माउस में प्रारंभिक गर्भावस्था लक्षण वर्णन के लिए तीन आयामी उच्च आवृत्ति ट्रा का एक उपंयास का उपयोग
Summary
चूहों व्यापक रूप से गर्भावधि जीव विज्ञान का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल कर रहे हैं. हालांकि, गर्भावस्था समाप्ति ऐसे अध्ययनों के लिए आवश्यक है जो अनुदैर्ध्य जांच precludes और पशुओं की बड़ी संख्या का उपयोग आवश्यक । इसलिए, हम जल्दी पता लगाने और गर्भवती माउस में प्रत्यारोपण के बाद की घटनाओं की निगरानी के लिए उच्च आवृत्ति ट्रा की एक गैर इनवेसिव तकनीक का वर्णन ।
Abstract
हाई-फ्रीक्वेंसी ट्रा (HFUS) utero मेंमानव भ्रूण के वास्तविक समय के विकास को गैर-इनवेसिव रूप से मॉनिटर करने के लिए एक आम तरीका है । माउस नियमित रूप से एक vivo में मॉडल के रूप में प्रयोग किया जाता है भ्रूण आरोपण और गर्भावस्था प्रगति का अध्ययन । दुर्भाग्य से, इस तरह के murine अध्ययन गर्भावस्था रुकावट अनुवर्ती phenotypic विश्लेषण को सक्षम करने के लिए की आवश्यकता है । इस मुद्दे को संबोधित करने के लिए, हम तीन आयामी (3-डी) HFUS इमेजिंग डेटा के जल्दी पता लगाने और murine भ्रूण आरोपण साइटों और उनके utero मेंव्यक्तिगत विकासात्मक प्रगति के लक्षण वर्णन के लिए पुनर्निर्माण का इस्तेमाल किया । 3-डी पुनर्निर्माण और मॉडलिंग के साथ HFUS इमेजिंग का मेल, हम सही ढंग से भ्रूण आरोपण साइट संख्या के रूप में अच्छी तरह से गर्भवती C57BL6J में विकासात्मक प्रगति की निगरानी करने में सक्षम थे/129S चूहों से ५.५ दिनों के बाद सहवास (d.p.c.) के माध्यम से ९.५ d.p.c. एक transducer के उपयोग के साथ । माप शामिल: संख्या, स्थान, और आरोपण साइटों की मात्रा के रूप में के रूप में अच्छी तरह से अंतर-आरोपण साइट रिक्ति; भ्रूण व्यवहार्यता कार्डियक गतिविधि निगरानी द्वारा मूल्यांकन किया गया था । तत्काल बाद में आरोपण अवधि (५.५ से ८.५ d.p.c.), 3-डी पुनर्निर्माण दोनों मेष और ठोस ओवरले प्रारूप में gravid गर्भाशय के एक गर्भाशय सींग के भीतर विकासशील गर्भधारण के दृश्य प्रतिनिधित्व सक्षम होना चाहिए । के रूप में आनुवंशिक रूप से इंजीनियर चूहों को मादा प्रजनन गर्भाशय रोग से व्युत्पंन phenotypes विशेषताएं इस्तेमाल किया जा जारी, इस विधि का पता लगाने के लिए एक नया दृष्टिकोण प्रदान करता है, यों, और vivo मेंजल्दी आरोपण घटनाओं की विशेषता । 3 डी HFUS इमेजिंग के इस उपंयास का उपयोग करने की क्षमता को सफलतापूर्वक पता लगाने, कल्पना, और एक गैर इनवेसिव तरीके में जल्दी murine गर्भावस्था के दौरान भ्रूण आरोपण साइटों की विशेषता दर्शाता है । प्रौद्योगिकी वर्तमान तरीकों पर एक महत्वपूर्ण सुधार प्रदान करता है, जो सकल ऊतक और histopathologic लक्षण वर्णन के लिए गर्भधारण की रुकावट पर भरोसा करते हैं । यहां हम एक वीडियो और पाठ स्वरूप का वर्णन कैसे सफलतापूर्वक जल्दी murine गर्भावस्था के अल्ट्रासाउंड प्रदर्शन करने के लिए जाल और ठोस 3-डी छवियों में गर्भाशय के रूप में पुनर्निर्माण के साथ विश्वसनीय और प्रतिलिपि डेटा उत्पंन का उपयोग करें ।
Introduction
आवर्तक जल्दी गर्भावस्था हानि गर्भाधान के बाद सबसे आम जटिलताओं में से एक है और1,2गर्भ धारण करने की कोशिश कर रहे जोड़ों के लगभग 1% को प्रभावित करता है । प्रारंभिक गर्भावस्था के झड़ने के अंतर्निहित तंत्र विविध रहे हैं: आंतरिक भ्रूण विषमताओं और मातृ comorbidities से एंडोमेट्रियल ग्रहणशीलता1,3,4में दोषों के लिए । क्योंकि उनके आनुवंशिक पथ की, माउस मॉडल है व्यापक रूप से जल्दी भ्रूण आरोपण और गर्भावस्था की जांच के लिए उपयोग किया गया है । इसके अलावा, माउस के लघु गर्भावधि समय और बड़े पैमाने पर अध्ययन करने की क्षमता मानव प्रजनन चिकित्सा में प्रमुख नैदानिक प्रश्नों को संबोधित करने में माउस की बढ़ती उपयोगिता को सुनिश्चित किया है5. उस ने कहा, murine प्रयोगात्मक डिजाइन के विशाल बहुमत अभी भी कई बांधों की आवश्यकता के लिए अनुक्रमिक गर्भावधि दिनों पर euthanized हो सकता है और आरोपण साइट स्थान का विश्लेषण, संख्या, आकार, और रिक्ति पैटर्न गर्भावस्था के दौरान6, 7,8, जिससे एक ही जानवर पर precluding अनुदैर्ध्य पढ़ाई हो ।
क्लिनिक में, अल्ट्रासाउंड एक गैर इनवेसिव तरीके से मानव भ्रूण व्यवहार्यता और विकास की निगरानी करने के लिए एक विश्वसनीय और अमूल्य उपकरण है9,10,11। हाल ही में, उच्च आवृत्ति अल्ट्रासाउंड (HFUS) गर्भावस्था के दौरान भ्रूण व्यवहार्यता और विकास की निगरानी के लिए एक विधि के रूप में माउस में सीमित अनुप्रयोगों को खोजने के लिए शुरू कर दिया है12,13,14। अल्ट्रासाउंड इमेजिंग में हाल ही में तकनीकी प्रगति पशु अंगों और विकृतियों के बाद निगरानी के दृश्य पुनर्निर्माण के लिए तीन आयामी (3-D) डेटा के आवेदन की अनुमति दी है15,16, 17. इस उन्नत इमेजिंग तकनीक का उपयोग स्पष्ट रूप से छोटे मात्रा में उतार चढ़ाव का पता लगाने के लिए शक्ति में सुधार हुआ है, अंतर-पशु परिवर्तनशीलता को कम करने, और एक विकृति या एक चिकित्सीय हस्तक्षेप की प्रभावकारिता की प्रगति की निगरानी करने के लिए17. जबकि इस तकनीक की प्राथमिक उपयोगिता को oncomouse मॉडल15,16, 3 डी HFUS इमेजिंग में द्रोह प्रगति पर नजर रखने के लिए किया गया है हाल ही में quantitate और भ्रूण आरोपण के सक्रिय विकास की निगरानी के लिए इस्तेमाल किया गया है और माउस गर्भाशय18में भ्रूण विकास ।
यहां, हम प्रदर्शन कैसे HFUS इमेजिंग प्रदर्शन करने के लिए 2 डी और 3-डी डेटा उत्पादन के लिए जल्दी गर्भवती माउस गर्भाशय के पुनर्निर्माण उत्पंन करते हैं । हम इस उपंयास विधि की उपयोगिता के लिए गर्भावस्था के समापन की आवश्यकता के बिना इन जल्दी भ्रूण आरोपण घटनाओं का पता लगाने के प्रदर्शन, शोधकर्ताओं ने एक गैर इनवेसिव तरीके से डेटा इकट्ठा करने की अनुमति ।
Protocol
ये अध्ययन संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति (IACUC) द्वारा अनुमोदित स्वास्थ्य और पशु प्रोटोकॉल के राष्ट्रीय संस्थानों द्वारा प्रकाशित प्रयोगशाला पशुओं के देखभाल और उपयोग के लिए मार्गदर्शिका के अनुस?…
Representative Results
Discussion
3 डी HFUS इमेजिंग के इस उपंयास का उपयोग करने की क्षमता को सफलतापूर्वक पता लगाने, कल्पना, और एक गैर इनवेसिव तरीके में जल्दी murine गर्भावस्था के दौरान भ्रूण आरोपण साइटों की विशेषता दर्शाता है । प्रौद्योगिकी वर?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
हम बहुत बहुत रॉंग Zhao, जिे ली, और यान यिंग की सहायता की सराहना करते हैं ।
Materials
| VisualSonics Vevo 2100 Ultrasound Imaging Platform/Machine | VisualSonics, inc. | VS-11945 | |
| Vevo Imaging Station | VisualSonics, inc. | SA-11982 | |
| Aquasonic 100 Ultrasound Transmission Gel | Parker | #SKU PLI 01-08 | |
| Isoflurane (IsoThesia) 100mL bottle | Henry Shein | #29404 | |
| PuraLubenAnimal Ophthalmic Ointment | Dechra | #12920060 |
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