Yeniden Arterialized sıçan kısmi karaciğer nakli bir vivo içinde gemi odaklı % 70 ile Hepatectomy
Summary
Burada, yeniden arterialized sıçan kısmi karaciğer nakli ile ilgili bir protokol sunulmuştur. Özellikle, % 70 karaciğer rezeke vivo içinde gemi odaklı hepatectomy Güncellenme Zamanı bir tekniğin kullanmaktı. Hepatik arter bir uç-yan şekilde yeniden. Manşet tekniği infrahepatic vena cava anastomoz süresini kısaltmak için güncellenmiştir.
Abstract
Bölünmüş karaciğer nakli ve yaşam karaciğer bağışı karaciğer transplantasyonu klinikte karaciğer organları daha verimli bir şekilde kullanmak için geliştirilmiştir. Bu cerrahi arkasında mekanizması daha iyi anlamak için bir sıçan kısmi karaciğer transplantasyonu (PLTx) modeli ilgili cerrahi çalışmalar için kurulmuştur. Sıçan PLTx modeli karmaşıklığı nedeniyle, ayrıntılı açıklamalar ile bir protokol gereklidir. Bir makale yayınlanan daha önce % 50 sıçan PLTx ulaşmak için ex vivo hepatectomy kullanıldığı bir protokol bildirdi. Bu iletişim kuralı aksine, biz bir vivo içinde % 70 hepatectomy ile yeniden arterialized bir PLTx tanıttı. Güncellenme Zamanı bir gemi odaklı hepatectomy sıçan mikrocerrahi yordamı iyileştirmek için PLTx dahil oldu. Portal damarları ve hepatik arter sol yan lob ve medyan LOB tek tek parçalara ve böylece kalan karaciğer güdük kanama olasılığını azaltarak karaciğer parankimi kaldırılmasını önce bakmaksızın. Ayrıca, ortak hepatik arter ile genişlemiş uygun hepatik arter arasındaki bir uç-yan gemi anastomoz hepatik arter yeniden arterialize için kullanılmaya başlandı. Bu uç-yan gemi anastomoz tekniği kullanarak, anastomoz çapını, böylece el dikiş zorluğu azalan ve anastomoz a_ılabilinirse yüksek orandaki Bakımı genişletilmiştir. Ayrıca, infrahepatic vena kava manşet anastomoz biraz güncellenmiştir. Bir alıcının vena kava çevresinde çevresel karaciğer parankimi bir bölümünü vasküler Lümen üç boyutlu şeklini korumak için manşet anastomoz sırasında korundu. Karaciğer parankimi bu bölümünü anastomoz tamamlandıktan sonra kaldırıldı. Bu değişiklik ile kalış dikiş yerleşimini içeren adım, ihmal böylece daha da manşet anastomoz zaman kısaltma. Sıçan PLTx bu iletişim kuralını kullanarak, bir düşük karaciğer enzim düzeyi, sağlam bir karaciğer lobular mimari ve yüksek sağkalım oranı mikrocerrahi sonra elde edildi.
Introduction
Şu anda, bağışlanan karaciğer organ sayısı ile bağışlanan bir karaciğer için bekleyen hasta sayısı arasında büyük farklılık yoktur. Karaciğer organ sıkıntısı küresel bir sorundur. Donör havuzu genişletin, karaciğer transplantasyonu (LTx) ve canlı donör LTx bölmek için kısmi bir karaciğer nakli1olarak kullanmak için geliştirilmiştir.
Kısmi karaciğer transplantasyonu (PLTx) arkasında mekanizması daha fazla araştırmak için kurulan2,3,4,5ilgili hayvan modelleri olmuştur. Fare PLTx, karaciğer lobları canlı donör LTx koşulları taklit ve LTx, sırasıyla, insanda bölmek için rezeke vivo içinde ve ex vivo vardır. Bir kağıt olarak Görüntülenmiştir deneyler günlük Yayınlanan % 50 ispiyoncu PLTx ex vivo hepatectomy5kullanarak içeren detaylı bir protokol sundu. Ancak, bir vivo içinde hepatectomy bir fareyle PLTx henüz görüntülenmeyecektir literatürde bildirilmemiştir.
Vivo ve ex vivo hepatectomies arasındaki fark yanı sıra, bir hepatectomy sahne tekniği de sonucunu PLTx. şu anda, PTLx sıçan kullanarak birçok cerrahi çalışmalarda belirlemede önemli bir rol oynar model, karaciğer lobları karaciğer LOB2,3,6,7,8,9Transpediküler basit bir ligasyonu koyduktan sonra rezeke. Ancak, rezeksiyon farklı karaciğer lobları olarak tüm karaciğer lobları için uygun değildir önce basit bir ligasyonu yerleştirerek farklı şekil ve boyutlarda vardır. Medyan LOB basit bir ligasyonu üssünde vena kava, sonunda kısmi karaciğer nakli10,11çıkış etkileyebilecek bir daralma neden bir yüksek risk taşır. Bu nedenle, fare hepatik anatomi bilgisine dayalı bir güncelleştirme hepatectomy tekniği sıçan PTLx alanında gereklidir.
Bu çalışmada açıklanan protokolünde Güncellenme Zamanı bir gemi odaklı % 70 hepatectomy sıçan PLTx yordam dahil oldu. Portal damarları ve hepatik arter sol yan lob (LLL) ve medyan LOB (ML) disseke ve ayrı ayrı karaciğer parankimi kaldırılmasını önce ayrıldı. O zaman, LLL ve ML hepatik damar dikiş piercing tarafından tane. Bireysel d ve birden çok delici dikiş yerine kullanarak tarafından basit bir ligasyonu yerleştirerek, ML kalıntısı güdük vena kava yayılmış başardı. Bu nedenle, cerrahi ligasyonu tarafından neden infrahepatic vena kava daralma kaçınılması. Ayrıca, tıkanıklığı karaciğer parankimi kaldırılması böylece deneyler11kan kaybı etkisi en aza indirerek kalan karaciğer stump, kanama oranı azalmıştır önce bireysel d tarafından LLL ve ML kan arz.
Microsurgeons için bir karaciğer nakli uygun hepatik arter (PHA) bu geminin son derece küçük çaplı nedeniyle yeniden oluşturmak için önemli bir sorundur. LTx yeniden arterialization gerçekten gerekli olup olmadığı sorusu hala tartışma12,13,14altında olsa da, hepatik arter yeniden inşa için sayısız mikrocerrahi teknikleri önerilen14 olmuştur . Burada, bir uç-yan şekilde genişlemiş PHA ortak hepatik arter (CHA) anastomoses karaciğer nakli yeniden arterialization bir roman tekniği tanıtmak. Bu uç-yan tekniği kullanarak, iki hepatik arterler daha büyük çaplı bir anastomoz ile bağlanır. Anastomoz çapı daha büyük olduğunu, el dikiş daha kolay gerçekleştirmek için ve büyük anastomoz a_ılabilinirse iyileşme olur.
Protocol
Representative Results
Discussion
Sıçan PLTx yüksek maliyet ve uzun süre20içinde bir eğitim programı ile sofistike bir mikrocerrahi işlemdir. Sıçan PLTx Protokolü karmaşıklığı araştırmacılar bu hayvan modeli kullanmasını engelledi. Tam boyutlu fare LTx ile karşılaştırıldığında, sıçan PLTx microsurgeon sadece bir nakli prosedürünün meydan aynı zamanda küçük bir hayvan karaciğer rezeksiyonu meydan sunar. Bu nedenle, tüm prosedürü ayrıntılı olarak açıklayan bir görüntülenmeyecektir mi…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu araştırma Ulusal Doğa Bilimleri Foundation of China (Grant No. 81501382) ve Zhejiang il doğal Bilim Vakfı Çin (Grant No tarafından desteklenmiştir LQ13H100003 ve LQ16H100002).
Materials
| Surgical microscope | Möller-Wedel, Germany | 654359 | |
| Light source | OSRAM (China) Lighting Co., Ltd | 64627 | |
| Isoflurane Vaporizer | MIDMARK Corporation | VIP3000 | |
| Isoflurane | Baxter Healthcare Corporation | 40032609 | For Inhalation anesthesia |
| Normal Saline | Zhejiang Tianrui Pharmaceutical Co., Ltd. | 716092103 | |
| Povidone Iodine Solution | HANGZHOU MINSHENG PHARMACEUTICAL | H33021567 | For disinfection |
| Hemostatic forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | J31020 | |
| Surgical scissors | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | JC2116 | |
| Needle-holder | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | J32030 | |
| Dressing Forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | J42020 | |
| Mosquito hemostatic forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | W40340 | For liver resection; For retracting the stay sutures. |
| Micro-scissors | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA1040 | |
| Micro needle-holder | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA2060 | |
| Curved micro typing forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA3061 | |
| straight micro typing forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA3060 | |
| Micro hemostatic forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA3020 | |
| Bulldog clamp | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | XEC350 | |
| Vessel clamps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | W40160 | |
| Micro Serrefine-curved | Fine Science Tools, Inc | 18055-05 | |
| Dacryosyrinx | Shi Zhuo medical instruments Co., Ltd. | 5# curve | Use as the curved needle for forcing out the air bubbles in the vascular lumen |
| Sterilized gauze swabs | Fuqing Health & Integral Medical | 20230R | |
| 5mL syringe | Zhejiang Yusheng Medical Instrument Co.,Ltd | 811932416 | |
| 18G needles | Shanghai Kindly Enterprise Development Group Co., Ltd | 01-014 | For fixing the upper abdomen wall |
| Intima II 22G intraveous catheter | Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. | 383207y | For making biliary stent; For infusing perfusate |
| 7-0 polypropylene sutures | Ningbo Medical Needle Co., Ltd | 151026 | For SHVC anastomsis |
| 6-0 silk suture | Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd | 2650182 | For ligation |
| Culture dish (100mm) | Corning Incorporated | 430165 | used in back table for storage ice. The back table dish was placed on it. |
| Culture dish (30 mm) | Corning Incorporated | 3296 | As a vessel for organ preservation |
| Angiocath 12G intravenous catheter | Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. | 382277 | For making a IHVC cuff |
| Angiocath 14G intravenous catheter | Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. | 382269 | For making a PV cuff |
| Buprenorphine (hydrochloride) | Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Pharmaceutical Co., Ltd | H12020275 | For analgesic |
| Cefuroxime sodium for injection | Esseti FarmaceuticiS.r.l | H20160013 | As an antibiotics |
References
- Yan, J. Q., Becker, T., Peng, C. H., Li, H. W., Klempnauer, J. Split liver transplantation: a reliable approach to expand donor pool. Hepatobiliary Pancreat Dis Int. 4, 339-344 (2005).
- Xia, R., Emond, J. C. Orthotopic partial liver transplantation in the rat: a model of 70% hepatectomy and reduced size liver transplantation. Transplantation. 56, 1041-1043 (1993).
- Omura, T., Ascher, N. L., Emond, J. C. Fifty-percent partial liver transplantation in the rat. Transplantation. 62, 292-293 (1996).
- Foss, A., et al. Function of reduced-size liver transplant in the rat. Res Exp Med (Berl). 197, 91-99 (1997).
- Nagai, K., Yagi, S., Uemoto, S., Tolba, R. H. Surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction. J Vis Exp. , e4376 (2013).
- Sun, J., Qin, G., Wu, L., Wang, C., Sheil, A. G. Antigenic load and peripheral chimeric levels in entire and partial liver allograft recipients. Microsurgery. 21, 183-187 (2001).
- Ninomiya, M., et al. Deceleration of regenerative response improves the outcome of rat with massive hepatectomy. Am J Transplant. 10, 1580-1587 (2010).
- Yamanaka, K., et al. Effect of olprinone on liver microstructure in rat partial liver transplantation. J Surg Res. 183, 391-396 (2013).
- Wang, W., et al. Mesenchymal stem cells promote liver regeneration and prolong survival in small-for-size liver grafts: involvement of C-Jun N-terminal kinase, cyclin D1, and NF-kappaB. PLoS One. 9, e112532 (2014).
- Madrahimov, N., Dirsch, O., Broelsch, C., Dahmen, U. Marginal hepatectomy in the rat: from anatomy to surgery. Ann. Surg. 244, 89-98 (2006).
- Martins, P. N., Theruvath, T. P., Neuhaus, P. Rodent models of partial hepatectomies. Liver Int. 28, 3-11 (2008).
- Kamada, N., Sumimoto, R., Kaneda, K. The value of hepatic artery reconstruction as a technique in rat liver transplantation. Surgery. 111, 195-200 (1992).
- Steger, U., Sawitzki, B., Gassel, A. M., Gassel, H. J., Wood, K. J. Impact of hepatic rearterialization on reperfusion injury and outcome after mouse liver transplantation. Transplantation. 76, 327-332 (2003).
- Huang, H., et al. A novel end-to-side anastomosis technique for hepatic rearterialization in rat orthotopic liver transplantation to accommodate size mismatches between vessels. Eur Surg Res. 47, 53-62 (2011).
- Bernal, J., et al. Guidelines for rodent survival surgery. J.Invest Surg. 22, 445-451 (2009).
- Johnson, A. J., Stulting, R. D., Macsai, M. S. . Ophthalmic Microsurgical Suturing Techniques. , 21-28 (2007).
- Delriviere, L., et al. Detailed modified technique for safer harvesting and preparation of liver graft in the rat. Microsurgery. 17, 690-696 (1996).
- Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. Orthotopic liver transplantation in rats. J Vis Exp. , (2012).
- Delriviere, L., et al. Technical details for safer venous and biliary anastomoses for liver transplantation in the rat. Microsurgery. 18, 12-18 (1998).
- Jin, H., et al. Preliminary experience of a PDCA-cycle and quality management based training curriculum for rat liver transplantation. J Surg Res. 176, 409-422 (2012).
- Selzner, N., Selzner, M., Tian, Y., Kadry, Z., Clavien, P. A. Cold ischemia decreases liver regeneration after partial liver transplantation in the rat: A TNF-alpha/IL-6-dependent mechanism. Hepatology. 36, 812-818 (2002).
- Tanaka, H., Hashizume, K., Enosawa, S., Suzuki, S. Successful transplantation of a 20% partial liver graft in rats: a technical innovation. J Surg Res. 110, 409-412 (2003).
- Bockhorn, M., et al. Erythropoietin treatment improves liver regeneration and survival in rat models of extended liver resection and living donor liver transplantation. Transplantation. 86, 1578-1585 (2008).
- Martins, P. N., Neuhaus, P. Surgical anatomy of the liver, hepatic vasculature and bile ducts in the rat. Liver Int. 27, 384-392 (2007).
- Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47-50 (1979).
- Kashfi, A., et al. A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat. Transplant.Proc. 37, 185-188 (2005).
- Wain, R. A. J., Hammond, D., McPhillips, M., Whitty, J. P. M., Ahmed, W., Ahmed, W., Jackson, M. J. . Surgical Tools and Medical Devices. , 545-562 (2016).
- Huang, H., et al. Hepatic arterial perfusion is essential for the spontaneous recovery from focal hepatic venous outflow obstruction in rats. Am J Transplant. 11, 2342-2352 (2011).
- Czigany, Z., et al. Improving Research Practice in Rat Orthotopic and Partial Orthotopic Liver Transplantation: A Review, Recommendation, and Publication Guide. Eur Surg Res. 55, 119-138 (2015).
