Summary

Воспроизводимый моторный дефицит после аортальной окклюзии в крысиной модели ишемии спинного мозга

Published: July 22, 2017
doi:

Summary

Это исследование демонстрирует методику создания минимально инвазивной и легко воспроизводимой модели ишемии спинного мозга у крыс. Различные степени моторного дефицита задней конечности можно получить, контролируя время окклюзии аорты.

Abstract

Ишемия спинного мозга является фатальным осложнением после операции аортальной хирургии торакоабдоминальной аорты. Исследователи могут исследовать стратегии профилактики и лечения этого осложнения с использованием экспериментальных моделей ишемии спинного мозга. Описанная здесь модель демонстрирует различную степень параплегии, которая связана с длиной окклюзии после окклюзии грудной аорты в модели ишемии спинного мозга крысы.

A 2-Fr. Катетер с баллонным наконечником продвигался через бедренную артерию в нисходящую грудную аорту до тех пор, пока наконечник катетера не был помещен в левую подключичную артерию у анестезированных самцов крыс Sprague-Dawley. Ишемия спинного мозга была вызвана раздуванием баллона с катетером. После установленного периода окклюзии (9, 10 или 11 минут) баллон дефлировали. Неврологическая оценка проводилась с использованием показателя дефицита моторного аппарата через 24 ч после операции, а спинной мозг собирали для гистопатологического исследования.

Jous_content "> Крысы, прошедшие через 9 минут окклюзии аорты, проявляли умеренное и обратимое моторное нарушение в задней конечности. Крысы, подвергшиеся 10-минутной окклюзии аорты, были представлены умеренной, но обратимой моторной недостаточностью. Крысы, подвергшиеся 11-минутной окклюзии аорты, показали полную и постоянную Паралич. Моторные нейроны в отделах спинного мозга были более сохранены у крыс, подвергнутых более короткой продолжительности окклюзии аорты.

Исследователи могут достичь воспроизводимого дефицита моторного нерва после окклюзии грудной аорты с использованием этой модели ишемии спинного мозга.

Introduction

Параплегия является фатальным осложнением хирургии аортальной хирургии торакоабдоминальной аорты. Это происходит из-за травмы ишемии спинного мозга и реперфузии, которая возникает во время поперечного зажима и разжимания аорты. 1 Несколько стратегий, включая системную гипотермию и цереброспинальный дренаж, были введены для защиты спинного мозга, 2 , 3 , 4, но многие пациенты по-прежнему страдают от травмы.

Были введены несколько моделей ишемии спинного мозга животных для исследования его патогенеза и разработки защитных стратегий против травмы. В настоящем исследовании мы описываем модель крысы ишемии спинного мозга, основанную на методе Таиры и Марсалы. 5 Система спинного кровообращения у крыс очень похожа на сосудистую и коллатеральную систему спинного мозга у людей, хотя существуют некоторые различия в размерах иместо нахождения. 6 , 7 Таким образом, крыса является анатомически подходящим животным для использования в экспериментальной модели, исследующей патогенез, осложнения и лечение ишемии спинного мозга. Более того, эта модель ишемии спинного мозга производит надежную окклюзию аорты с минимальным вмешательством, используя окклюзию внутрисосудистого баллона грудной аорты.

В этом исследовании мы продемонстрировали, что эта крысиная модель ишемии спинного мозга индуцирует воспроизводимые моторные дефициты в задних конечностях, которые различаются по степени тяжести в зависимости от времени окклюзии аорты.

Protocol

Этот протокол был одобрен Институтом по уходу за животными и его использованием в больнице Университета Будана в Сеуле. Уход за животными и эксперименты проводились в соответствии с Руководством Национального института здравоохранения США по уходу и использованию лабораторных живо?…

Representative Results

В течение периода ишемии спинного мозга окклюзию аорты проводили в течение 9 минут (n = 3), 10 минут (n = 3) или 11 минут (n = 3). Индекс моторного дефицита у крыс представлен в Таблице 2. Крысы, которые прошли 9 минут окклюзии аорты, показали умеренное и обратимое моторное нарушение в задней конечно?…

Discussion

В настоящем исследовании мы продемонстрировали модель крысы ишемии спинного мозга, основанную на методе Таиры и Марсалы 5, которая индуцирует переменные степени моторного дефицита в задней конечности в зависимости от времени окклюзии аорты.

Продолжительн…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

У авторов нет подтверждений.

Materials

Fogarty Arterial Embolectomy catheter Edward Life Sciences 120602F a balloon-tipped catheter inserted into the femoral artery
BD Insyte-N Autoguard Shielded IV catheter  BD  381411 24-gauge intravenous catheter
50mL syringe KOREA VACCINE  KOVAX-SYRINGE 50mL Facial mask
1mL syringe KOREA VACCINE KOVAX-SYRINGE 1ml
Recal probe HARVARD APPARATUS 50-7221F Rectal probe for temperature monitoring
Micro dissecting spring scissor Jeung do bio & Plant co.LTD. JD-S-10 Micro-scissor
SCISSOR (SHARP-SHARP) Jeung do bio & Plant co.LTD. S-51-12-S Scissors
Retractor Jeung do bio & Plant co.LTD. JD-S-74A Retractor
Micro forcep  Jeung do bio & Plant co.LTD. JD-S-29 Micro-forceps
MOSQUITO FORCEP (Curved) Jeung do bio & Plant co.LTD. S-44-CPK Curved forceps
DRESSING FORCEP  Jeung do bio & Plant co.LTD. S-37-16S Blunted forceps
4/0 black silk  Woori Medical S431 4.0 black silk suture
3-WAY STOCK Seonwon Medcal D-98-01 3-way stopcock
Patient monitor PHILIPS MP20 The arterial pressure monitoring device. 
Heating blanket Self production Heating blanket
Microtube and external reservoir Self production Microtube and external reservoir
Heparin JW Pharmaceutical Heparin
0.9% NS 1000ml JW Pharmaceutical Normal saline
Isoflurane Hana Med Isoflurane

Riferimenti

  1. Greenberg, R. K., et al. Contemporary analysis of descending thoracic and thoracoabdominal aneurysm repair: a comparison of endovascular and open techniques. Circulation. 118 (8), 808-817 (2008).
  2. Okita, Y. Fighting spinal cord complication during surgery for thoracoabdominal aortic disease. Gen Thorac Cardiovasc Surg. 59 (2), 79-90 (2011).
  3. Fleck, T. M., et al. Improved outcome in thoracoabdominal aortic aneurysm repair: the role of cerebrospinal fluid drainage. Neurocrit Care. 2 (1), 11-16 (2005).
  4. Kouchoukos, N. T., et al. Hypothermic bypass and circulatory arrest for operations on the descending thoracic and thoracoabdominal aorta. Ann Thorac Surg. 60 (1), 67-76 (1995).
  5. Taira, Y., Marsala, M. Effect of proximal arterial perfusion pressure on function, spinal cord blood flow, and histopathologic changes after increasing intervals of aortic occlusion in the rat. Stroke. 27 (10), 1850-1858 (1996).
  6. Tveten, L. Spinal cord vascularity. III. The spinal cord arteries in man. Acta Radiol Diagn (Stockh). 17 (3), 257-273 (1976).
  7. Woollam, D. H., Millen, J. W. The arterial supply of the spinal cord and its significance. J Neurol Neurosurg Psychiatry. 18 (2), 97-102 (1955).
  8. Kennedy, H. S., Puth, F., Van Hoy, M., Le Pichon, C. A method for removing the brain and spinal cord as one unit from adult mice and rats. Lab Anim (NY). 40 (2), 53-57 (2011).
  9. Umehara, S., Goyagi, T., Nishikawa, T., Tobe, Y., Masaki, Y. Esmolol and landiolol, selective β1 adrenoreceptor antagonists, provide neuroprotection against spinal cord ischemia and reperfusion in rats. Anesth Analg. 110 (4), 1133-1137 (2010).
  10. De Ley, G., Nshimyumuremyi, J. B., Leusen, I. Hemispheric blood flow in the rat after unilateral common carotid occlusion: evolution with time. Stroke. 16 (1), 69-73 (1985).
  11. Coyle, P., Panzenbeck, M. J. Collateral development after carotid artery occlusion in Fischer 344 rats. Stroke. 21 (2), 316-321 (1990).
  12. Levine, S. Anoxic-ischemic encephalopathy in rats. Am J Pathol. 36, 1-17 (1960).
  13. Prior, B. M., et al. Time course of changes in collateral blood flow and isolated vessel size and gene expression after femoral artery occlusion in rats. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 287 (6), H2434-H2447 (2004).
  14. Yang, H. T., Feng, Y., Allen, L. A., Protter, A., Terjung, R. L. Efficacy and specificity of bFGFincreased collateral flow in experimental peripheral arterial insufficiency. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 278 (6), H1966-H1973 (2000).
  15. Kakinohana, M., Fuchigami, T., Nakamura, S., Sasara, T., Kawabata, T., Sugahara, K. Intrathecal administration of morphine, but not small dose, induced spastic paraparesis after a noninjurious interval of aortic occlusion in rats. Anesth Analg. 96 (3), 769-775 (2003).
  16. Horiuchi, T., et al. The effects of the delta-opioid agonist SNC80 on hind-limb motor function and neuronal injury after spinal cord ischemia in rats. Anesth Analg. 99 (1), 235-240 (2004).
  17. Griepp, R. B., Griepp, E. B. Spinal cord perfusion and protection during descending thoracic and thoracoabdominal aortic surgery: the collateral network concept. Ann Thorac Surg. 83 (2), S865-S869 (2007).
check_url/it/55814?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Hwang, J., Sohn, H., Kim, J., Park, S., Park, J., Lim, M., Han, S. Reproducible Motor Deficit Following Aortic Occlusion in a Rat Model Of Spinal Cord Ischemia. J. Vis. Exp. (125), e55814, doi:10.3791/55814 (2017).

View Video