Summary

Ultraschall-basierte Pulswellengeschwindigkeit Auswertung bei Mäusen

Published: February 14, 2017
doi:

Summary

Arterielle Steifigkeit ist ein wichtiger Faktor bei der Herz-Kreislauf-Erkrankungen und Pulswellengeschwindigkeit (PWV) als Surrogat-Index für die arterielle Steifigkeit berücksichtigt werden. Dieses Protokoll beschreibt Algorithmus eine Bildverarbeitung für die in Mäusen PWV Berechnung auf Ultraschallbildverarbeitung basieren, die an verschiedenen Standorten arteriellen anwendbar ist.

Abstract

Arterielle Steifigkeit kann durch Berechnung der Pulswellengeschwindigkeit (PWV) ausgewertet werden, das heißt, die Geschwindigkeit , mit der die Pulswelle in einer Leitung Gefäß bewegt. Dieser Parameter wird zunehmend in Kleintiermodellen untersucht, in dem sie für die Beurteilung der Veränderungen in der vaskulären Funktion auf bestimmte Genotypen / Behandlungen oder zur Charakterisierung von kardiovaskulären Krankheitsprogression Zusammenhang verwendet wird. Dieses Protokoll beschreibt Verarbeitungsalgorithmus ein Bild, das bei Mäusen nicht-invasiven arteriellen PWV-Messung führt unter Verwendung von Ultraschall (US) Bilder nur. Die vorgeschlagene Technik verwendet worden ist PWV abdominalen Aorta bei Mäusen zu bewerten und ihre altersbedingten Veränderungen zu bewerten.

Abdominalen Aorta US Scans von Mäusen unter gasförmigem Anästhesie mit einer spezifischen US Gerät mit Hochfrequenz US Sonden ausgestattet ist. B-Modus und Pulse-Wave-Doppler (PW-Doppler) Bilder werden analysiert, um Durchmesser zu erhalten und die mittlere Geschwindigkeit Momentanwerte bzw.. Zu diesem Zweck Kantenerfassungs und Konturverfolgungstechniken verwendet werden. Die Single-beat mittlerer Durchmesser und Geschwindigkeitsverläufe sind zeitlich aufeinander abgestimmt und kombiniert, um den Durchmesser-Geschwindigkeit (lnD-V) Schleife zu erreichen. PWV Werte werden aus der Steigung des linearen Teils der Schleife erhalten wird, die der frühen systolischen Phase entspricht.

Mit dem vorliegenden Ansatz, anatomische und funktionelle Informationen über die Maus kann Bauchaorta nicht-invasiv erreicht werden. nur die Verarbeitung von US Bilder erfordert, kann es ein nützliches Werkzeug für die nicht-invasive Charakterisierung verschiedener arteriellen Stellen in der Maus in Bezug auf die elastischen Eigenschaften repräsentieren. Die Anwendung der vorliegenden Technik kann leicht auf andere Gefäßbezirke ausgedehnt werden, wie der Arteria carotis, wodurch die Möglichkeit Bereitstellen eines Multi-Site-arterielle Steifigkeit Beurteilung zu erhalten.

Introduction

Mausmodelle werden in zunehmendem Maße für die Untersuchung von Herz – Kreislauf – Erkrankungen (CVD) verwendet , und besonders in Langzeitstudien eingesetzt , die die Charakterisierung der verschiedenen Phasen der Krankheitsentwicklung 1 ermöglichen. Elastischen Eigenschaften von großen Arterien sind verschiedenen pathologischen Zuständen im Zusammenhang; Aus technischer Sicht kann arterielle Steifigkeit durch die Messung der Pulswellengeschwindigkeit (PWV) beurteilt werden, die die Geschwindigkeit , mit welcher repräsentiert reist die Pulswelle in einem Leitungsgefäß 2. Wegen seiner klinische Bedeutung, wird es zunehmend auch in vorklinischen kleinen Tiermodellen 3 gemessen.

Verschiedene Techniken sind für PWV Beurteilung bei Mäusen. Invasive Ansätze basieren auf der Verwendung von Katheter-Spitze Drucksensoren basieren. PWV wird durch Erfassen von Drucksignalen an zwei unterschiedlichen Standorten arteriellen und Dividieren des Abstandes zwischen den beiden Mess s beurteiltites durch die Zeitverschiebung zwischen den Signalen 4. Der Hauptnachteil dieser Arten von Techniken verwandt ist, dass sie Tieropfer zur Auswertung des Abstandes zwischen den beiden Messstellen erfordern und kann somit nicht in Langzeitstudien verwendet werden. Um diese Einschränkung zu überwinden, nicht-invasive Ansätze, basierend auf verschiedenen bildgebenden Verfahren, sind entwickelt worden. Frühere Studien haben PWV Einschätzungen berichtet 6 bei Mäusen durch die Anwendung der Laufzeitverfahren auf Geschwindigkeit codierten Magnetresonanztomographie – Daten 5 und Pulsed-Doppler – Signale erhalten. Allerdings ist der PWV-Wert mit diesen Methoden erhalten eine regionale Auswertung der arteriellen Steifigkeit. Tatsächlich stellt es einen Mittelwert für verschiedene Arterien in Bezug auf Größe und elastischen Eigenschaften ausmachen. Darüber hinaus erfordern diese Arten von Auswertungen der Beurteilung der Abstand zwischen den beiden Messstellen, die eine Fehlerquelle ist, die inf könnteluence das Endergebnis.

PWV kann mit dem Durchmesser-Geschwindigkeit (lnD-V) Schleife 7 beurteilt werden. Dieses Verfahren basiert auf der gleichzeitigen Auswertung des Durchmessers und Strömungsgeschwindigkeitswerte in einem ausgewählten Gefäß. Nach diesem Ansatz wird die lnD-V-Schleife durch Auftragen natürlichen Logarithmus Durchmesser erhaltenen Werte vs bedeuten Geschwindigkeitswerte und PWV wird durch Berechnung der Steigung des linearen Teils der erhaltenen Schleife entsprechend der frühen systolischen Phase geschätzt. Im Hinblick auf die praktische Umsetzung dieser Methode haben frühere Arbeiten bereits berichtet , Ergebnisse über seine Anwendung in einem divitro – Set-up – System 7 und dessen Verwendung für die Beurteilung sowohl der Karotis und Oberschenkel PWV beim Menschen 8.

Das Hauptziel der vorliegenden Studie ist eine detaillierte Beschreibung eines Bildverarbeitungsalgorithmus zur Verfügung zu stellen, die eine nicht-invasive arterielle PWV Messung in Mäusen unter Verwendung von U liefertS-Bilder. Der vorgeschlagene Ansatz ermöglicht die Auswertung der lokalen Arteriensteifigkeit mittels der Verarbeitung von sowohl B-Mode- und Doppler Pulsed-Wave (PW-Doppler) Bilder und kann auf Arterien von entscheidender Bedeutung, wie beispielsweise der abdominalen Aorta eingesetzt werden.

Protocol

Tierversuche wurden in Übereinstimmung mit der EU-Richtlinie (2010/63 / UE) und dem italienischen Gesetz (D.Lvo 26/2014) durchgeführt, und es folgte Prinzipien der Labortierhaltung. Die lokale ethischen Zulassung Gremium genehmigte die Studie. 1. Imaging Verfahren Platzieren Sie die Maus in einer Anästhesieinduktionskammer gefüllt mit 2,5% Isofluran in 1 l / min reinem Sauerstoff. Überprüfen Sie die Tiefe der Anästhesie durch Teilnahmslosigkeit bis Fuß Prise. Legen Sie das Tier auf e…

Representative Results

Der vorgeschlagene Ansatz wurde an Mäuse abdominalen Aorta in einer früheren Studie 11 angewendet. Die folgenden Abbildungen zeigen die Ergebnisse der Anwendung der beschriebenen Ansatz auf realen Mäuse Bilder. Diese Daten stammen aus einem einzigen Tier (Wildtyp – Mäuse, 13 Wochen alt, Stamm: C57BL6, Gewicht: 33 g) Insbesondere Abbildung 1 zeigt das Ergebnis der Analyse der US – Bildern. Kantenerkennung und Konturverfolgungstechniken angewend…

Discussion

In dieser Studie Algorithmus eine Bildverarbeitung auf der Schleife lnD-V-Basis für PWV Beurteilung in Mäusen wurde im Detail beschrieben. Der vorgeschlagene Ansatz beruht auf der Verarbeitung von Bildern US basierend nur und somit 6 eine gültige Alternative zu bestehenden Techniken darstellen könnten, 13 zur Beurteilung der arteriellen Steifigkeit in Mausmodellen. In der Tat umgekehrt zu invasive Methoden 6 , die auf den Erwerb von i…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Keiner.

Materials

VEVO2100 FUJIFILM VisualSonics Inc, Toronto, Canada micro-ultrasound equipment
MS250 Ultrasound Probe FUJIFILM VisualSonics Inc, Toronto, Canada micro-ultrasound probe
EKV Software FUJIFILM VisualSonics Inc, Toronto, Canada Software
Matlab R2015a  MathWorks Inc, Natick, MA, USA Software
Conductive Paste Chosen by the operator Laboratory material
Petroleum Jelly Chosen by the operator Laboratory material
Depilatory Cream Chosen by the operator Laboratory material
Acoustic Coupling Gel  Chosen by the operator Laboratory material
Developed Matlab Software The authors are willing to collaborate with those researchers who are interested in the software and to make the software available under their supervision

Riferimenti

  1. Zaragoza, C., et al. Animal Models of Cardiovascular Diseases. J Biomed Biotechnol. 2011, 497-841 (2011).
  2. Laurent, S., et al. Expert consensus document on arterial stiffness: methodological issues and clinical applications. Eur Heart J. 27, 2588-2605 (2006).
  3. Wang, Y. X., et al. Increased aortic stiffness assessed by pulse wave velocity in apolipoprotein E-deficient mice. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 278, 428-434 (2000).
  4. Mitchell, G. F., Pfeffer, M. A., Finn, P. V., Pfeffer, J. M. Comparison of techniques for measuring pulse-wave velocity in the rat. J Appl Physiol. 82 (1), 203-210 (1997).
  5. Parczyk, M., Herold, V., Klug, G., Bauer, W. R., Rommel, E., Jakob, P. M. Regional in vivo transit time measurements of aortic pulse wave velocity in mice with high-field CMR at 17.6 Tesla. J Cardiovasc Magn Reson. 12, 72 (2010).
  6. Hartley, C. J., Taffet, G. E., Michael, L. H., Pham, T. T., Entman, M. L. Noninvasive determination of pulse-wave velocity in mice. Am J Physiol. 273 (1), 494-500 (1997).
  7. Feng, J., Khir, A. W. Determination of wave speed and wave separation in the arteries using diameter and velocity. J Biomech. 43 (3), 455-462 (2010).
  8. Borlotti, A., Khir, A. W., Rietzschel, E. R., De Buyzere, M. L., Vermeersch, S., Segers, P. Noninvasive determination of local pulse wave velocity and wave intensity: changes with age and gender in the carotid and femoral arteries of healthy human. J Appl Physiol. 113 (5), 727-735 (2012).
  9. Chérin, E., et al. Ultrahigh frame rate retrospective ultrasound microimaging and blood flow visualization in mice in vivo. Ultrasound Med Biol. 32 (5), 683-691 (2006).
  10. Gemignani, V., Faita, F., Ghiadoni, L., Poggianti, E., Demi, M. A system for real-time measurement of the brachial artery diameter in B-mode ultrasound images. IEEE Trans Med Imaging. 26 (3), 393-404 (2006).
  11. Di Lascio, N., Stea, F., Kusmic, C., Sicari, R., Faita, F. Non-invasive assessment of pulse wave velocity in mice by means of ultrasound images. Atherosclerosis. 237 (1), 31-37 (2014).
  12. Nichols, W. W., O’Rourke, M. F. . McDonald’s Blood Flow in Arteries: Theoretical, Experimental, and Clinical Principles. , 215-358 (1998).
  13. Williams, R., et al. Noninvasive ultrasonic measurement of regional and local pulse wave velocity in mice. Ultrasound Med Biol. 33 (9), 1368-1375 (2007).
  14. Penny, D. J., et al. Aortic wave intensity of ventricular-vascular interaction during incremental dobutamine infusion in adult sheep. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 294, 481-489 (2008).
  15. Segers, P., et al. Wave reflection leads to over- and underestimation of local wave speed by the PU- and QA-loop methods: theoretical basis and solution to the problem. Physiol Meas. 35 (5), 847-861 (2014).
check_url/it/54362?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Di Lascio, N., Kusmic, C., Stea, F., Faita, F. Ultrasound-based Pulse Wave Velocity Evaluation in Mice. J. Vis. Exp. (120), e54362, doi:10.3791/54362 (2017).

View Video