Симметричный Bihemispheric Посмертное мозга резки для изучения здоровые и патологически Мозговые условия у людей

Summary

Организованные процедуры резки мозговые необходимо соотнести конкретные психоневрологические явления с окончательными нейропатологические диагнозов. Мозговые черенки выполняются по-разному на основе различных клинико-академических непредвиденных обстоятельств. Этот протокол описывает симметричный bihemispheric процедуру резки мозга, чтобы исследовать полусферических различия в патологии головного мозга человека и максимально увеличить текущие и будущие методы биомолекулярная / нейровизуализации.

Abstract

Невропатологи, порой, пугаться количеством знаний, необходимых для создания окончательных диагнозов для сложных психоневрологических явлений, описанных в тех пациентов, для которых Вскрытие мозга был запрошен. Хотя прогресс биомедицинских наук и нейровизуализации произвели революцию в психоневрологический поле, они также породили ложное представление, что аутопсии мозга имеют лишь подтверждающим значение. Эта ложная идея создала резкое снижение темпов аутопсии и, следовательно, уменьшается возможность выполнять более детальные и обширные нейропатологических исследования, которые необходимы, чтобы понять многочисленные нормальные и патологические аспекты, еще неизвестные человеческого мозга. Традиционный метод умозаключений корреляции между наблюдаемыми явлениями психоневрологических и соответствующей локализации / характеристике их возможных neurohistological коррелятам продолжает иметь неоспоримое значение. В контексте neuropsychiатрии заболевания, традиционный метод клинико-патологическими еще наилучшей методики (и часто доступны только), чтобы связать уникальные психоневрологические особенности их соответствующих нейропатологических субстратов, так как он опирается конкретно на прямой физической оценки тканей мозга. Оценка посмертных мозга основана на мозг резки процедур, которые варьируются в различных невропатологии центрах. Мозг рубки проводятся в относительно широкой и систематической основе на основе различных клинических и научных непредвиденных обстоятельств, присутствующих в каждом учреждении. Более анатомически включительно и симметричные би-полусферический методология резания мозга должна по крайней мере быть использованы для исследовательских целей в человеческом невропатологии когерентно исследовать, в глубине, нормальных и патологических состояниях с особенностями человеческого мозга (т.е. полусферической специализации и латерализации для конкретных функции). Такой метод обеспечит более полный Коллефикция из neuropathologically хорошо охарактеризованных мозгов, доступных для текущих и будущих методов биотехнологии и нейровизуализации. Мы описываем симметричный би-полусферическую процедуру резки мозга для исследования различий в масштабах полушария патологии головного мозга человека и для использования с током, а также будущих методов биомолекулярная / нейровизуализации.

Introduction

Невропатологи имеют научную привилегию, интеллектуальную честь и диагностическую обязанность оценивать человеческие мозги. На протяжении многих десятилетий, подробные клинические описания заболеваний головного мозга и основные усилия индивидуализировать их возможные neurohistological корреляты в посмертном мозге человека были предприняты. Исторически сложилось, что эти усилия представляют собой наиболее продуктивный модальность, с помощью которого медицинские науки, и неврологии, в частности, выдвинутую в современную эпоху. Благодаря предыдущих выдающихся невропатологов и их преданность делу, решимость, науки и удивительной способностью различать нормальных и аномальных тканях мозга (часто с использованием очень рудиментарные инструменты), теперь мы можем исследовать и целевые заболевания, такие как болезнь Альцгеймера-Перузини в (несправедливо только называется болезнью Альцгеймера болезнь; ЛФД / АД) ^1, болезнь Паркинсона (БП) ^2, болезнь Крейтцфельда-Якоба (БКЯ) ^3, болезнь Лу-Герига / боковой амиотрофический Sclerosis (ALS) ^4, и Гуам болезни ^5, чтобы упомянуть некоторые из них.

Передовые методы нейровизуализации, такие как высокой четкости компьютерной томографии (т.е. многосекционных спиральная КТ, КТ – ангиография), функциональные и морфологические магнитно – резонансная томография (т.е. ФМРТ, диффузионно-МРТ, трактография-МРТ и т.д.), позитронно – эмиссионной томографии (ПЭТ), визуализации УЗИ на основе, и другие, конечно, модифицированы общий подход о том, как диагностировать и вылечить неврологических и психических больных. Тем не менее, хотя методы нейровизуализации способны визуализировать мозг человека при жизни, они не дают возможность, в происшедшем момент, непосредственно к анализу весьма сложных клеточных и субклеточных структур клеток, таких как нейроны; или визуализировать, знак, и количественно определенные типы внутриклеточных повреждений; или точно указать их нейроанатомической или субрегиональной локализацию на циркуляционного и суб-циркуляционного анатомических уровнях. Например, методы нейровизуализации не могут идентифицировать или локализовать тельцами Леви (LB) в пигментированных нейронов черной субстанции (SN), общей патологической особенностью, связанной с PD или нейрофибриллярных сплетений (NFT) в энторинальной коре, классической чертой AD и другие патологии мозга. Нейропатологических исследования в сочетании с современной цифровой микроскопии еще unreplaceable для детального клинико-патологическими корреляции и, таким образом, для окончательных диагнозов.

Благодаря особенностям анатомо-функциональные свойства человеческого мозга, и в особенности к его анатомической локализации (то есть, внутри черепа, естественная защитная система , которая не позволяет прямое изучение его содержания), введения методов нейровизуализации в естественных условиях имеют чрезвычайно помогли врачам и следователям, чтобы найти первоначальные ответы на некоторые из тайн этой сложной ткани. Тем не менее, нет никаких клинических или neuroimagiМетодология нг, которая может заменить уникальную возможность непосредственно анализировать ткани мозга во время вскрытия трупа. Только организованный сбор, сохранение и категоризации человеческого мозга может позволить прямые и систематические исследования нейрональных и не-нейрональных клетках, их субклеточных составляющих, внутриклеточным и внеклеточным патологических поражений, и любой тип ненормальности внутри мозга, чтобы подтвердить, изменить или пересмотреть клинические диагнозы и открыть для себя новые корреляции клинико. Одним из очевидных ограничений в отношении оценки головного мозга при аутопсии было то, что эта процедура является методология в поперечном сечении. Там всегда будет задержка между продолжающейся нейропатологического процесса (клинически проявляется или нет) и шанс, если таковые имеются, чтобы определить его на neurohistological уровне. Это происходит главным образом из-за неспособности человеческого мозга самовосстанавливаться. Это в настоящее время невозможно получить ткани мозга в естественных условиях , не создавая реrmanent повреждение. Следовательно, это не представляется возможным в продольном направлении и neuropathologically оценить тот же мозг / чел. Тем не менее, стандартизированные мозга банковских процедур и повышение уровня информированности для пожертвования мозга среди широкой общественности может внести значительный вклад в решение вопросов, касающихся сроков мозга-аутопсии путем последовательного увеличения числа случаев для сбора и анализа. Таким образом, более адекватное число посмертных мозгов можно было бы получить, чтобы определить постоянные закономерности патологического происхождения и прогрессии для каждого конкретного вида повреждения мозга, связанного с каждым заболеванием головного мозга человека. Это потребует пожертвования и сбор как можно больше мозгов как можно дальше от пациентов, страдающих от любого психоневрологических расстройств, а также от здоровых субъектов управления во всех возрастов. Одним из возможных способов можно собирать как можно больше посмертных мозги как можно дальше от общих и специализированных медицинских центров в качестве стандартной процедуры. Необходимость пожертвований мозга была недавно выраженатеми , кто изучает слабоумия и нормальное старение ^6. Та же необходимость должна быть выражена психоневрологических поля в целом.

Для вышеупомянутая и по другим причинам, обновление текущих процедур резания мозга необходимо. Кроме того, мозг резки процедуры должны быть повсеместно стандартизированы в различных невропатологии научно-исследовательских центров по всему миру, а также принимая во внимание возможность использовать текущие и будущие биотехнологические методы, чтобы лучше исследовать и, надеюсь, окончательно понять, причины и механизмы заболеваний головного мозга в люди.

Здесь, в основном для исследовательских целей, мы опишем симметричную методологию для резки посмертных мозга у людей. Эта процедура предполагает сбор более церебральных областей, чем обычно делается и от обоих мозговых полушарий и мозжечка. Симметричный процедура би-полусферический резки мозга будет соответствовать гораздо лучше наших текущих знаний человеканейроанатомия, нейрохимия и нейрофизиологии. Этот метод также позволяет возможность neuropathologically проанализировать уникальные особенности человеческого мозга, такие как полусферической специализации и латерализации, которые связаны с более высокими познавательных и когнитивных функций типично или исключительно присутствуют в наших видов. Есть ли конкретные патогенетические взаимоотношения между полусферической специализации / латерализации и конкретных типов поражений головного мозга, или является ли своеобразным психоневрологический патогенетической событие изначально, преимущественно, или исключительно связаны с определенным полушарием и функция в настоящее время не известна. Описывая эту симметричную процедуру резки мозга, мы стремимся предложить обновленный метод рассечения мозга человека, который может помочь лучше понять нормальные и патологические состояния в узкоспециализированных ткани, мозг. Этот метод также учитывает те морфо-функциональные аспекты полусферические, которые существуют только в организме человека.

Protocol

Процедуры, связанные с посмертных тканей человека были рассмотрены этическими комитетами и освобождены в соответствии с 45 CFR (Свод федеральных правил). Примечание: Протокол описывает симметричный bihemispheric процедуру резки мозга для оценки посмертных мозга Завершается нейропатологических исс?…

Representative Results

Протокол Длина Время , затраченное на одной симметричной bihemispheric процедуры резки фиксированного мозга оценивается в 1 ч ( за исключением времени , затраченного настройки рассечение стол, инструменты и режущих поверхностей, маркировку;. ?…

Discussion

Этот метод мозга резки может быть адаптирована к конкретным потребностям каждой лаборатории невропатологии (например, за счет уменьшения количества мозговых областей, чтобы оценить для каждого полушария) в то же время сохраняя bihemispheric симметричную процедуру резки в качестве одного и?…

Materials

Copy of signed informed consent allowing autopsy and brain donation for research use.
Detailed clinical history of the subject which should include a detailed description of any neurologic and psychiatric symptoms and signs.
Medical or not-medical video-recordings when available (especially useful in movement disorders field). Next-of-kin’s consent required.
Neuroimaging, neurophysiology, neuropsychiatric and assessment or clinicometric scales.
Genetic and family history data. Genetic reports review, if neurogenetic diseases were diagnosed.
Histology Container	ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES	64233-24
Histology Cassettes	VWR	18000-142 (orange)
Histology Cassettes	VWR	18000-132 (navy)
Knife Handles and Disposable Blades	ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES	62560-04
Long Blades	ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES	62561-20
Disposable Blade Knife Handles	ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES	72040-08
Scalpel Blades	ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES	72049-22
Accu-Punch 2 mm	ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES	69038-02
Polystyrene Containers – Sterile	ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES	64240-12
Dissecting Board	ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES	63307-30
Formalin solution, neutral buffered, 10%	Sigma-Aldrich	HT501128 SIGMA
Hematoxylin Solution, Gill No. 2	Sigma-Aldrich	GHS280 SIGMA
Eosin Y solution, aqueous	Sigma-Aldrich	HT1102128 SIGMA
anti-beta-amyloid	Covance, Princeton, NJ	SIG-39220	1  500
anti-tau	Thermo Fisher Scientific	MN1020	1  500
anti-alpha-synuclein	Abcam	ab27766	1  500
anti-phospho-TDP43	Cosmo Bio Co.	TIP-PTD-P02	1 2000
Digital Camera	Any
Head Impulse Sealing machine	Grainger	5ZZ35