Summary

Test de reconnaissance d’objet nouveau pour la recherche sur l’apprentissage et la mémoire chez les souris

Published: August 30, 2017
doi:

Summary

Le test de reconnaissance de l’objet (ORT) est un test simple et efficace pour évaluer l’apprentissage et la mémoire chez les souris. La méthodologie est décrite ci-dessous.

Abstract

Le test de reconnaissance de l’objet (ORT) est un test comportemental couramment utilisé pour l’étude des divers aspects de l’apprentissage et la mémoire chez les souris. L’ORT est assez simple et peut être complété sur une période de 3 jours : jour d’accoutumance, journée de formation et test day. Au cours de la formation, la souris est autorisée à explorer 2 objets identiques. Le jour du test, l’un des objets formation est remplacé par un nouvel objet. Parce que les souris ont une préférence innée pour la nouveauté, si la souris reconnaît l’objet familier, il passe la majeure partie de son temps à l’objet du roman. En raison de cette préférence innée, il n’y a pas besoin de renforcement positif ou négatif ou longtemps des horaires de formation. En outre, l’ORT peut également être modifiée pour de nombreuses applications. L’intervalle de conservation peut être raccourcie pour examiner la mémoire à court terme, ou allongé pour sonder la mémoire à long terme. Intervention pharmacologique peut être utilisée à différentes époques avant la formation, après la formation, ou avant le rappel d’enquêter sur les différentes phases de l’apprentissage(acquisition, consolidation précoce ou tardive ou en rappel). Dans l’ensemble, l’ORT est un test relativement faibles contraintes, efficace pour la mémoire chez les souris et est approprié pour la détection des changements neuropsychologiques après les manipulations pharmacologiques, biologiques ou génétiques.

Introduction

Le test de reconnaissance d’objet (ORT), également connu sous le nom du test de reconnaissance de nouveaux objet (NOR), est un moyen relativement rapide et efficace pour tester les différentes phases de l’apprentissage et la mémoire chez les souris. Il a été initialement décrite par Ennaceur et Delacour en 1988 et utilisé principalement dans les rats1; Cependant, depuis lors, elle a été adaptée avec succès pour une utilisation à la souris2,3,4,5,6,7. L’épreuve s’appuie sur aussi peu que trois sessions : session une accoutumance, un entraînement et un test session. La formation comprend simplement une exploration visuelle de deux objets identiques, alors que la session de test consiste à remplacer un des objets précédemment explorés avec un nouvel objet. Parce que les rongeurs ont une préférence innée pour la nouveauté, un rongeur qui se souvient de l’objet familier passera plus de temps à explorer les nouveaux objet7,8,9.

Le principal avantage de l’ORT sur d’autres tests de mémoire de rongeurs, c’est qu’il repose sur la propension naturelle des rongeurs pour explorer la nouveauté8. Il n’y a donc pas besoin de nombreuses séances de formation ou tout renforcement positif ou négatif pour motiver le comportement. Cela signifie que l’ORT est beaucoup moins stressant, par rapport à d’autres essais10,11,12,13,14,15et nécessite beaucoup moins de temps pour exécuter d’autres couramment utilisés mémoire teste, comme le labyrinthe aquatique Morris ou le labyrinthe de Barnes, qui peut prendre jusqu’à une semaine ou plus. Par conséquent, les conditions de l’ORT ressemblent davantage à celles utilisées dans l’étude de la cognition humaine, augmentant la validité écologique de l’essai au cours de nombreux autres tests mémoire rongeurs. De même, parce que ORT est une tâche simple rappel visuel, il a été avec succès adapté pour utilisation chez de nombreuses espèces, y compris les humains et les primates non humains, afin d’évaluer différents aspects entre les espèces de mémoire déclarative 2,16 ,,17. Enfin, l’ORT peut facilement être modifié afin d’examiner les différentes phases de l’apprentissage et la mémoire (c.-à-d., acquisition, consolidation ou rappel), afin d’évaluer les différents types de mémoire (par exemple, la mémoire spatiale), ou d’évaluer la rétention différentes intervalles (par exemple, mémoire à long terme à court terme vs ).

La polyvalence de l’ORT fournit une plate-forme pour des applications innombrables recherches. Des études peuvent faire utiliser des agents pharmacologiques pour perturber ou améliorer la mémoire. Variant le temps d’administration des médicaments avant ou après l’entraînement ou avant le test peut-il allusion à neural sous-jacent mécanismes qui conduisent à perturbé ou amélioré la mémoire6,18,19, 20. d’une manière similaire, la technologie d’optogenetic peut être utilisé à ces mêmes divers moments à regarder l’activation/inhibition neuronale qui contribue aux différentes phases de l’apprentissage et la mémoire. L’ORT est également approprié pour déterminer les différences chez les animaux transgéniques, dans les études de la lésion, dans les modèles neurodégénératives ou dans vieillissement études21,22,23,24, 25 , 26 , 27 , 28. le temps entre la formation et les tests, connu comme l’intervalle de conservation, pouvant être modifié pour évaluer un de ces changements sur le court et long terme mémoire26. En fin de compte, l’ORT peut servir comme un outil pour étudier les changements pharmacologiques, génétiques et neurologiques à l’apprentissage et la mémoire, ou ces outils peuvent être utilisés pour étudier la base de l’apprentissage et la mémoire de l’ORT.

Protocol

toutes les procédures effectuées ici ont été soumis à et approuvé par l’animalier et Use committee et ont été réalisées suivant les directives des NIH. 1. sélection d’objets et de montage expérimental Sélectionner les objets qui sont assez différentes pour être facilement distinguées par des souris, mais d’un égal degré de complexité (texture, forme, structuration de couleur et de luminosité, etc.) afin de minimiser tout risque induit par…

Representative Results

Un montage expérimental général pour l’ORT est illustré à la Figure 2. Sur l’accoutumance souris jour (T0) sont placés dans l’arène vide pendant 5 min. vingt-quatre heures plus tard, les souris sont remis à la chambre avec 2 objets identiques et a permis d’explorer librement jusqu’à 10 min (T1). Sur les tests de jour (T2), les souris sont encore une fois placés dans l’arène, mais avec un objet familier et un nouvel objet et a permis d’e…

Discussion

L’ORT est une méthode efficace et souple pour étudier l’apprentissage et la mémoire chez les souris. Lorsque vous configurez une expérience, il est important de tenir compte d’un certain nombre de variables qui peuvent affecter le résultat. Tel que discuté dans les résultats représentatifs, la souche de souris affectera les deux intervalle de temps et rétention d’exploration. Une diminution des temps d’exploration peut fausser ou masque se traduit par une discrimination absolue analyse<sup class="xref"…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Travaux cités précédemment publié par l’auteur a été financée par une subvention du National Institute of Mental Health (MH088480). L’auteur tient à remercier son ancien mentor, le Dr James O’Donnell pour son soutien dans ce projet. Cette publication est soutenue par une subvention de l’Institut National de santé (T32 DA007135).

Materials

Open Field Box Panlab/Harvard Apparatus LE800SC Available in grey, white, or black
ANY-maze Stoelting Co. 60000 Behavior tracking system
EthoVisionXT 12 Noldus Behavior tracking system; requires 3 point tracking
Video Camera Any Video camera should be mounted directly overhead of the apparatus
70% Ethanol  Fisher Scientific BP2818-4 Prior to starting testing and in between trials, each object should be carefully cleaned. The floor and walls of the apparatus should also be cleaned. 

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Citazione di questo articolo
Lueptow, L. M. Novel Object Recognition Test for the Investigation of Learning and Memory in Mice. J. Vis. Exp. (126), e55718, doi:10.3791/55718 (2017).

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