Summary

نموذج الفئران من أورثوتوبيك زرع الكبد استخدام تقنية رواية ملامسة مغناطيسي للتعمير الوريد الأجوف سوبراهيباتيك

Published: March 19, 2018
doi:

Summary

وتظل إعادة إعمار الأجوف فينا سوبراهيباتيك (شفك) خطوة صعبة في زرع الكبد أورثوتوبيك الفئران. في هذه المقالة، نحن إظهار بروتوكول خطوة بخطوة للتعمير شفك في الفئران باستخدام تقنية رواية ملامسة مغناطيسية.

Abstract

نموذج الفئران من زرع الكبد أورثوتوبيك (OLT) ضروري لأبحاث زرع الأعضاء. وهو نموذج حيوان متطورة للغاية ويتطلب منحنى التعلم حاد. قد إدخال تقنية الكفة لملامسة الوريد البابي (PV) وإينفراهيباتيك الوريد الأجوف (إيهفك) إلى حد كبير على تبسيط إجراءات زرع في الفئران. بسبب الجدار الأمامي القصير سوبراهيباتيك الوريد الأجوف المستلمين (شفك)، تقنية الكفة غير صعبة للغاية لاستخدامها لإعادة بناء شفك. معظم الباحثين في هذا الميدان لا تزال تستخدم تقنية خياطة اليد لإعمار شفك، مما يجعل هذه الخطوة عنق الزجاجة في زرع الكبد أورثوتوبيك الفئران. تقنية ملامسة المغناطيسي (أي، ماجناموسيس) أسلوب الربط بين سفينتين تابعتين لاستخدام قوة جاذبية بين اثنين من المغناطيس. لدينا دراسة أجريت مؤخرا أظهرت أن ملامسة المغناطيسي التقنية متفوقة على تقنية خياطة اليد للتعمير شفك في الفئران. في هذه المقالة، نحن إظهار بروتوكول خطوة بخطوة للتعمير شفك في الفئران باستخدام تقنية الرواية ملامسة المغناطيسية. في هذا النموذج، إعادة إعمار PV وإيهفك كان يؤديها تقنية الكفة القياسية، بينما كان يؤديها تعمير القناة الصفراوية (دينار بحريني) تقنية تركيب دعامات. لم يتم تنفيذ أرتيرياليزاتيون إعادة وظائف الكبد. تقنية ملامسة المغناطيسية جعلت التعمير شفك أسهل بكثير واختصارها إلى حد كبير في مرحلة أنفيباتيك. بعد منحنى التعلم معقولة، يمكن أن تنتج حتى الباحثين دون مهارات متقدمة microsurgical نتائج موثوقة واستنساخه باستخدام نموذج الفئران هذا قلت.

Introduction

نموذج الفئران من زرع الكبد أورثوتوبيك (OLT) ضروري لزرع البحوث1،2. ووصف لي et al. في عام 19733قلت الفئران الأولى. في هذا النموذج، أعيد جميع السفن بتقنية خياطة اليد. تقنية خياطة يدوية تتطلب مهارات microsurgical متقدمة، مما يحد بشكل كبير استخدام. ومنذ ذلك الحين، أبلغ عن مختلف التعديلات على البروتوكول الأصلي من الفئران قلت. فيما بينها، تعتبر تقنية الكفة لملامسة الوريد البابي (PV) وإينفراهيباتيك الوريد الأجوف (إيهفك) عنها كامارا et al. في عام 1979 تحسنا كبيرا لهذا النموذج، كما أنها إلى حد كبير تبسيط الإجراءات التعمير4 . بسبب الجدار الأمامي القصير سوبراهيباتيك الوريد الأجوف المستلمين (شفك)، تقنية الكفة غير صعبة للغاية لاستخدامها لإعادة بناء شفك. معظم الباحثين في هذا الميدان لا تزال تستخدم تقنية خياطة اليد لإعمار شفك، مما يجعل هذه الخطوة عنق الزجاجة في الفئران قلت5،6،7.

تقنية ملامسة المغناطيسي (أي، ماجناموسيس) أسلوب الربط بين سفينتين أو هياكل أخرى أنبوبي باستخدام قوة جاذبية بين اثنين مغناطيس8،،،من910،11. القوة المغناطيسية يضغط تدريجيا ويعيد تشكيل الأنسجة إلى ملامسة قوية، ستارلس،من1213. وقد ثبت هذا ملامسة ضغط فعالة في البشر14،15. لقد قمنا بتصميم زوج من الحلقات المغناطيسية على وجه التحديد لملامسة شفك في الفئران. لدينا دراسة أجريت مؤخرا أظهرت أن ملامسة المغناطيسي التقنية متفوقة على تقنية خياطة اليد للتعمير شفك في الفئران قلت16. والغرض من هذه المقالة توفير بروتوكول تفصيلاً، خطوة بخطوة للتعمير شفك في الفئران باستخدام تقنية الرواية ملامسة المغناطيسية.

Protocol

البروتوكول قد نفذت وفقا للمبادئ التوجيهية لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية وأقرته اللجنة المعنية بالأخلاقيات للحيوان تجارب لجامعة شيان جياوتونغ، وشيان، مقاطعة شنشي الصينية. ملاحظة: أي من الإجراءات الواردة في هذا البروتوكول قد أنجز تحت مجهر جراحي. 1-إعدا?…

Representative Results

بعد حوالي عشر محاولات، كان يتقن تقنية ملامسة المغناطيسي للتعمير شفك بنجاح بأحد الباحثين الذين قد لا يوجد تدريب microsurgical السابقة. إعادة إعمار شفك استغرق أقل من 2 دقيقة. وكان مرحلة أنهيباتيك للفئران المستفيدة حوالي 10 دقيقة. ولوحظ لا تجلط الدم أو النزيف أو أنجيوستيجنوسيس في ا…

Discussion

تقدم سريرية كثيرة في زرع الكبد يمكن أن يعزى إلى دراسات أجريت على الحيوانات. قلت الفئران نموذجا جيدا المقبولة والمستخدمة على نطاق واسع في البحوث المتعلقة بالحفاظ على الجهاز وزرع علم المناعة، وعلم وظائف الأعضاء وعلم الأمراض. ومع ذلك، هو أيضا إجراء معقد جداً ويتطلب مهارة microsurgical متقدمة. وعلى…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

كان يؤيد هذا العمل بمنح من “وزارة التعليم الابتكار فريق تطوير البرنامج من الصين” (رقم IRT16R57)، المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم 81470896)، وبحث صندوق للشباب المواهب توظيف خطط لمدينة شيان جياوتونغ جامعة (RW).

Materials

Anesthesia Machine Harvard  tabletop Animal anaesthesia
PLX7000B HF Mobile Digital C-arm System Perlong Medical PLX7000B It is mainly used for the angiography and photography of various operations
Syringe Pump Mindray BeneFusion SP5 intravenous infusion
Isoflurane RWD life Science Co. anesthetic:for the induction and maintenanceof anesthesia
iohexol Shanghai General Pharmaceutical Co  intravascular contrast media  
heparin sodium injection SPH No.1 Biochemical & Pharmaceutical Co., LTD   prevent the formation of thrombosis 
cefuroxime  Glaxo Operations UK Limited  an antibiotic
buprenorphine  TIPR Pharmaceutical Responsible Co.,Ltd an analgesic
curved microforceps Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. W40350 surgical tool
hemostatic forceps(straight) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J31010 surgical tool
hemostatic forceps(curved) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J31020 surgical tool
Satinsky clamp Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. XEC050 surgical tool
needle holder Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J32010 surgical tool
microneedle holder Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WBA040 surgical tool
notched forceps Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J42010 surgical tool
tissue forceps(with hook) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J41010 surgical tool
tissue scissor Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Y00040 surgical tool
surgical scissors Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Y00030 surgical tool
micro scissors Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. MR-S121T surgical tool
microvessel clips Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. XEC240 surgical tool
straight microforceps(titanium alloy) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WCC010 surgical tool
curved microforceps  (titanium alloy) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WCC020 surgical tool

Riferimenti

  1. Aller, M. A., et al. A half century (1961-2011) of applying microsurgery to experimental liver research. World journal of hepatology. 4, 199-208 (2012).
  2. Aller, M. A., et al. The value of microsurgery in liver research. Liver international : official journal of the International Association for the Study of the Liver. 29, 1132-1140 (2009).
  3. Lee, S., Charters, A. C., Chandler, J. G., Orloff, M. J. A technique for orthotopic liver transplantation in the rat. Transplantation. 16, 664-669 (1973).
  4. Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47-50 (1979).
  5. Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. Orthotopic liver transplantation in rats. Journal of visualized experiments : JoVE. , (2012).
  6. Nagai, K., Yagi, S., Uemoto, S., Tolba, R. H. Surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction. Journal of visualized experiments : JoVE. , e4376 (2013).
  7. Liu, X., He, C., Huang, T., Gu, J. Development of a New Technique for Reconstruction of Hepatic Artery during Liver Transplantation in Sprague-Dawley Rat. PloS one. 10, e0145662 (2015).
  8. Jamshidi, R., Stephenson, J. T., Clay, J. G., Pichakron, K. O., Harrison, M. R. Magnamosis: magnetic compression anastomosis with comparison to suture and staple techniques. Journal of pediatric surgery. 44, 222-228 (2009).
  9. Pichakron, K. O., et al. Magnamosis II: Magnetic compression anastomosis for minimally invasive gastrojejunostomy and jejunojejunostomy. Journal of the American College of Surgeons. 212, 42-49 (2011).
  10. Gonzales, K. D., et al. Magnamosis III: delivery of a magnetic compression anastomosis device using minimally invasive endoscopic techniques. Journal of pediatric surgery. 47, 1291-1295 (2012).
  11. Wall, J., et al. MAGNAMOSIS IV: magnetic compression anastomosis for minimally invasive colorectal surgery. Endoscopy. 45, 643-648 (2013).
  12. Xue, F., et al. Choledochojejunostomy with an innovative magnetic compressive anastomosis: How to determine optimal pressure?. World journal of gastroenterology. 22, 2326-2335 (2016).
  13. Yan, X., et al. Portacaval shunt established in six dogs using magnetic compression technique. PloS one. 8, e76873 (2013).
  14. Dorman, R. M., Vali, K., Harmon, C. M., Zaritzky, M., Bass, K. D. Repair of esophageal atresia with proximal fistula using endoscopic magnetic compression anastomosis (magnamosis) after staged lengthening. Pediatric surgery international. 32, 525-528 (2016).
  15. Russell, K. W., Rollins, M. D., Feola, G. P., Scaife, E. R. Magnamosis: a novel technique for the management of rectal atresia. BMJ case reports. , (2014).
  16. Shi, Y., et al. Magnetic ring anastomosis of suprahepatic vena cava: novel technique for liver transplantation in rat. Transplant international : official journal of the European Society for Organ Transplantation. 28, 89-94 (2015).
check_url/it/56933?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Yang, L., Lu, J., Wang, Y., Zhang, M., Shi, Y., Wei, S., Liu, P., Wu, Z., Lv, Y., Wu, R. A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction. J. Vis. Exp. (133), e56933, doi:10.3791/56933 (2018).

View Video