쥐 모델에서 Infrarenal 복부 대동맥 클램핑에 의해 재현 동맥 발가 벗김 부상
Summary
동맥 발가 벗김 부상 다음 재에 내피 세포의 세포 및 분자 메커니즘을 이해하는 것은 혈전증과 동맥의 재 협착을 방지하는 가장 중요하다. 여기에서 우리는 infrarenal 복부 대동맥의 재현 동맥 발가 벗김 부상에 대한 프로토콜을 설명합니다. 절차는 마우스 모델을 사용하여 내피 세포 재생을 조절하는 기전을 연구하기 위해 개발되었다.
Abstract
경피적 혈관 중재 균일 이후 혈전증과 재 협착을 초래할 동맥 발가 벗김 부상을 초래할. 이러한 합병증은 상처 마진 내에 재에 내피 세포의 손상에 기인한다. 그러나 재에 내피 세포의 세포 및 분자 메커니즘을 정의 할 남아있다. 동맥 발가 벗김 후 재 내피 세포 형성을 연구하는 여러 동물 모델을 사용할 수 있지만, 몇 가지 때문에 수술 제한 마우스로 수행됩니다. 이 형질 전환 마우스를 이용 라인 재에 내피 세포의 처리로 특정 유전자의 기여도를 조사 할 수있는 기회를 약화시킨다. 여기서는 외부 혈관 클램프를 사용하여 infrarenal 복부 대동맥에서 동맥 삭박 부상의 재현성 뮤린 모델을 만들기위한 단계별 프로토콜을 제시한다. 피브리노겐과 β-catenin이에 대한 부상 대동맥의 면역 세포 화학 염색 프로 혈전 표면의 노출을 보여각각 그대로 내피 세포의 국경을 거라고. 여기에 제시된 방법은 트랜스 제닉 마우스 모델에서 동맥 삭박 부상을 부과하기위한 고유 실제 공구를 생성 속도의 우수한 생존율 및 상대 기술 용이성의 이점을 갖는다. 이 방법을 사용하여, 연구자는 정상 또는 병리 적 조건하에 재에 내피 세포의 메카니즘을 해명 할 수있다.
Introduction
혈전증과 재 협착은 혈관 풍선 성형술 및 1,2 스텐트 등 경피적 혈관 중재를 받아야 환자에서 심각한 초기와 후기 합병증이다. 몇 가지 전략은 이들 합병증, 특히 이중 항 혈소판 요법 및 약물 방출 스텐트를 해결하는데 이용되어왔다. 그러나, 약간의 초점은 혈전증과 재 협착, 내피 세포 커버리지 (삭박), 즉 손실의 근본 원인에 배치되었습니다. 삭박 손상으로 인해 혈관 벽에 기계적 외상 중재 방법의 불가피한 결과이다. 이 기계적 외상은 혈액 3 순환에 손상 및 기저막 및 혈관 평활근의 보호 내피 층과 노출이 제거 될 수 있습니다. 이 분야에서 내피 세포의 손실뿐만 아니라 혈소판 부착 및 후속 혈전증을 촉진하는 프로 혈전 성 및 염증성 환경을 조성하지만,LSO 마이그레이션 및 신생 내막 비후 및 재 협착 (4)에서 얻어진 혈관 평활근 세포의 증식을 자극한다. 이러한 합병증 및 관련 치료는 인간의 건강에 영향을 미칠 중요한 병적 상태, 특히 재발 성 허혈성 질환 및 출혈 이벤트로 이어집니다.
다시에 내피 상처 여백에서 무 결함 부상의 혈전증과 재 협착 (5) 예방에 가장 중요하다. 스텐트의 범위가 6,7 스트럿과 부검 결과 및 동물 모델을 효과적으로 혈전증의 감소 속도를 보여 주었다. 약물 방출 스텐트는 평활근의 증식과 신생 내막의 증식을 억제하여 재 협착의 비율을 감소 동맥 재 내피 세포 형성에 상당한 장애와 후기 혈전증 3의 증가 속도가 발생할 고안. 불행하게도, 재 내피 세포 형성을위한 메커니즘을 이해하는 것은 주로 AP의 부족에 의해 제한 느린 프로세스왔다propriate 동물 모델 (8).
혈관 손상에 따라 내피 세포와 혈관 평활근 세포의 역할을 이해하기위한 여러 동물 모델 7,9,10 생성되었다. 래트 경동맥 풍선 손상 모델은 가장 특징이 있으며, 총 세포 및 분자 수준에서 11 삭박 손상의 효과를 연구하기 위해 사용되었다. 그럼에도 불구하고, 우수한 생존율과 동맥 발가 벗김 부상의 높은 재현성 쥐 모델은 누락 훨씬 더 다양한 설정에서 혈관 재생을 규명 할 수 여러 유전자 변형 라인을 활용할 필요가있다.
이 원고는 재현하고 수행 간단 동맥 발가 벗김 부상의 쥐 모델을 제시한다. 접근 방식은 여러 유전자 변형 라인에서 최소한의 이환율과 사망률을 보이고있다. 이 때문에, 유전자 변형 마우스 라인의 다양한 숫자,이 모델로 사용될 수있다발가 벗김 부상 후 재 내피 세포 형성의 기초가되는 분자 메커니즘을 규명.
Protocol
Representative Results
Discussion
때문에 이러한 풍선 혈관 성형술 및 혈관 스텐트 삽입술 등 경피적 중재에 동맥 발가 벗김 부상, 초기와 후기 혈관 혈전증과 재 협착 발생 및 재발 성 허혈성 사건 3,12에 기여한다. 흥미롭게도, 수술, 혈관 클램프는 또한 경피적 여부 13 열려있는 혈관 절차를받는 환자에게 문제의 범위를 확대하고, 동맥 삭박의 원인으로 관여한다. 손상된 내피 세포 형성 재 협착 및 혈전증 상당히 ?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 작품은 MLIA에 건강 (HL130290)의 국립 연구소를 엘리와 재생 의학의 Edythe 넓은 센터에서 보조금 지원 ASS과 AIM, 필립 J. Whitcome 원정대는 AIM하기에 UCLA 교육 프로그램에 줄기 세포 연구하고 있었다.
Materials
| Zeiss Discovery.V12 Stereomicroscope | Zeiss | 495037-9904-000 | |
| Rodent Heated Surgical Platform | Protech International | RES4000 | Heated platform for body temperature maintenance with nosecone for anesthestic maintenance and on which surgical procedure is performed |
| Isoflurane | Henry Schein | 50033 | 4% Induction; 2.5% Maintenance |
| Isoflurane Vaporizer | Summit Medical Equipment | 470062 | |
| Stryker T/Pump Warm Water Recirculator | Kent Scientific | TP-700 | |
| Artifical Tears Lubricant Opthalmic Ointment | Akorn Animal Health | 17478-162-35 | |
| Carprieve (Carprofen) | Norbrook Laboratories | NDC 55529-131-01 | |
| Oster™ A5 Professional Animal Clipper | M.Schneider & Sons Inc. | 78005010 | Use with animal clipper size 40 |
| Adjustable Wire Retractor | Fine Science Tools | 17004-05 | |
| Schwartz Micro Serrefines – Sharp Bend | Fine Science Tools | 18052-03 | |
| Surgical Instruments | Fine Science Tools | sharp dissecting forceps, blunt forceps, fine scissors, spring scissors, hemostat | |
| 0.5% Marcaine | Hospira | 0409-1610-50 | |
| 5-0 Suture, Vicryl | Fisher Scientific | NC0189890 | tapered needle |
| Vetbond | Fisher Scientific | NC0304169 | |
| Falcon® 35 mm Not TC-Treated Easy-Grip Style Bacteriological Petri Dish | Corning | 351008 | |
| Sylgard 184 Silicone Elastomer Kit | Dow Corning | 3097358-1004 | |
| Dissecting pins | Fisher Scientific | NC9681411 | |
Riferimenti
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