再門脈部分肝移植のラット体内血管指向 70% 肝切除
Summary
ここでは、再門脈ラット部分肝移植を含むプロトコルが表示されます。具体的には、70% 肝切除だった体内肝の血管指向の更新手法を用いた肝動脈は、-側の方法で再建されました。カフのテクニックは、infrahepatic 下大静脈の吻合時間を短縮に変更されました。
Abstract
分割肝移植と生体肝ドナー肝移植肝臓臓器をより効率的に活用する診療所で開発されました。これらの手術の背後にあるメカニズムを理解、関連する外科研究ラット部分肝移植 (PLTx) モデルを設置しました。ラットの PLTx モデルの複雑さのため、詳細な説明とプロトコルが必要です。掲載された記事は以前体外肝切除が 50% ラット PLTx を達成するために使用されたプロトコルを報告しました。このプロトコルとは対照的、生体内で70% 切除再門脈 PLTx を導入しました。更新された容器指向の肝切除は、顕微鏡のプロシージャを調整する PLTx のラットに組み込まれました。ポータル静脈と左葉外側と中央の葉の肝動脈が個別に解剖し、残肝切り株で出血の確率を減らす、肝実質の除去前に結紮.さらに、拡大固有肝動脈と総肝動脈側に血管吻合は、肝動脈を再 arterialize に導入されました。この側に血管吻合技術を用いたは、手縫合の難しさを減少し、吻合部の開存性の高率を維持、吻合部の直径が拡大されました。また、infrahepatic 下大静脈のカフ吻合は若干変更されました。受信者の下大静脈周囲円周の肝実質のセクションは、カフ吻合血管の内腔の三次元形状を維持するために中に保たれていた.肝実質のこのセクションは、吻合部を完了した後削除されました。この変更を加えたカフ吻合時間をさらに短縮宿泊縫合の配置を含む工程は省略されました。ラット PLTx のこのプロトコルを使用して、手術後肝酵素の低レベル、そのまま肝小葉アーキテクチャと高い生存率が達成されました。
Introduction
現在、寄付された肝臓器官の数と寄付された肝臓を待っている患者の数に大きな違いがあります。肝臓の臓器の不足は、地球規模の問題です。ドナー プールを展開し、分割肝移植 (LTx) および生きているドナー LTx に部分肝を移植1として使用する開発されました。
部分肝移植 (PLTx) の背後にあるメカニズムをさらに調査するには、適切な動物モデルが確立された2,3,4,5をされています。ラット PLTx、肝葉切除体内と体外している生体臓器提供者に対しての条件を模倣し、ひとそれぞれに対してを分割可視化実験のジャーナルに掲載された論文は、50% のラットを使用して、前のヴィヴォ肝5PLTx を含む詳細なプロトコルを提示しました。しかし、体内肝切除ラット PLTx はまだ報告されていない可視化文学。
体内と体外肝切除の違いに加えて自体肝切除を行う手法は、またラット PTLx を使用して多くの外科研究の現在、PLTx の結果を決定する上で重要な役割を果たしています。モデル、肝葉切除肝葉2,3,6,7,8,9椎弓根で単結紮を配置した後。ただし、切除は適していませんとして異なる肝葉のすべての肝葉の前に単結紮を置く異なった形およびサイズがあります。中央の葉の基部に単結紮部分肝移植10,11の流出に影響を与える可能性があります最終的に上大静脈の圧迫感の原因のハイリスクが伴います。したがって、ラット肝の解剖学の知識に基づいて更新肝切除法は、ラット PTLx のフィールドに必要です。
本研究では記述されているプロトコル、ラット PLTx のプロシージャに更新の容器型 70% 切除を設立されました。ポータル静脈と左葉外側 (LLL) と中葉 (ML) の肝動脈解剖、肝実質の除去の前に個別に分かれています。その後、縫合をピアスで LLL と ML の肝静脈を結紮されました。単結紮を配置するのではなく、個々 をおよび複数のピアス縫合糸を使用して、ML の残切り株上大静脈に広がることができた。したがって、外科的結紮による infrahepatic 上大静脈の収縮が回避されました。さらに、個々 を前に肝実質の除去実験11に血損失の影響を最小限に抑えること、残肝の出血率の減少によって LLL と ML の血液供給の閉塞。
それは、microsurgeons、この船の非常に小さい直径のため肝移植の適切な肝動脈 (PHA) を再構築するための重要な課題です。肝動脈を再構築するための多数の顕微鏡技術が提案された14 をされている LTx で再動脈化術が本当に必要かどうかの質問は、まだ議論12,13,14下ですが、.ここでは、最後に側に拡大 pha (CHA) 総肝動脈の吻合肝臓の移植の再本来の手法を紹介します。この辺にテクニックを使用して、2 つの肝動脈は径の大きな吻合と接続されます。吻合部の直径が大きくなるほど、実行することです簡単に手縫合より吻合部の開存の改善になります。
Protocol
Representative Results
Discussion
ラット PLTx は、コストの高され、長い期間20トレーニング プログラムの洗練された顕微鏡視下の手順です。研究者をこの動物モデルを用いたラット PLTx プロトコルの複雑さが発生しました。フルサイズ ラット LTx と比べると、ラット PLTx 提案、微小血管移植手順の課題だけでなく、小動物の肝切除術の課題とします。したがって、詳細に全体の手順を記述する可視化顕微鏡?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この研究は、国家自然科学基金、中国の (許可番号 81501382) と中国浙江省地方自然科学財団のグラント号によって支持されました。LQ13H100003 および LQ16H100002)。
Materials
| Surgical microscope | Möller-Wedel, Germany | 654359 | |
| Light source | OSRAM (China) Lighting Co., Ltd | 64627 | |
| Isoflurane Vaporizer | MIDMARK Corporation | VIP3000 | |
| Isoflurane | Baxter Healthcare Corporation | 40032609 | For Inhalation anesthesia |
| Normal Saline | Zhejiang Tianrui Pharmaceutical Co., Ltd. | 716092103 | |
| Povidone Iodine Solution | HANGZHOU MINSHENG PHARMACEUTICAL | H33021567 | For disinfection |
| Hemostatic forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | J31020 | |
| Surgical scissors | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | JC2116 | |
| Needle-holder | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | J32030 | |
| Dressing Forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | J42020 | |
| Mosquito hemostatic forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | W40340 | For liver resection; For retracting the stay sutures. |
| Micro-scissors | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA1040 | |
| Micro needle-holder | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA2060 | |
| Curved micro typing forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA3061 | |
| straight micro typing forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA3060 | |
| Micro hemostatic forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA3020 | |
| Bulldog clamp | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | XEC350 | |
| Vessel clamps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | W40160 | |
| Micro Serrefine-curved | Fine Science Tools, Inc | 18055-05 | |
| Dacryosyrinx | Shi Zhuo medical instruments Co., Ltd. | 5# curve | Use as the curved needle for forcing out the air bubbles in the vascular lumen |
| Sterilized gauze swabs | Fuqing Health & Integral Medical | 20230R | |
| 5mL syringe | Zhejiang Yusheng Medical Instrument Co.,Ltd | 811932416 | |
| 18G needles | Shanghai Kindly Enterprise Development Group Co., Ltd | 01-014 | For fixing the upper abdomen wall |
| Intima II 22G intraveous catheter | Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. | 383207y | For making biliary stent; For infusing perfusate |
| 7-0 polypropylene sutures | Ningbo Medical Needle Co., Ltd | 151026 | For SHVC anastomsis |
| 6-0 silk suture | Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd | 2650182 | For ligation |
| Culture dish (100mm) | Corning Incorporated | 430165 | used in back table for storage ice. The back table dish was placed on it. |
| Culture dish (30 mm) | Corning Incorporated | 3296 | As a vessel for organ preservation |
| Angiocath 12G intravenous catheter | Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. | 382277 | For making a IHVC cuff |
| Angiocath 14G intravenous catheter | Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. | 382269 | For making a PV cuff |
| Buprenorphine (hydrochloride) | Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Pharmaceutical Co., Ltd | H12020275 | For analgesic |
| Cefuroxime sodium for injection | Esseti FarmaceuticiS.r.l | H20160013 | As an antibiotics |
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