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Neuroscienze

नवजात Hypoxic के एक माउस मॉडल में Neurobehavioral आकलन-कोरोनरी मस्तिष्क चोट

Published: November 24, 2017
doi:
10.3791/55838
, , , , , , ,
1Department and Research Institute of Rehabilitation Medicine,Yonsei University College of Medicine, 2Brain Korea 21 PLUS Project for Medical Science,Yonsei University, 3Department of Rehabilitation Medicine,Yonsei University Wonju College of Medicine, 4Rehabilitation Institute of Neuromuscular Disease,Yonsei University College of Medicine, 5Graduate Program of NanoScience and Technology,Yonsei University

Summary

हम प्रसव दिवस 7-10 सीडी-1 माउस पिल्ले पर एकतरफा मन्या धमनी रोड़ा प्रदर्शन एक नवजात hypoxic-कोरोनरी (हाय) मॉडल बनाने के लिए और हाय मस्तिष्क चोट के प्रभाव की जांच की । हमने गैर-संचालित सामान्य चूहों की तुलना में इन चूहों में neurobehavioral कार्यों का अध्ययन किया.

Abstract

हम एक नवजात hypoxic-कोरोनरी (हाय) मॉडल बनाने के लिए सीडी-1 चूहों पर एकतरफा मन्या धमनी रोड़ा प्रदर्शन किया और गैर-संचालित की तुलना में इन चूहों में neurobehavioral कार्यों का अध्ययन करके नवजात हाय मस्तिष्क चोट के प्रभाव की जांच की (यानी, सामांय) चूहे । अध्ययन के दौरान, चावल Vannucci की विधि प्रसव दिन 7-10 (P7-10) चूहों में नवजात हाय मस्तिष्क क्षति प्रेरित करने के लिए इस्तेमाल किया गया था । हाय आपरेशन द्वारा पिल्ले पर प्रदर्शन किया गया था एकपक्षीय मन्या धमनी बंधाव और हाइपोक्सिया करने के लिए जोखिम (8% हे2 और ९२% N2 ९० मिनट के लिए). एक सप्ताह के आपरेशन के बाद, क्षतिग्रस्त दिमाग अर्द्ध पारदर्शी खोपड़ी के माध्यम से नग्न आंखों के साथ मूल्यांकन किया गया था और उपसमूह में अनुपस्थिति के आधार पर वर्गीकृत किया गया (“कोई cortical चोट” समूह) या उपस्थिति (“cortical चोट” समूह) cortical चोट के, जैसे दाएं गोलार्द्ध में एक घाव । 6 सप्ताह पर, निम्नलिखित neurobehavioral परीक्षण संज्ञानात्मक और मोटर कार्यों का मूल्यांकन करने के लिए प्रदर्शन किया गया: निष्क्रिय परिहार कार्य (पैट), सीढ़ी चलने परीक्षण, और पकड़ शक्ति परीक्षण. ये व्यवहार परीक्षण नवजात हाय मस्तिष्क चोट के प्रभाव का निर्धारण करने में सहायक होते हैं और neurodegenerative रोगों के अन्य माउस मॉडलों में उपयोग किया जाता है । इस अध्ययन में, नवजात हाय मस्तिष्क चोट चूहों मोटर घाटे है कि सही गोलार्द्ध क्षति से संबंधित दिखाया । व्यवहार परीक्षण के परिणाम इस तरह के सेरेब्रल पाल्सी या नवजात स्ट्रोक रोगियों के रूप में मानव नवजात हाय रोगियों, में मनाया घाटे के लिए प्रासंगिक हैं । इस अध्ययन में नवजात हाय ब्रेन इंजरी के एक माउस मॉडल की स्थापना की और गैर संचालित चूहों की तुलना में मोटर घाटे और संज्ञानात्मक हानि के विभिन्न डिग्री दिखाया गया था । यह काम हाय माउस मॉडल पर बुनियादी जानकारी प्रदान करता है । एमआरआई छवियों अलग phenotypes, मोटर और संज्ञानात्मक परीक्षणों से मस्तिष्क क्षति की गंभीरता के अनुसार अलग प्रदर्शन ।

Introduction

नवजात हाय मस्तिष्क चोट प्रारंभिक बचपन के दौरान होता है (१,००० बच्चों के अनुसार लगभग दो रोगियों)1,2,3,4,5। नवजात हाय मस्तिष्क चोट के बारे में अध्ययन महत्वपूर्ण हैं, और एक स्थापित नवजात हाय मस्तिष्क चोट माउस मॉडल हाय मस्तिष्क चोट पर vivo नैदानिक अनुसंधान में सुविधा कर सकते हैं का उपयोग कर ।

पारंपरिक हाय मॉडल वयस्क चूहों पर इस्तेमाल कर रहे हैं6. neonate मॉडल के लिए, चावल-Vannucci विधि सामांयतः P7 चूहों7,8पर प्रयोग किया जाता है । हालांकि, चूहों और चूहों के बाद से थोड़ा अलग हैं9,10, भले ही वे दोनों कुतर रहे हैं, हम P7-10 में सीडी-1 पिल्ले पर एक संशोधित चावल-Vannucci विधि प्रदर्शन किया है कि पता चला कि P7-10 की विशेषता अवधि है अपरिपक्व oligodendrocytes, मानव पद P011,12के लिए इसी । नवजात हाय माउस मॉडल एकपक्षीय मन्या धमनी के दोनों बंधाव के माध्यम से स्थापित किया जाता है और P7 में 8% ऑक्सीजन के साथ हाइपोक्सिया करने के लिए चूहों के जोखिम-10 पिल्ले.

प्रक्रिया के अधीन चूहों ने दाएँ गोलार्द्ध के posterolateral क्षेत्र में मस्तिष्क के घावों के विभिन्न अंश दिखाई दिए. संज्ञानात्मक और मोटर घाटे की पहचान करने के लिए, neurobehavioral के आधार पर आकलन पैट, सीढ़ी चलने परीक्षण, और पकड़ शक्ति परीक्षण किया गया । गैर-संचालित (यानी, सामान्य) और हाय चूहों के बीच मतभेद का विश्लेषण किया गया. यह काम हाय माउस मॉडल पर बुनियादी जानकारी प्रस्तुत करता है । एमआरआई छवियों अलग phenotypes प्रदर्शन, मस्तिष्क क्षति की गंभीरता के अनुसार मोटर और संज्ञानात्मक परीक्षणों का उपयोग कर अलग ।

Protocol

सभी जानवरों के एक मानक पिंजरे में रखे गए थे (27 × २२.५ × 14 cm3) एक आकलन और प्रयोगशाला पशु देखभाल के प्रत्यायन के लिए एसोसिएशन द्वारा मांयता प्राप्त सुविधा में (AAALAC) और दिया भोजन और पानी विज्ञापन libitum बारी क?…

Representative Results

सभी डेटा मतलब (SEM) के अर्थ ± मानक त्रुटि के रूप में व्यक्त कर रहे हैं । दो समूहों के बीच चर की तुलना एक स्वतंत्र या SPSS सांख्यिकी सॉफ्टवेयर पर युग्मित टीपरीक्षण का उपयोग कर आयोजित किया गया था ?…

Discussion

इस अध्ययन में, हम एक नवजात P7-10 सीडी-1 माउस में हाय मस्तिष्क चोट प्रेरित और प्रासंगिक संज्ञानात्मक और मोटर घाटे के साथ मस्तिष्क घावों की पहचान की । इस प्रक्रिया के दौरान, एकतरफा सही मन्या धमनी के रोड़ा महत?…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

इस अध्ययन के राष्ट्रीय अनुसंधान फाउंडेशन (एनआरएफ-2014R1A2A1A11052042; 2015M3A9B4067068), विज्ञान और प्रौद्योगिकी, कोरिया गणराज्य, कोरियाई स्वास्थ्य प्रौद्योगिकी अनुसंधान एवं विकास परियोजना (HI16C1012), स्वास्थ्य मंत्रालय और के मंत्रालय से अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था कल्याण, कोरिया गणराज्य, और “Dongwha” Yonsei यूनिवर्सिटी कॉलेज ऑफ मेडिसिन (6-2016-0126) के संकाय अनुसंधान सहायता कार्यक्रम ।

Materials

Hypoxic chamber Jeung Do Bio & Plant Co Experimental Builder 
PAT apparatus  Jeung Do Bio & Plant Co Experimental Builder 
The ladder rung walking  Jeung Do Bio & Plant Co Experimental Builder 
SDI Grip Strength System  San Diego Instruments Inc.
Grip-Strength Meter Ugo Basile  47200
Harvard Apparatus Fluovac anesthetizing system  Harvard Apparatus
Anesthetizing box acryl box
I-Fran Liquid (Isofluorane) Hana Pharm. Co., Ltd. General Anesthetics ( isoflurane 100ml)
CD-1 mice Orient Co., Ltd.
Blue Nylon Mono Non-Absorbbable suture 5-0 50cm Ailee Co., Ltd. NB 521
IBM SPSS Statistics IBM Ver. 23
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Riferimenti

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Kim, M., Yu, J. H., Seo, J. H., Shin, Y., Wi, S., Baek, A., Song, S., Cho, S. Neurobehavioral Assessments in a Mouse Model of Neonatal Hypoxic-ischemic Brain Injury. J. Vis. Exp. (129), e55838, doi:10.3791/55838 (2017).
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