정맥 삽입 위치 모델 : 바이 패스 이식 개통을 연구하기위한 적절한 모델
Summary
This video demonstrates a model to study the development of myointimal hyperplasia after venous interposition surgery in rats.
Abstract
Bypass grafting is an established treatment method for coronary artery disease. Graft patency continues to be the Achilles heel of saphenous vein grafts. Research models for bypass graft failure are essential for a better understanding of pathobiological and pathophysiological processes during graft patency loss. Large animal models, such as pigs or sheep, resemble human anatomical structures but require special facilities and equipment. This video describes a rat vein interposition model to investigate vein graft patency loss. Rats are inexpensive and easy to handle. Compared to mouse models, the convenient size of rats permits better operability and enables a sufficient amount of material to be obtained for further diverse analysis. In brief, the inferior epigastric vein of a donor rat is harvested and used to replace a segment of the femoral artery. Anastomosis is conducted via single stitches and sealed with fibrin glue. Graft patency can be monitored non-invasively using duplex sonography. Myointimal hyperplasia, which is the main cause for graft patency loss, develops progressively over time and can be calculated from histological cross sections.
Introduction
관상 동맥 질환과 그 합병증은 전세계 사망의 주요 원인 중입니다. 현재 치료 전략을 재 확립 혈류에 어느 좁아진 혈관을 확장시키고 또는 바이 패스를 작성하여 초점. 정맥자가 이식을 이용하여 관상 동맥 우회술 (CABG) 먼저 1968 년에 설명하고, 수년에 걸쳐 정제하고있다. 외에도 왼쪽 전방의 재관류는 관상 동맥을 내림차순에서, 복재 정맥 도관은 가장 일반적으로 1을 사용합니다. 그러나, 이식 개통은 복재 정맥 이식 (SVG)의 약점 남아있다. 한 해 수술 후 이식 개통은 십년 2,3 후 61 %로 떨어지고, 85 %이다. SVG 개통 손실의 병태 생리 학적 기전과 원인을 공개하는 것은 그러므로 중요한 작업입니다.
이 동영상은 정맥 이식편 손실을 조사하기 위해 쥐의 정맥 개재 모델을 보여줍니다. 이 방법의 전반적인 목표는 기본 병인 학적 탐구한다및 질병의 진행 동안 -physiological 과정은 약물이나 치료 옵션 테스트에 적합한 모델을 개발한다. 동맥 시스템으로 표면 상복부 정맥 이식함으로써,이 모델은 밀접하게 관상 동맥 우회술의 임상을 모방. 외과 외상, 허혈, 벽 스트레스는 병적 인 혈관 변화의 중요한 트리거하고 설명하는 모델을 모방하고 있습니다.
다른 모델과 종은 정맥 이식편 개통 손실을 조사 할 수 있습니다. 이러한 돼지 4, 양 5 개 (6), 원숭이 (7)과 같은 대형 동물 모델은 인간의 용기와 해부학 적 구조와 유사하므로 팔을 테스트 할 이러한 바이 패스 스텐트 삽입하거나 새로운 수술 기법과 같은 복잡한 치료 전략을, 수 있습니다. 그러나, 특수 하우징, 장비 및 인력이 필요합니다. 또한, 고비용 및 수술 중에 마취 추가의 필요성은 광범위한 응용을 방해. SM래트를 포함한 모든 동물은 특수 하우징을 필요로하지 않으며, 취급이 용이하며, 관리 비용을 갖는다. 마우스 모델 9,10-에 비해 래트 모델 결과의 더 조작성을 이용하므로 적은 변동을 가지고있다. 쥐 생리 학적 및 유전 마우스 (11, 12)보다 인체에 더 유사하다. 또한 대부분의 야생형 마우스는 II 에러를 입력하는 경향이 마우스 모델을 한정 myointima 13 개발한다. 예 하대 정맥 등 주요 마우스 정맥의 조직학은 단지 몇 세포 층으로 구성되어 있으며, 초기 평가 어려운 (13)를 렌더링합니다. 다른 단점은 그래프트 복구 후 후속 분석 가능한 조직의 작은 양이다.
동영상에서 설명한 모델 수행 재현성 저렴하고, 용이하고, 신속하고 확실하게 설정할 수있다. 이 같은 바이러스 벡터와 같은 고가의 실험 치료제를 평가에 특히 적합경제적 인 방식으로 유전자 치료를위한.
Protocol
Representative Results
Discussion
이 동영상은 정맥 이식편 손실을 조사 및 기본 병리학 적 과정의 탐사 및 새로운 약물이나 치료 옵션의 테스트를 위해 허용하는 쥐의 정맥 개재 모델을 보여줍니다.
마취는 수술 절차의 중요한 측면이다. 이것은 특히 장시간 작업 중에, 안전하고 쉬운 방법으로 연속 inhalative 마취 시스템은 좋습니다. 이 동작은 이상 1 시간 소요 트레이닝 단계 동안 매우 중요 할 수있다.
<p …Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
저자는 그녀의 기술 지원을 크리스티안 Pahrmann 감사합니다. 본 연구는 독일 재단 FUER Herzforschung에 의해 투자되었다 (F / 14분의 28). DW는 심장 및 폐 이식을위한 국제 사회에서의 여행 수상에 의해 지원되었다. TD는 그렇지-크로네-는 Fresenius 재단 (2012_EKES.04)에서 그렇지 크로네 우수 장학금을 받았다. SS는 독일 연구 협회로부터 연구비를받은 (DFG, DE2133 / 2-1, TD 및 SCHR992 / 3 일, SCHR992 / 4-1, SS).
Materials
| Rat LEW/Crl | Charles River | Stock number 004 | |
| Rat LEW-Tg(Gt(ROSA)26Sor- 1 luc)11Jmsk |
Institute of laboratory animals, Kyoto University, Japan | NBPR rat number 0299 | http://www.anim.med.kyoto-u.ac.jp/NBR/ |
| PFA 4% | Electron Microscopy Sciences | #157135S | 20% |
| hair clipper | WAHL | 8786-451A ARCO SE | |
| Forene | AbbVie | PZN 10182054 Art.Nr.: B506 | Isoflurane |
| microsurgical clamp | Fine Science Tools | 18055-04 | Micro-Serrefine – 4mm |
| clamp applicator | Fine Science Tools | 18056-14 | |
| hair removal creme | Rufin cosmetic | 27618 | |
| Povidone-Iodine | Betadine Purdue Pharma | NDC:67618-152 | |
| 10-0 Ethilon suture | Ethicon | 2814G | |
| 5-0 prolene suture | Ethicon | EH7229H | |
| Rimadyl | Pfizer | 400684.00.00 | Carprofen |
| Novaminsulfon | Ratiopharm | PZN 03530402 | Metamizole |
| Heparin | Rotexmedica | PZN: 3862340 | 25.000 I.E./mL |
| Xylocain 1% | AstraZeneca | PZN: 1137907 | Lidocain |
| EVICEL | J&J Med.Ethicon Biosur | PZN 7349697 Art. Nr.:EVK01DE | fibrin glue |
| NaCl 0,9% | B.Braun | PZN 06063042 Art. Nr.: 3570160 | |
| Vevo 770 high-resolution in vivo micro-imaging system | VisualSonics | duplex sonography | |
| Ecogel 100 ultrasound gel | Eco-med | 30GB | |
| D-Luciferin Firefly, potassium salt | Biosynth | L-8220 | |
| PBS pH 7,4 | Gibco | 10010023 | |
| Xenogen Ivis 200 | Perkin Elmer | bioluminescence imaging | |
| Weigerts iron hematoxylin Kit | Merck | 1.15973.0002 | Trichrome staining |
| Resorcine-Fuchsine Weigert | Waldeck | 2.00E-30 | Trichrome staining |
| Acid Fuchsin | Sigma-Aldrich | F8129-25G | Trichrome staining |
| Ponceau S solution | Serva Electrophoresis | 33427 | Trichrome staining |
| Azophloxin | Waldeck | 1B-103 | Trichrome staining |
| Molybdatophosphoric acid hydrate | Merck | 1.00532.0100 | Trichrome staining |
| Orange G | Waldeck | 1B-221 | Trichrome staining |
| Light Green SF | Waldeck | 1B-211 | Trichrome staining |
| Vitro-Clud | Langenbrinck | 04-0001 | |
| Glacial Acetic Acid | Sigma-Aldrich | 537020 | |
| 37% HCl | Sigma-Aldrich | H1758 | |
| Xylene | Th. Geyer | 3410 | |
| Paraffin | Leica biosystems | REF 39602004 | |
| Ethanol absolute | Th. Geyer | 2246 | |
| Ethanol 96% | Th. Geyer | 2295 | |
| Ethanol 70% | Th. Geyer | 2270 | |
| Slide Rack | Ted Pella | 21057 | |
| Staining dish | Ted Pella | 21075 | |
| Bepanthen Eye and Nose ointment | Bayer | 1578675 | Eye ointment |
Riferimenti
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