Questo articolo viene descritto l'utilizzo dell'ecografia ad alta risoluzione in topi geneticamente ingegnerizzati cancro del pancreas. L'obiettivo primario è quello di fornire istruzioni precise per il rilevamento e la valutazione dei tumori pancreatici endogeni.
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Articolo metodologico
Utilizzando ultrasuoni ad alta risoluzione per Monitor l'inizio del tumore e la crescita nei modelli geneticamente del cancro del pancreas
In questo articolo
Sommario
Abstract
Il LSL-KrasG12D / +; LSL-Trp53R172H / +; PDX-1-Cre modello murino (KPC) rappresenta un modello transgenico stabilito e frequentemente utilizzato per valutare nuove terapie nel cancro del pancreas. L'inizio del tumore è variabile nel modello KPC da 8 settimane a diversi mesi. Di conseguenza, strumenti di imaging non invasivo sono tenuti a schermo per l'inizio del tumore e monitor per la risposta al trattamento. Per risolvere questo problema, diversi approcci sono emerse negli ultimi anni. Ultrasuono di alta risoluzione ha importanti vantaggi quali la non invasività, tempi di sessione veloce e un'alta risoluzione di immagine senza esposizione a radiazioni. Tuttavia, ecografia nei topi non è banale e sufficiente conoscenza anatomica e competenze pratiche necessari per eseguire con successo ad ultrasuoni ad alta risoluzione in modelli preclinici di cancro del pancreas. Con il seguente articolo, una guida dettagliata di hands-on per ecografia addominale in modelli murini con un focus particolare su modelli endogeni del cancro del pancreas è presentata. Inoltre, viene fornito un riepilogo degli errori comuni e come evitarli.
Introduzione
Modelli murini geneticamente hanno acquisito un'importanza crescente nella ricerca sul cancro dovuto la loro capacità di ricapitolare strettamente la natura complessa di carcinogenesi umana1,2,3. Uno dei più frequentemente usati modelli per studiare lo sviluppo del cancro del pancreas, progressione e risposta terapeutica è caratterizzata da una mutazione d'attivazione nell'oncogene Kras combinato con un'inattivazione del soppressore del tumore p534. Questo LSL-KrasG12D / +; LSL-Trp53R172H / +; PDX-1-Cre modello murino (KP....
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Protocollo
Questo protocollo è in conformità degli orientamenti di cura degli animali all'Università medica centro Goettingen, Germania (33,9-42502-04-15/2056). Scrivi una recensione su tavole a seconda delle esigenze specifiche del singolo animale, alcuni dei passaggi del protocollo può essere modificato di conseguenza.
1. addominale palpazione dei topi KPC
- Per evitare inutili ecografie, palpare l'addome del mouse per identificare i topi che eventualmente potrebbero sopportare una lesione intra-addominale e successivamente devono essere sottoposti a ecografia addominale.
- Eseguire la palpazione addominale settimanale a partire da 8 s....
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Risultati
L'imaging ad ultrasuoni è una tecnica versatile e non invasivo che viene utilizzata per risolvere diversi problemi in modelli murini di malattie umane. Rispetto a tutti gli altri vantaggi principali approcci imaging sono efficienza ad alta velocità, costo, tempo di acquisizione breve e l'imaging in tempo reale. Tuttavia, questo strumento ha bisogno di competenze per generare immagini accurate e di alta qualità. In particolare nel caso di artefatti indesiderati almeno qualche esperienza co.......
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Discussione
Con questo protocollo, è fornita una descrizione dettagliata per quantificare i tumori pancreatici usando la formazione immagine di ultrasuono addominale ad alta definizione in modelli murini geneticamente. Recentemente, Sastra et al pubblicato una descrizione dettagliata di come quantificare i tumori pancreatici in modelli murini, ma non visualizzato in quel momento istruzioni circa la preparazione e manipolazione come prerequisito per gli ulteriori passi sono stati mostrati11. L'obietti.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla a rivelare.
Ringraziamenti
Questa ricerca è stata sostenuta da Deutsche ausgewiesenen (gruppo di Eder Max per AN: 110972), una borsa di tesi di dottorato di DGVS (di SMB) e una borsa di Studio Fondazione Fresenius-Else-Kröner (a RGG) all'University Medical Center Goettingen. Ringraziamo Jutta Blumberg e Ulrike Wegner per assistenza tecnica. Ringraziamo anche tutti i tecnici degli animali presso l'impianto di animale dell'University Medical Center Goettingen per mouse mantenendo. Tutti gli esperimenti sono stati eseguiti secondo le normative tedesche sul benessere degli animali.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Sistema a ultrasuoni ad alta risoluzione Visual Sonics Vevo2100, incluso tavolino di imaging e linea di anestesia | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | VS-11945 | |
| Trasduttore MicroScan Vevo 2100 MS-550-D (22-55 MHz) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | VS-11874 | |
| Sistema di anestesia Vevo (camera di induzione per anestesia con ingresso di gas freschi e di scarico) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | SA-12055 | |
| Vevo Imaging Station (tavolino di lavoro con cono nasale per l'alimentazione dell'anestesia) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | SA-11982 | |
| tosatrici elettroniche per animali domestici | Panasonic Marketing Europe, Germany | 5025232484324 | Panasonic ER-PA10-s |
| Labotect Piastra riscaldante | Labor tech Gö ttingen, Germania | 13854 | |
| crema per gli occhi (unguento oftalmico) | Schü lke& Mayr, Germania | 9080249 | |
| isoflurano veterinario | Abbvie, Germania | 4831867 | |
| crema depilatoria | RB healthcare UK, Regno Unito | 8218535 | |
| etanolo al 70% (v/v) in acqua distillata | TH. Geyer, Germania | 22941000 | |
| gel per ultrasuoni | Asmuth, Germania | 13477 | |
| salviette per tessuti | Kimberly-Clark Germania, Germania | 7558 | |
| punte di cotone | Meditrade, Germania | 75481116 | |
| ciotola di vetro per gel per ultrasuoni | ARC Francia, Francia | H1149 | |
| ciotola dell'acqua | W & P Trading Co., USA | B00K2P6PLQ | |
| spugne di garza | Fuhrmann, Germania | 960504 |
Riferimenti
- Kersten, K., de Visser, K. E., van Miltenburg, M. H., Jonkers, J. Genetically engineered mouse models in oncology research and cancer medicine. EMBO Molecular Medicine. 9 (2), 137-153 (2017).
- Olive, K. P., Politi, K. Translational therapeutics in genetically engin....
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Ristampe e permessi
