Summary

Effekter av eksponering av formaldehyd i en rotte modell av Atopic Dermatitis indusert av Neonatal Capsaicin behandling

Published: September 27, 2017
doi:

Summary

Her beskriver vi metoder for neonatal capsaicin behandling å indusere atopisk dermatitt i rotter og eksponering av fordampede formaldehyd å undersøke virkningene av formaldehyd innånding på atopisk dermatitt.

Abstract

Atopisk dermatitt er kronisk relapsing pruritic eksem og råder over hele verden spesielt i utviklede land. Komplekse interaksjoner mellom genetiske og miljømessige faktorer er kjent for å spille en viktig rolle i Patofysiologien ved atopisk dermatitt. Men mangler vi fortsatt et detaljert bilde av patogenesen av denne sykdommen. Dermed er det viktig å utvikle riktige dyr modeller for Klargjørende progresjon av atopisk dermatitt. Videre utvider undersøker effekten av miljømessige faktorer som luftforurensende på atopisk dermatitt forståelse av sykdommen. Her beskriver vi en metode for å indusere atopisk dermatitt i rotter neonatal capsaicin behandling og en protokoll for eksponering for en konstant konsentrasjon av formaldehyd rotter å avsløre effekter på utvikling av atopisk dermatitt i infantile og ungdom perioder. Disse protokollene er vellykket brukt til flere eksperimenter og kan brukes for andre stoffer.

Introduction

For å avhøre effekten av formaldehyd (FA) innånding på atopisk dermatitt (AD) progresjon, vi etablert en protokoll for AD induksjon og utviklet en konvensjonell sirkulasjon kammer for kronisk eksponering av FA.

Annonsen er en kronisk inflammatorisk hudsykdom knyttet til komplekse interaksjoner mellom genetisk disposisjon og miljømessige utløsere1,2. En skikkelig dyremodell må studere annonse i preklinisk staten. Dette er de viktigste når Klargjørende patogenesen av AD påvirket av miljøfaktorer. Videre bedre undersøke effekten av miljømessige utløsere på AD progresjon, er det viktig å skille de enkelte miljøfaktorer og kvantifisere eksponeringsgraden.

Vi har vist en roman rotte modell av AD indusert av neonatal capsaicin behandling. Denne Annonsen modell3 har noen fortjeneste over andre AD modeller som AD modeller av epicutaneous allergi, genmodifiserte AD modeller og spontan musen modeller av AD4. Først utvikler denne modellen AD-lignende symptomer i en alder av 3 uker, som tilsvarer spedbarn AD og er tidligere enn andre spontan musen modeller av Annonsen som NC/Nga musen. I noen tilfeller, i motsetning til genmodifiserte AD modeller symptomene på AD modellene avta og tilbakefall spontant over en 20-ukers periode. Videre er induksjon prosessen med AD-lignende symptomer i modellen lettere enn den epicutaneous sensibilisering modellen, som er mer lik den allergisk kontakteksem i perspektiv av induksjon prosessen.

Vi har innført romanen protokollen for FA eksponering for en dyr modell med en akryl glass chamber og konvensjonell medisinsk oksygen regulator5 for å studere virkningene av FA innånding på utvikling av AD i infantile og unges perioder. Regulatoren har tillatt oss å avsløre dyr til en konstant konsentrasjon av gass ved å justere flyt priser og løsning konsentrasjonen. Tidligere studier har rapportert flere måter å eksponering for FA dyremodeller. Xu et al. beskrevet metoden eksponering i som FA løsning var direkte brukes til huden6. En fersk studie adressert protokollen FA gass eksponering ved hjelp av en spesialisert flyktige løsemidler generator, modell 49127. Sammenlignet med metoder for tidligere studier, den nye metoden er lettere utstyrt og kan brukes for andre løsninger i tillegg til FA.

Protocol

alle metodene som er beskrevet her er godkjent av International Animal Care og bruk Committee (IACUC) av Korea University College i medisin. 6 uker etter fødselen, forskere kan indusere enthansasia og samle forskjellige prøver som huden og serum rotter. 1. induksjon av Annonsen Neonatal Capsaicin behandling for å forberede 5 mg/mL capsaicin løsning, legge til 50 mg capsaicin 1 mL av Tween 80 og 1 mL av 100% etanol i et 15 mL konisk rør. Legge til 8 mL av normal salin…

Representative Results

AD-aktig hudbetennelse av capsaicin-behandlet AD rotte modell 7 uker gamle vises i figur 1A. Robust skrape oppførsel av capsaicin-behandlet AD rotte modell vises i Video 1. Neonatal capsaicin behandling elicited dermatitt og forverret skrape oppførsel i rotter 3 ukens av alderen, og AD-lignende symptomer vedvarte i flere uker (figur 1B, C). Om graden var mindre alvorlig, fikk noe rotter relapsi…

Discussion

Protokollen beskrevet her for induksjon av AD-lignende symptomer i rotter kan tilpasses for å studere AD patofysiologi og brukt som en screening verktøyet for dopingtest. Instrumentet for eksponering for gass FA capsaicin-behandlet rotter kan brukes for å evaluere effekten av eksponering for ulike gasser på ulike dyremodeller.

Neonatal capsaicin-behandlet AD modellen er avhengig av en mer enkel prosedyre enn andre atopisk modeller som DNCB behandling modell9 og epic…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Denne forskningen ble støttet av offentlig velferd & sikkerhet forskningsprogram gjennom National Research Foundation av Korea (NRF) finansiert av departementet for utdanning, vitenskap og teknologi (NRF-2014M3C8A5030612), og støttes av The Chung Yang, Cha Young Sun, MD og Jang Hei Joo Yeu Sa Memorial Fund.

Materials

Medical Oxygen Regulator Yuyao Jiahua Medical manufacturer will not affect results
Tube manufacturer will not affect results
Acrylic Chamber Taejin Acryl manufacturer will not affect results
Plastic Chamber Taejin Acryl manufacturer will not affect results
Paraformaldehyde, powder Sigma 158127 manufacturer will not affect results
Wrap filme Uniwrap manufacturer will not affect results
Capsaicin Sigma M2028 manufacturer will not affect results
Tween80 Sigma P4780 manufacturer will not affect results
Digital Video Camera Sony HDR-CX380y manufacturer will not affect results
Isoflurane JW pharmaceutical manufacturer will not affect results

Riferimenti

  1. Geha, R. S. Allergy and hypersensitivity. Nature versus nurture in allergy and hypersensitivity. Curr Opin Immunol. 15 (6), 603-608 (2003).
  2. Novak, N., Bieber, T., Leung, D. Y. Immune mechanisms leading to atopic dermatitis. The J Allergy Clin Immunol. 112 (Suppl 6), S128-S139 (2003).
  3. Back, S. K., et al. Chronically relapsing pruritic dermatitis in the rats treated as neonate with capsaicin; a potential rat model of human atopic dermatitis. J Dermatol Sci. 67 (2), 111-119 (2012).
  4. Jin, H., He, R., Oyoshi, M., Geha, R. S. Animal models of atopic dermatitis. J Invest Dermatol. 129 (1), 31-40 (2009).
  5. Han, R. T., et al. Formaldehyde-Induced Aggravation of Pruritus and Dermatitis Is Associated with the Elevated Expression of Th1 Cytokines in a Rat Model of Atopic Dermatitis. PLOS ONE. 11 (12), e0168466 (2016).
  6. Xu, B., Aoyama, K., Takeuchi, M., Matsushita, T., Takeuchi, T. Expression of cytokine mRNAs in mice cutaneously exposed to formaldehyde. Immunol Lett. 84 (1), 49-55 (2002).
  7. Kim, J. Y., Jeong, M. S., Park, K. Y., Seo, S. J. Aggravation of atopic dermatitis-like symptoms by consecutive low concentration of formaldehyde exposure in NC/Nga mice. Exp Dermatol. 22 (3), 219-221 (2013).
  8. Laske, N., Niggemann, B. Does the severity of atopic dermatitis correlate with serum IgE levels?. Pediatr Allergy Immunol. 15 (1), 86-88 (2004).
  9. Fujii, Y., Takeuchi, H., Sakuma, S., Sengoku, T., Takakura, S. Characterization of a 2,4-dinitrochlorobenzene-induced chronic dermatitis model in rats. Skin Pharmacol Physiol. 22 (5), 240-247 (2009).
  10. Sugimoto, T., Xiao, C., Ichikawa, H. Neonatal primary neuronal death induced by capsaicin and axotomy involves an apoptotic mechanism. Brain Res. 807 (1-2), 147-154 (1998).
  11. Saito, A., et al. Characterization of skin inflammation induced by repeated exposure of toluene, xylene, and formaldehyde in mice. Environ Toxicol. 26 (3), 224-232 (2011).
  12. Jung, W. W., et al. Formaldehyde exposure induces airway inflammation by increasing eosinophil infiltrations through the regulation of reactive oxygen species production. Environ Toixcol Pharmacol. 24 (2), 174-182 (2007).
check_url/it/55987?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Han, R. T., Back, S. K., Lee, J., Kim, H. y., Kim, H. J., Na, H. S. Effects of Exposure of Formaldehyde to a Rat Model of Atopic Dermatitis Induced by Neonatal Capsaicin Treatment. J. Vis. Exp. (127), e55987, doi:10.3791/55987 (2017).

View Video