Summary

चूहा में रीढ़ की हड्डी Microcirculation का विश्लेषण करने के लिए लेजर डॉपलर इमेजिंग और निगरानी का उपयोग करना

Published: May 30, 2018
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Summary

यहाँ हम रीढ़ की हड्डी स्थानीय रक्त प्रवाह और ऑक्सीजन संतृप्ति को मापने के लिए लेजर डॉपलर छिड़काव इमेजिंग (LDPI) और लेजर डॉपलर छिड़काव मॉनिटरिंग (LDPM) का एक संयोजन प्रस्तुत करते हैं (इसलिए2), साथ ही रीढ़ की हड्डी को शुरू करने के लिए एक मानकीकृत प्रक्रिया चूहे पर आघात ।

Abstract

लेजर डॉपलर flowmetry (एलडीएफ) रक्त प्रवाह (BF) माप के लिए एक इनवेसिव विधि है, जो यह रीढ़ की हड्डी के microcirculatory परिवर्तन को मापने के लिए बेहतर बनाता है । इस अनुच्छेद में, हमारा लक्ष्य दोनों लेजर डॉपलर इमेजिंग और निगरानी का उपयोग करने के लिए रीढ़ की हड्डी की चोट के बाद BF के परिवर्तन का विश्लेषण किया गया । दोनों लेजर डॉपलर छवि स्कैनर और जांच/मॉनिटर प्रत्येक readout प्राप्त करने के लिए नियोजित किया जा रहा था । LDPI के डेटा bf के एक स्थानीय वितरण प्रदान की है, जो चोट साइट के आसपास छिड़काव का अवलोकन दिया था और यह विभिंन स्थानों के बीच BF के तुलनात्मक विश्लेषण के लिए सुलभ बना दिया । तीव्रता से समय की अवधि में जांच क्षेत्र को मापने के द्वारा, एक संयुक्त जाँच एक साथ BF और रीढ़ की हड्डी के ऑक्सीजन संतृप्ति को मापने के लिए इस्तेमाल किया गया था, समग्र रीढ़ की हड्डी छिड़काव और ऑक्सीजन की आपूर्ति दिखा. एलडीएफ के पास ही कुछ सीमाएं हैं, जैसे सापेक्ष प्रवाह, आंदोलन के प्रति संवेदनशीलता, और जैविक शूंय संकेत । हालांकि, यह तकनीक BF के अपने सरल सेटअप और तेजी से माप के कारण नैदानिक और प्रयोगात्मक अध्ययन में लागू किया गया है ।

Introduction

रीढ़ की हड्डी के ऊतकों अत्यधिक संवहनी और रीढ़ की हड्डी की चोट (विज्ञान) द्वारा प्रेरित हाइपोक्सिया के लिए अत्यंत संवेदनशील है । हमारे पिछले अध्ययनों से पता चला है कि रीढ़ की हड्डी के रक्त के प्रवाह में काफी हिलाना चोट1,2है, जो मोटर समारोह के घाटे से संबंधित हो सकता है के बाद कमी आई थी । हाल के अध्ययनों से पता चला है कि विज्ञान के बाद रक्त वाहिकाओं की अखंडता अच्छी तरह से संवेदी मोटर समारोह के सुधार के साथ संबंधित है3. यह बताया गया है कि सुधार संवहनी सफेद बात है, परोक्ष रूप से बेहतर कार्य4के लिए अग्रणी बचाव हो सकता है । इसलिए, पद चोट रीढ़ की हड्डी छिड़काव के रखरखाव व्यवहार्यता और कार्यशीलता के संरक्षण के लिए प्राथमिक महत्व का होना दिखाई दिया ।

विज्ञान के बाद छिड़काव पर विभिंन उपचार के प्रभाव विज्ञान5,6,7के प्रयोगात्मक मॉडल में तकनीक की एक किस्म का उपयोग कर कई जांचकर्ताओं द्वारा जांच की गई है । लेजर डॉपलर, एक अच्छी तरह से स्थापित तकनीक के रूप में, निस्संदेह कई पशु और मानव अध्ययन8,9,10,11में छिड़काव को बढ़ाता है के लिए एक उपयोगी तरीका था । तकनीक डॉपलर शिफ्ट12 रोशन प्रकाश के लिए लाल रक्त कोशिकाओं को ले जाकर प्रेरित मापने पर आधारित है । 1980 के दशक में तकनीक के व्यावसायीकरण के बाद से, महान प्रगति लेजर में किया गया है प्रौद्योगिकी, फाइबर प्रकाशिकी और लेजर डॉपलर उपकरणों द्वारा छिड़काव को मापने के लिए संकेत प्रसंस्करण13, जो एक विश्वसनीय प्रौद्योगिकी में एलडीएफ बनाया.

वर्तमान अध्ययन में, लेजर डॉपलर माप के दोनों तरीकों concussive चूहों की रीढ़ की हड्डी में रक्त प्रवाह (BF) का मूल्यांकन करने के लिए लागू किया गया. प्रौद्योगिकी और अपनी सरल स्थापना की इनवेसिव प्रकृति के कारण, हमारे प्रोटोकॉल रीढ़ की हड्डी के BF माप के लिए एक संवेदनशील, तेजी से और विश्वसनीय तरीका प्रदान करता है । इससे भी महत्वपूर्ण बात, इस विधि प्रत्येक समय बिंदु पर पशु बलिदान के बिना BF पोस्ट concussive विज्ञान के अनुदैर्ध्य अध्ययन की अनुमति देता है ।

उत्तेजना के दौरान ऊतक और छिड़काव के तेजी से परिवर्तन के BF का आकलन करने की क्षमता के कारण, यह इस प्रोटोकॉल का मूल्यांकन करने के लिए लागू संभव है सेरेब्रल BF14,15 के रूप में के रूप में अच्छी तरह से जिगर के रूप में अन्य ऊतकों को मापने16, 17, त्वचा18,19, और आंत्र20। मध्य मस्तिष्क धमनी के क्षणिक रोड़ा के एक चूहे के मॉडल में, लेजर डॉपलर रीडिंग के स्तर कि कोरोनरी penumbra में उम्मीद कर रहे हैं करने के लिए BF की दर की उचित कमी को सुनिश्चित करने के लिए इस्तेमाल किया गया14. चूहों में जो महत्वपूर्ण अंग ischemia (CLI) प्रेरण आया है, लेजर डॉपलर स्कैनिंग से पहले और CLI प्रक्रिया के बाद और उपचार के बाद अलग अवधि के दौरान हिंद अंग BF का पालन करने के लिए लागू किया गया था21. इसके अतिरिक्त, कुछ दवाओं की जैव उपलब्धता और चयापचय निकासी यकृत BF, जो एलडीएफ16द्वारा पता लगाया गया था पर निर्भर है । इसलिए, एलडीएफ व्यापक रूप से प्रयोगात्मक मॉडल, pharmacodynamic, और pharmacokinetic मूल्यांकन में इस्तेमाल किया जा सकता है ।

Protocol

पशु प्रोटोकॉल प्रयोगात्मक पशु शामिल स्वास्थ्य के राष्ट्रीय संस्थान (NIH) द्वारा स्थापित दिशा निर्देशों का पालन किया और पशु देखभाल और राजधानी चिकित्सा विश्वविद्यालय के उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किए…

Representative Results

LDPI को रीढ़ की हड्डी में BF को मापने के लिए इस्तेमाल किया गया था, जो रैखिक प्रोफाइल (चित्रा 4) निकालने के द्वारा रीढ़ की हड्डी के rostral-caudal धुरी के साथ quantified था । चित्र 5 और ?…

Discussion

कुछ विवरण इस प्रोटोकॉल प्रदर्शन करते समय देखा जाना चाहिए । सबसे पहले, संज्ञाहरण और शल्य चिकित्सा की प्रक्रिया के रूप में जल्दी और सुरुचिपूर्ण ढंग से पशुओं के लिए शुरू की तनाव को कम करने के लिए संभव के र?…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

लेखकों को कोई पावती नहीं है ।

Materials

Laser Doppler Line Scanner Moor Instruments moorLDLS2
Laser Doppler Monitor Moor Instruments moorVMS-LDF
Probe for Monitor Moor Instruments VP3 Blunt needle end delivery probe
Impactor Precision Systems and Instrumentation IH-0400
Phenobarbital sodium Sigma-Aldrich P3761
Buprenorphine Sigma-Aldrich B-908
Syringe Becton Dickinson Medica (s) Pte.Ltd 300841
Surgical suture needles with thread Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd 18T0329 (batch number) /4-0
Scalpel Operation instrument factory of Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. J11030 4#
Scalpel blade Operation instrument factory of Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. J12130 20#
Ophthalmic forceps Operation instrument factory of Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. JD1040
Hemostatic forceps Operation instrument factory of Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. J31050
Benzyl penicillin sodium North China Pharmaceutical Co., Ltd F6072116 (batch number)
75% alcohol Dezhou Anjie Gaoke disinfection products Co., Ltd 150421R (batch number)
Iodine Shandong Lierkang Medical Technology Co., Ltd 20170102 (batch number)
Rat Laboratory Animal Center, The Academy of Millitery Medical Sciences Sprague-Dawly (rat strain)

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Citazione di questo articolo
Jing, Y., Bai, F., Chen, H., Dong, H. Using Laser Doppler Imaging and Monitoring to Analyze Spinal Cord Microcirculation in Rat. J. Vis. Exp. (135), e56243, doi:10.3791/56243 (2018).

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