
Dumont forceps (45° bent tip) | Fine Science Tools, Foster City, CA | 11297-00 | |
Micro vessel clip | Fine Science Tools, Foster City, CA | 18055-05 | |
Micro dissecting spring scissors (straight) | Fine Science Tools, Foster City, CA | 14088-10 | |
Retractors (blunt) | Fine Science Tools, Foster City, CA | 18200-11 (Helen used 17022-13) | |
Cotton tipped applicators | Fisher Scientific, Waltham, MA | 23-400-100 | |
Gauze sponges | Covidien, Mansfield, MA | #9023 | |
6-0 silk braided surgical suture | Roboz, Gaithersburg, MD | SUT-1073-11 | |
0.9% sodium chloride | Morris & Dickson, Lake Forest, IL | 0409-4888-20 | |
6-0 medium MCAO suture (silicon rubber coated monofilament) | Doccol Corporation, Sharon, MA | 6023PKRe | |
Sofsilk 6-0 silicone coated braided silk | Covidien, Mansfield, MA | SUT-14-1 | |
Carprofen | Pfizer, New York, NY | NADA# 141-199 | |
Puralube | Dechra, Norwich, UK | NDC 17033-211-38 | |
Physitemp temperature controller | Harvard Apparatus, Holliston, MA | TCAT-2AC | |
Heat lamp | Harvard Apparatus, Holliston, MA | HL-1 | |
Laser doppler probe | AD Instruments, Colorado Springs, CO | MSP100XP | |
24-well plates | Fisher Scientific, Waltham, MA | #353226 | |
Phosphate buffered saline (PBS) | Life Technologies, Carlsbad, CA | 20012-050 | |
Single edge razor blades | Fisher Scientific, Waltham, MA | 12-640 | |
2,3,5-triphenyltetrazalium chloride (TTC) | Sigma Aldrich, St. Louis, MO | T8877-50G | |
Mouse brain matrix slicer | Braintree Scientific, Braintree, MA | BS-A 5000C | |
Water bath | VWR, Radnor, PA | #182 | |
10% formalin | Sigma Aldrich, St. Louis, MO | HT501128-4L | |
Image J analysis software | NIH, Bethesda, MD | free download | |
Retractor | Medical Device Purchase, Newcastle, CA | MP-740 |