Aprire tracheostomia gastrico acido aspirazione Modello murino di lesioni polmonari acute Risultati in massima acuta non letale Lung Injury

Sommario

Questo protocollo induce un danno polmonare acuto in un topo che ha una stretta fedeltà alla patogenesi della polmonite acida osservata nell'uomo. Generiamo una lesione polmonare acuta massimale non letale a basso pH e teniamo conto delle differenze nella struttura respiratoria anatomica del roditore utilizzando una tracheostomia aperta accoppiata a un rilascio di pressione circonferenziale.

Abstract

polmonite acido è una delle principali cause di sterile danno polmonare acuto (ALI) negli esseri umani. polmonite Acid estende lo spettro clinico da asintomatica alla sindrome acuta da distress respiratorio (ARDS), caratterizzata da alveolite neutrofila e danni fisici, sia dell'epitelio alveolare e endotelio vascolare. Clinicamente, ARDS è definita da un esordio acuto di ipossiemia, infiltrati polmonari bilaterali chiazze ed edema polmonare non cardiogeno. Studi sull'uomo ci hanno fornito informazioni preziose sui cambiamenti fisiologici e infiammatorie nei polmoni causate da ARDS, che ha portato a diverse ipotesi sui meccanismi subalterno. Purtroppo, le difficoltà determinano l'eziologia della ARDS, nonché una vasta gamma di fisiopatologia hanno portato ad una mancanza di informazioni critiche che possono essere utili nello sviluppo di strategie terapeutiche.

modelli animali traslazionali sono utili quando il loro patogenesi e fisiopatologia ripro precisioneEA concetto provato in entrambi in vitro e clinica. Anche se grandi modelli animali (ad esempio, pecore) le caratteristiche di condivisione di anatomia di albero di trachea-bronchi umano, modelli murini fornire una serie di altri vantaggi tra cui: basso costo; breve ciclo riproduttivo si presta ad una maggiore acquisizione dei dati; un sistema immunologico ben compreso; e un genoma ben caratterizzato porta alla disponibilità di una varietà di delezione genica e ceppi transgenici. Un modello robusto basso pH indotta ARDS richiede un murino ALI che colpisce principalmente l'epitelio alveolare secondariamente l'endotelio vascolare, nonché le piccole vie aeree che porta agli alveoli. Inoltre, una lesione riproducibile con ampie differenze tra insulti pregiudizievoli e non pregiudizievoli è importante.

Il modello di aspirazione acido gastrico murino qui presentata utilizzando acido cloridrico impiega un tracheostomia aperta e ricrea uno scenario patogeno che riproduce il basso pH pneumonitis lesioni negli esseri umani. Inoltre, questo modello può essere utilizzato per esaminare l'interazione di un basso pH insulto con altre entità polmonari pregiudizievoli (per esempio, particelle di cibo, batteri patogeni).

Introduzione

ARDS è caratterizzata da infiammazione polmonare diffusa ed è clinicamente visto come mancanza acuta di respiro con ipossiemia. Questi sintomi si verificano spesso meno di 24 ore dopo un evento incitamento, come un trauma, la sepsi, le reazioni correlate trasfusione di sangue o di aspirazione. E 'caratterizzata da istopatologico alveolite neutrofila (cioè diffusa infiammazione) localizzato dell'epitelio alveolare e endotelio vascolare che porta alla perdita di proteine e formazione di membrane in seguito ialina. L'aspirazione è classificato come polmonite chimica o polmonite da aspirazione. ¹ Il componente acida dell'a....

Protocollo

Tutti i materiali e le attrezzature devono essere raccolti e adeguatamente organizzata prima procedura. La procedura deve essere effettuata con le transizioni senza soluzione di continuità da un passo a quello successivo, al fine di fornire, i dati riproducibili coerenti. Questo protocollo segue politiche istituzionali fissati dal Comitato Cura e uso istituzionale degli animali presso il Buffalo Veterans Affairs Medical Center.
NOTA: C57BL / 6 topi maschi e femmine sono stati utilizzati per questo protocollo. Non vi è alcuna differenza significativa di fuoriuscita di albumina tra i sessi.

1. Acido cloridrico Preparazione

1. Fare 56,2 mM HCl

Risultati

Polmonare istopatologia del modello murino di acido polmonite

I topi sono stati feriti come descritto sopra e polmoni sono stati rimossi 24 ore dopo pH basso insulto, sezionati e H & E macchiati (Figura 1). cellule necrotiche, perdita di architettura del parenchima polmonare, cellule e detriti all'interno di spazi aerei e significative infiltrazioni PMN sono chiaramente rispettate. Simile all'aspirazione clin.......

Discussione

L'obiettivo era quello di sviluppare un modello animale ALI utilizzando aspirazione acido gastrico che ricorda da vicino la fisiopatologia che si verifica negli esseri umani durante lo sviluppo di polmonite acido e successive ARDS. Nello sviluppo di un modello, abbiamo scelto una specie animale che offre alta l'acquisizione dei dati di throughput grazie al suo basso costo, ciclo riproduttivo breve, e un sistema immunitario ben compreso, con una grande varietà di strumenti di indagine (ad esempio, .......

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
siringa, 1 cc	Becton Dickinson	309628
siringa, 5 cc	Becton Dickinson	ago 309646
, 22 G x 1 1/2"	Becton Dickinson	305159
ago, 26 G x 1 1/2"	Becton Dickinson	305111
1-O Sutura in seta intrecciata	Harvard Apparatus	517730
3" Curvo pinze seghettate per tessuti	Fine Science Tools	11065-07
3" Pinze "dentate" per tessuti curvi, 1 x 2 denti	Fine Science Tools	11067-07
Forbici da micro dissezione curve da 4	Fine Science Tools	14061-10
forbici a molla per taglio osseo	Fine Science Tools	16144-13
Emostatico di bloccaggio curvo da 3 1/2"	Fine Science Tools	13021-12
Cucitrice cutanea monouso	3M	DS-25
(20 gauge x 1/2" adattatore per tubi in acciaio inossidabile)	Becton Dickinson	408210
			dissezione inclinata a 60 gradi
0,5% Bupivacaina
isoflurano
Betadine e applicatore

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