Vena interposizione Modello: un modello adatto per studiare Bypass Graft pervietà
Summary
This video demonstrates a model to study the development of myointimal hyperplasia after venous interposition surgery in rats.
Abstract
Bypass grafting is an established treatment method for coronary artery disease. Graft patency continues to be the Achilles heel of saphenous vein grafts. Research models for bypass graft failure are essential for a better understanding of pathobiological and pathophysiological processes during graft patency loss. Large animal models, such as pigs or sheep, resemble human anatomical structures but require special facilities and equipment. This video describes a rat vein interposition model to investigate vein graft patency loss. Rats are inexpensive and easy to handle. Compared to mouse models, the convenient size of rats permits better operability and enables a sufficient amount of material to be obtained for further diverse analysis. In brief, the inferior epigastric vein of a donor rat is harvested and used to replace a segment of the femoral artery. Anastomosis is conducted via single stitches and sealed with fibrin glue. Graft patency can be monitored non-invasively using duplex sonography. Myointimal hyperplasia, which is the main cause for graft patency loss, develops progressively over time and can be calculated from histological cross sections.
Introduction
malattie coronarica e loro complicanze sono tra le principali cause di morte in tutto il mondo. strategie terapeutiche attuali si concentrano su ristabilendo il flusso di sangue, sia dilatando nave ridotto o con la creazione di un bypass. Bypass coronarico (CABG) utilizzando autografts vena è stato descritto nel 1968 ed è stato affinato nel corso degli anni. A parte la rivascolarizzazione della discendente anteriore dell'arteria coronaria, safena condotti vena sono più comunemente utilizzati 1. Tuttavia, pervietà dell'innesto rimane il tallone d'Achille di innesti di vena safena (SVG). Un anno dopo l'intervento chirurgico, pervietà dell'innesto è 85%, scendendo al 61% dopo dieci anni 2,3. Svelare i meccanismi fisiopatologici e le cause della perdita di pervietà SVG è quindi un compito importante.
Questo video dimostra una vena modello di interposizione di ratto per studiare perdita del trapianto vena. Gli obiettivi generali di questo metodo sono per esplorare la patobiologico sottostantee processi -physiological durante la progressione della malattia e di sviluppare un modello adatto per la droga o test opzione terapeutica. Con il trapianto della vena epigastrica superficiale nel sistema arterioso, questo modello imita da vicino la situazione clinica di bypass coronarico. trauma chirurgico, ischemia, e lo stress di parete sono importanti trigger di alterazioni vascolari patologiche e sono imitati nel modello descritto.
modelli e diverse specie sono a disposizione per studiare la perdita di pervietà della vena del trapianto. Grandi modelli animali, come maiali, pecore 4 5 6, cani e scimmie 7, assomigliano nave umana e strutture anatomiche e consentono quindi di strategie terapeutiche complesse, come stenting bypass o di nuove tecniche chirurgiche, da testare 8. Tuttavia, sono necessari speciali abitazioni, attrezzature e personale. Inoltre, i costi elevati e la necessità di un anestesista aggiuntivo durante la chirurgia impediscono loro applicazione più ampio. Smtutti gli animali, inclusi ratti, sono facili da maneggiare, non richiedono apposito alloggiamento, e hanno costi gestibili. Rispetto ai modelli murini 9,10, modelli di ratto hanno il vantaggio di una migliore operatività e quindi meno variabilità nel risultato. I ratti sono fisiologicamente e geneticamente più simili agli esseri umani che topi 11,12. Inoltre, la maggior parte dei topi wild-type si sviluppano solo myointima limitata 13, che rendono modelli murini inclini a errori di tipo II. L'istologia delle principali vene mouse, come la vena cava inferiore, costituito solo da pochi strati di cellule e rende difficile valutazione precoce 13. Un ulteriore inconveniente è la piccola quantità di tessuto disponibili per successive analisi dopo il recupero innesto.
Il modello descritto in questo video è riproducibile, economico e di facile esecuzione, e può essere stabilito in modo rapido e affidabile. È particolarmente adatto per valutare costosi agenti terapeutici sperimentali, come vettori viraliper la terapia genica, in modo economico.
Protocol
Representative Results
Discussion
Questo video dimostra una vena modello di interposizione di ratto per indagare perdita del trapianto vena e per consentire l'esplorazione dei processi patologici sottostanti e la sperimentazione di nuovi farmaci o opzioni terapeutiche.
L'anestesia è un aspetto cruciale delle procedure chirurgiche. Si raccomanda un sistema per anestesia per inalazione continua, in quanto questo è un metodo semplice e sicuro, in particolare durante operazioni prolungate. Questo può essere di grande …
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Gli autori ringraziano Christiane Pahrmann per la sua assistenza tecnica. Questo studio è stato finanziato dalla Deutsche Stiftung fuer Herzforschung (F / 28/14). DW è stato sostenuto dal viaggio premio dalla International Society for Heart Lung Transplantation. TD ha ricevuto il Else Kröner eccellenza Stipend dal Else-Kröner-Fresenius-Stiftung (2012_EKES.04). SS ha ricevuto borse di ricerca dalla Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG; DE2133 / 2-1, TD e SCHR992 / 3- 1, SCHR992 / 4-1, SS).
Materials
| Rat LEW/Crl | Charles River | Stock number 004 | |
| Rat LEW-Tg(Gt(ROSA)26Sor- 1 luc)11Jmsk |
Institute of laboratory animals, Kyoto University, Japan | NBPR rat number 0299 | http://www.anim.med.kyoto-u.ac.jp/NBR/ |
| PFA 4% | Electron Microscopy Sciences | #157135S | 20% |
| hair clipper | WAHL | 8786-451A ARCO SE | |
| Forene | AbbVie | PZN 10182054 Art.Nr.: B506 | Isoflurane |
| microsurgical clamp | Fine Science Tools | 18055-04 | Micro-Serrefine – 4mm |
| clamp applicator | Fine Science Tools | 18056-14 | |
| hair removal creme | Rufin cosmetic | 27618 | |
| Povidone-Iodine | Betadine Purdue Pharma | NDC:67618-152 | |
| 10-0 Ethilon suture | Ethicon | 2814G | |
| 5-0 prolene suture | Ethicon | EH7229H | |
| Rimadyl | Pfizer | 400684.00.00 | Carprofen |
| Novaminsulfon | Ratiopharm | PZN 03530402 | Metamizole |
| Heparin | Rotexmedica | PZN: 3862340 | 25.000 I.E./mL |
| Xylocain 1% | AstraZeneca | PZN: 1137907 | Lidocain |
| EVICEL | J&J Med.Ethicon Biosur | PZN 7349697 Art. Nr.:EVK01DE | fibrin glue |
| NaCl 0,9% | B.Braun | PZN 06063042 Art. Nr.: 3570160 | |
| Vevo 770 high-resolution in vivo micro-imaging system | VisualSonics | duplex sonography | |
| Ecogel 100 ultrasound gel | Eco-med | 30GB | |
| D-Luciferin Firefly, potassium salt | Biosynth | L-8220 | |
| PBS pH 7,4 | Gibco | 10010023 | |
| Xenogen Ivis 200 | Perkin Elmer | bioluminescence imaging | |
| Weigerts iron hematoxylin Kit | Merck | 1.15973.0002 | Trichrome staining |
| Resorcine-Fuchsine Weigert | Waldeck | 2.00E-30 | Trichrome staining |
| Acid Fuchsin | Sigma-Aldrich | F8129-25G | Trichrome staining |
| Ponceau S solution | Serva Electrophoresis | 33427 | Trichrome staining |
| Azophloxin | Waldeck | 1B-103 | Trichrome staining |
| Molybdatophosphoric acid hydrate | Merck | 1.00532.0100 | Trichrome staining |
| Orange G | Waldeck | 1B-221 | Trichrome staining |
| Light Green SF | Waldeck | 1B-211 | Trichrome staining |
| Vitro-Clud | Langenbrinck | 04-0001 | |
| Glacial Acetic Acid | Sigma-Aldrich | 537020 | |
| 37% HCl | Sigma-Aldrich | H1758 | |
| Xylene | Th. Geyer | 3410 | |
| Paraffin | Leica biosystems | REF 39602004 | |
| Ethanol absolute | Th. Geyer | 2246 | |
| Ethanol 96% | Th. Geyer | 2295 | |
| Ethanol 70% | Th. Geyer | 2270 | |
| Slide Rack | Ted Pella | 21057 | |
| Staining dish | Ted Pella | 21075 | |
| Bepanthen Eye and Nose ointment | Bayer | 1578675 | Eye ointment |
Riferimenti
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