אין ויוו העברה גנטית כדי אנדותל העורק נפוצות הארנב
Summary
שיטה זו היא להציג את transgene לתוך אנדותל עורקי התרדמה ארנב. הקדמה של transgene מאפשר את ההערכה של תפקיד ביולוגי של המוצר transgene העורקים נורמלי או מחלת מודלים. השיטה שימושית גם למדידת פעילות של רצפי DNA תקינה.
Abstract
המטרה של שיטה זו היא להציג את transgene לתוך אנדותל של שני בעורקים ארנב נפוצות מקטעי מבודד. השיטה משיגה מוקד transgenesis אנדותל סלקטיבית, ובכך לאפשר חוקר כדי לקבוע את התפקידים הביולוגיים של אנדותל הביע transgenes וכדי לכמת את הפעילות תעתיק ויוו של רצפי DNA בעורק גדול תאי אנדותל. השיטה משתמשת בידוד כירורגי של עורק נפוצות ארנב, arteriotomy כדי לספק וקטור ויראלי לבטא transgene לתוך לומן עורקי. תקופת דגירה קצרה וקטור בלומן, עם השאיפה עוקבות של התכנים לומן, מספיקה להשיג ביטוי עמיד ויעיל transgene ב אנדותל, ללא לזיהוי התמרה חושית או מחוץ לביטוי פלח עורקי מבודד. השיטה מאפשרת הערכה של הפעילות הביולוגית של מוצרים transgene עורקים רגילים והן במודלים של מחלת כלי דם אנושי, תוך הימנעות תופעות מערכתיות יכולה להיגרם גם על ידי מיקוד המסירה הגן לאתרים אחרים (למשל. הכבד) או על ידי הגישה החלופית של אספקת מבנים גנטיים אנדותל מאת נבט קו transgenesis. היישום של השיטה הוא מוגבל על ידי הצורך מנתח מנוסה, כמו כן, חדר הפעלה המאובזר, את העלויות של רכישת דיור ארנבים, והצורך מומחיות העברה גנטית וקטור בנייה ושימוש. התוצאות המתקבלות בשיטה זו כוללים: שינויים הקשורים transgene מבנה עורקי, cellularity, מטריצה חוץ-תאית או פונקציית עושות; עליות או הפחתות דלקת עורקים; שינויים תא וסקולרית אפופטוזיס; התקדמות, פיגור או רגרסיה של מחלות כגון היפרפלזיה intimal או טרשת עורקים. השיטה מאפשרת מדידה של היכולת של רצפי רגולטוריות DNA יליד וסינתטיים לשנות את הביטוי transgene בתאי האנדותל, מתן תוצאות הכוללות: רמות של transgene ה-mRNA, רמות החלבון transgene, רמות של transgene פעילות אנזימטיות.
Introduction
המטרה של שיטה זו היא להציג את transgene לתוך אנדותל עורקי התרדמה נפוצות ארנב. הקדמה של transgene מאפשר את ההערכה של תפקיד ביולוגי של המוצר transgene עורקים רגילים והן במודלים הארנב של מחלת עורקים אנושי. ביטוי של transgene המחלה במודלים יכול לחשוף אם את transgene (ואת מוצריו חלבון) להראות הבטחה כמו סוכני טיפולית-1–2,,3,–4. הכללת רכיבים רגולטוריות cis אקטינג בקלטת ביטוי transgene מאפשר הערכת הפעילות של רכיבים אלה אנדותל עורקי ויוו5,6. הידע הפעילות של רכיבים ספציפיים של הרגולציה cis אקטינג יכול לשמש כדי לעצב ביטוי פעיל יותר קלטות וכדי לחקור מנגנונים של הכונה אנדותל ויוועורק גדול7.
ארנבים הם מודל ערך עבור היבטים שונים של פיזיולוגיה אנושית וסקולרית ומחלות. ארנבים חולקים תכונות כלי דם רבות עם בני אדם. לדוגמה, ערכים של תוכנית בסיסית hematological, תקנה hemostatic, ו למתח האורך כלי הדם דומים בין הארנבים ובני8. ארנב מודלים של מחלות לב וכלי דם לשכפל את תכונות מפתח של מחלות רבות, כולל: מפרצות (דומה גיאומטריים, מאפייני הזרימה)9, vasospasm (תגובה דומה לטיפול endovascular)10,11, ו טרשת עורקים (intimal הפלאק עם תכונות דומות, כולל את ליבה של עתיר השומנים, מקרופאגים, ותאי שריר חלק כיפה סיבית)12,13. בהתאם לכך, פותחו מודלים ארנב למחלות כלי דם רבות כגון פקקת, vasospasm, מפרצת, סוכרת, היצרות כלי הדם שתל טרשת עורקים8,13,14, 15,16.
לחוקרים בחירה בין מודלים חייתיים של פיזיולוגיה וסקולרית ומחלות, הארנב יש מספר יתרונות. כלי גדול יותר של ארנבים לעומת מכרסמים, לאפשר קל כירורגי מניפולציה, שימוש של endovascular התקנים בהם כמות גדולה של רקמות עבור מדידות כמותיים. ארנבים הם קרובים יותר phylogenetically פרימטים מאשר הם מכרסמים17, מגוון גנטי גדול ארנבים outbred קירוב טוב יותר ההשתנות גנטי של בני אדם. מגוון גנטי חשוב במיוחד ללימודים פרה, אשר-על-ידי שלהם בטבע-aim לפתח טיפולים שניתן להחיל באוכלוסייה אנושית מגוונת מבחינה גנטית. כמו עם מינים רבים, אם לא כל שאר מודל, ארנב גנים בקלות לשכפל או מסונתז כי יש כבר וסודרו הגנום ארנב עם כיסוי גבוה (7.48 x) [http://rohsdb.cmb.usc.edu/GBshape/cgi-bin/hgGateway?db=oryCun2]. לעומת דגמים בעלי חיים גדולים אחרים (כגון כלבים, חזירים או כבשים), ארנבים הם זולים יחסית וניתן לרכוש, הבית וכל אלה קל יותר לגדל ולטפל. מחלת כלי דם ספציפית הדגמים בארנבים כל יש משלהם יתרונות, חסרונות כמו מודלים של מחלות אנושיות כי הם מעבר להיקף זה כתב היד8,12,18. חוקר לעיין אלה יתרונות, חסרונות כדי לקבוע אם הארנב הוא המודל הטוב ביותר בשביל לענות על שאלה ספציפית ניסיוני.
הקדמה של רצפי רגולטוריות חומצה deoxyribonucleic (DNA) לתוך תאי אנדותל ויוו מאפשר חקירה של הפעילות של רצפי אלה בסביבה הפיזיולוגיות מורכבת. מחקרים במבחנה בתאי האנדותל transfected יכול להיות שימושי עבור הערכה ראשונית של רצפי DNA תקינה; עם זאת, רמות הביטוי במודלים תרביות רקמה הם לפעמים לא לשכפל כאשר המחקרים חוזרים ונשנים ויוו5,19,20. מערכות במבחנה ניתן גם שימושי עבור חקר מסלולים בסיסיים של חלבון איתות, פיזיולוגיה אנדותל כמו גם תקשורת בין תאים בתרבית כלי דם; עם זאת, מורכבת יותר מסלולים או רשתות רגולטוריות מושפעים אוכלוסיות מורכבות של התאים הסמוכים כלי הדם או המערכת החיסונית נלמדים בצורה הטובה ביותר אין ויוו מערכת6,20. השיטה המתוארת במסמך זה מספק פלטפורמה עבור חקר רגולציה של ביטוי transgene אנדותל בתוך ההקשר של כלי שלם, עם או בלי מחלות. המערכת ויוו מאפשרת גם חקירת crosstalk הסלולר פיזיולוגיים ופתולוגיים וזיהוי של תרומות של המערכת החיסונית כדי ויסות של ביטוי גנים6.
נבט-קו transgenesis (בעיקר בעכברים) היא גישה חלופית להכוונת transgene ביטוי לתאי אנדותל. גישה זו יכולים לספק ביטוי transgene חיים ארוך, אנדותל מיקוד מתווכת על ידי יזם ספציפי או אזורים רגולטוריות21,22. עם זאת, הדור של העכברים הטרנסגניים היא יקרה ועתירת, מספר קווי הטרנסגניים חייב להיבדק לעתים קרובות כדי להבטיח פילוח של transgene סוג התא הרצוי, ההישג של רמות ביטוי הולם transgene, וניסויים תוצאות מאתר מערכות יכול להיות תלויי-מתח. מודלים מהונדס מאתר עם transgenes אנדותל במיקוד יש יתרונות רבים: אין צורך לבצע ניתוח על כל חיה ניסיוני על מנת להשיג transgenesis, ניתן לגדל עכברים ניסיוני עם רבים אחרים זמינים העכברים הטרנסגניים ב כדי לבדוק אינטראקציות הגנטי פנוטיפי ו, ויש מבחר רחב של נוגדנים כי מגיבים עם מאתר חלבונים, דבר המקל על אפיון של פנוטיפים. עם זאת, פילוח של transgenes אנדותל דרך קו נבט בדרך כלל תוצאות בביטוי transgene ברחבי להערכת,22 ולכן קשה לקבוע את האתר שבו פועלת המוצר transgene. זה נכון במיוחד כאשר המוצר transgene מופרש, כי מוצר transgene מופרש על ידי תאי אנדותל ברחבי להערכת יכול להיות פעילות ביולוגית-כל מספר של האתרים שבתוך חיה. למרות השיטה המתוארת בכתב יד זה דורש מומחיות טכנית ומתקנים מיוחדים, זה יכול להיות פחות זמן רב ויקרים פחות לפתח קו העכבר הטרנסגניים אנדותל ספציפיים. זה מאפשר ההערכה של הפונקציה של חלבון באופן בררני בתאי האנדותל של קטע של עורק גדול, הוא מאפשר שימוש contralateral שחתך את עורק הצוואר כפקד לזווג (סילוק גורמים מערכתית יכולה להשתנות בין ניסיוני בעלי חיים-למשל, לחץ דם או רמות כולסטרול-כמשתנים בלתי מבוקרת).
ריפוי גנטי היא גישה מבטיחה לטיפול של מחלות לב וכלי דם, מחלות כרוניות במיוחד, כי יישום יחיד יכול לספק מתמשכת או חיים ארוך יכול להיות ביטוי של גנים טיפוליים23. ההבטחה טיפולית של טיפול גנטי יש נחקרו במודלים חייתיים של העברה גנטית הסומטית, לעיתים קרובות מיקוד כבד24,25, המהווה מטרה קלה יחסית מכיוון וקטורים ויראלי נישא בדם רבים hepatotropic. עם זאת, יש השפעה על מחלת כלי דם, ריפוי גנטי כמטרה בכבד חייב להשיג מערכתית ביטוי של חלבונים. פעולה זו דורשת בדרך כלל מינונים גבוהים של וקטור, אשר יכול להיות רעילים או אפילו קטלני26. יתר על כן, מערכתית רמות גבוהות של העלאה חלבון הסיכון של תופעות לוואי המטרה, אשר יכול לסבך או אפילו לטשטש פרשנות של תוצאות הניסוי. ריפוי גנטי המקומי מיקוד אנדותל כלי הדם כמתואר בכתב יד זה יכול למנוע תופעות לוואי מערכתית מכיוון הווקטור חדורים לא המופץ נרחב מעבר המקטע העורקים transduced, אפקטים וסקולרית מקומית יכולה להיות מושגת ללא שינויים ברמות הפלסמה מערכתית של חלבון. 27 . בנוסף, סכום נמוך בהרבה של וקטור יש צורך מגלי מקטע עורקי ממה הוא צריך להשיג התמרה חושית הכבד חזקים. Transgene ביטוי מן הכבד דווח לרדת לאורך זמן, כנראה בגלל מחזור התא, הדורש מינון חוזרות אם הביטוי transgene ברמה גבוהה היא תישמר. 28 , לעומת זאת, שיעור תחלופה נמוכה אנדותל מספק הביטוי יציבה לפחות 48 שבועות בארנבים צ’או-fed לפחות 24 שבועות בנגעים טרשת עורקים כולסטרול-fed ארנבים. 1 , 27
כדי לקבוע אם שיטה זו של העברה גנטית כדי אנדותל לעורק הצוואר נפוץ ארנב מתאים, היתרונות והחסרונות (טבלה 1) להתייחס בהקשר של מטרות מחקר ספציפי. היתרונות של שיטה זו כוללים: outbred הארנבים נציגה טובה יותר של מגוון גנטי אנושי מאשר עכברים המפגרים (חשוב לעבודה פרה); ארנבים לספק כלי גדול יותר עבור מניפולציה קל יותר רקמות לצורך ניתוח; השיטה ניתן להשיג transgene, ממוקדות אנדותל ביטוי הרבה יותר מהר מאשר נבט-קו אנדותל פילוח העכברים הטרנסגניים; מינון וקטור ניתן להתאים בקלות לרמות משתנה דגם של ביטוי transgene; תהליכים ספציפיים אנדותל בעורק גדול יכול ייחקרו; transgenesis וסקולרית מקומית מאפשרת בעורק מול אותה חיה כדי לשמש פקד, סילוק גורמים מערכתית כמשתנים בלתי מבוקרת. החסרונות כוללים: שירותים מיוחדים ומומחיות נדרשים; רקעים מהונדסים פחות שעליו להתנסות זמינים ב ארנבים מאשר עכברים; ויש מבחר פחות נרחב של נוגדנים הארנב לעומת עכבר חלבונים (עבור immunodetection של חלבונים transgene, אנטיגנים אחרים שעשויים להיות חשוב לפרש תוצאות ניסויית).
Protocol
Representative Results
Discussion
היבטים מסוימים של טכניקה כירורגית ראויות תשומת לב מיוחדת. חשיפה מלאה והתגייסות של עורק תרדמני באמצעות ניתוח זהיר הרצון להקל על העברת גנים ותיקון arteriotomy. עם זאת, בזמן, טפלול ישיר של העורק הראשי צריך להיות ממוזער כדי למנוע vasospasm. בנוסף, דימום צמוד העורק להפסיקו על ידי הפעלת לחץ קל עם גזה, דם extra…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
אנו מודים AdVec, inc. רשות להשתמש HDAd ריאגנטים, ג’וליה Feyk לסיוע מינהלי, ואת המחלקה לרפואה השוואתי הוטרינריים לייעוץ כירורגי ותמיכה. עבודה זו נתמכה על ידי HL114541, קרן צדקה של ג’ון לוק, ג ‘ ל’.
Materials
| Disposables | |||
| 3mL syringe with 24G needle | Becton Dickinson | 309571 | 2x for gene transfer surgery; 3x for harvest surgery |
| 1mL syringe with 27G needle | Becton Dickinson | 309623 | 6x for gene transfer surgery; 1x for harvest surgery |
| 20mL syringe, luer lock | Nipro Medical Corp | JD+20L | |
| Catheters, 24G x 3/4" | Terumo Medical Products | SROX2419V | |
| 19G needle | Becton Dickinson | 305187 | Gene transfer surgery only |
| 21G needle | Becton Dickinson | 305165 | For 20 mL syringe of saline |
| Gauze 4" x 4" | Dynarex | 3242 | ~10-15 per surgery |
| 3-0 silk suture | Covidien Ltd. | S-244 | |
| 5-0 silk suture | Covidien Ltd. | S-182 | Gene transfer surgery only |
| 7-0 polypropylene suture | CP Medical | 8648P | Gene transfer surgery only |
| 5-0 polyglycolic acid suture | CP Medical | 421A | Gene transfer surgery only |
| 3-0 polyglycolic acid suture | CP Medical | 398A | Gene transfer surgery only |
| Alcohol swabs | Covidien Ltd. | 6818 | For placement of I.V. line |
| Catheter plug | Vetoquinol | 411498 | Gene transfer surgery only |
| Ketamine HCl, 100 mg/mL | Vedco Inc. | 05098916106 | |
| Xylazine, 100 mg/mL | Akorn Inc. | 4821 | |
| Lidocaine HCl, 2% | Pfizer | 00409427702 | |
| Bupivacaine HCl, 0.5% | Pfizer | 00409161050 | |
| Beuthanasia D-Special | Intervet Inc. | NDC 00061047305 | Harvest surgery only |
| Buprenorphine HCl, 0.3 mg/mL | Patterson Veterinary | 12496075705 | Gene transfer surgery only |
| Saline IV bag, 0.9% sodium chloride | Baxter | 2B1309 | 2x for gene transfer surgery; can use vial of sterile saline in place of one |
| Heparin (5000 U/mL) | APP Pharmaceuticals | NDC 63323-047-10 | Gene transfer surgery only |
| Fentanyl patch, 25 mcg/hr | Apotex Corp. | NDC 60505-7006-2 | Gene transfer surgery only |
| Isoflurane | Multiple vendors | Catalog number not available | |
| Gene transfer vector | Dilute 350 µL per artery; 2 x 1011 vp/mL for adenovirus; gene transfer surgery only | ||
| Surgical Instruments | |||
| Metzenbaum needle holder 7" straight | Roboz | RS-7900 | Gene transfer surgery only |
| Operating scissors 6.5" straight blunt/blunt | Roboz | RS-6828 | |
| Needle holder /w suture scissors | Miltex | 8-14-IMC | Gene transfer surgery only |
| Castroviejo scissors | Roboz | RS-5658 | |
| Castroviejo needle holder, 5.75" straight with lock | Roboz | RS-6412 | Gene transfer surgery only |
| Stevens scissors 4.25" curved blunt/blunt | Roboz | RS-5943 | |
| Alm retractor 4" 4X4 5mm blunt prongs | Roboz | RS-6514 | 2x |
| Backhaus towel clamp 3.5" | Roboz | 4x | |
| Micro clip setting forceps 4.75" | Roboz | RS-6496 | Gene transfer surgery only |
| Micro vascular clips, 11 mm | Roboz | 2x for gene transfer surgery only | |
| Surg-I-Loop | Scanlan International | 1001-81M | 5 cm length |
| Bonaccolto forceps, 4” (10 cm) long longitudinal serrations, cross serrated tip, 1.2mm tip width | Roboz | RS-5210 | |
| Dumont #3 forceps Inox tip size .17 X .10mm | Roboz | RS-5042 | |
| Graefe forceps, 4” (10 cm) long serrated straight, 0.8mm tip | Roboz | RS-5280 | |
| Halstead mosquito forceps, 5" straight, 1.3mm tips | Roboz | RS-7110 | 2x |
| Halstead mosquito forceps, 5" curved, 1.3mm tips | Roboz | RS-7111 | |
| Jacobson mosquito forceps 5" curved extra delicate, 0.9 mm tips | Roboz | RS-7117 | |
| Kantrowitz forceps, 7.25" 90 degree delicate, 1.7 mm tips | Roboz | RS-7305 | |
| Tissue forceps 5", 1X2 teeth, 2 mm tip width | Roboz | RS-8162 | |
| Allis-Baby forceps, 12 cm, 4×5 teeth, 3 mm tip width | Fine Science Tools | 11092-12 | 2x |
| Adson forceps, 12 cm, serrated, straight | Fine Science Tools | 11006-12 | |
| Veterinary electrosurgery handpiece and electrode | MACAN Manufacturing | HPAC-1; R-F11 | |
| Surgical Suite Equipment | |||
| Circulating warm water blanket and pump | Multiple vendors | Catalog number not available | |
| Forced air warming unit | 3M | Bair Hugger Model 505 | Gene transfer surgery only |
| IV infusion pump | Heska | Vet IV 2.2 | Gene transfer surgery only |
| Isoflurane vaporizer and scavenger | Multiple vendors | Catalog number not available | |
| Veterinary multi-parameter monitor | Surgivet | Surgivet Advisor | |
| Veterinary electrosurgery unit | MACAN Manufacturing | MV-9 | |
| Surgical microscope | D.F. Vasconcellos | M900 | Needs ~16x magnification |
Riferimenti
- Flynn, R., et al. Expression of apolipoprotein A-I in rabbit carotid endothelium protects against atherosclerosis. Mol Ther. 19, 1833-1841 (2011).
- Falkenberg, M., et al. Increased expression of urokinase during atherosclerotic lesion development causes arterial constriction and lumen loss, and accelerates lesion growth. Proc Natl Acad Sci U S A. 99, 10665-10670 (2002).
- Schneider, D. B., et al. Expression of Fas ligand in arteries of hypercholesterolemic rabbits accelerates atherosclerotic lesion formation. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 20, 298-308 (2000).
- Du, L., Dronadula, N., Tanaka, S., Dichek, D. A. Helper-dependent adenoviral vector achieves prolonged, stable expression of interleukin-10 in rabbit carotid arteries but does not limit early atherogenesis. Hum Gene Ther. 22, 959-968 (2011).
- Dronadula, N., et al. Construction of a novel expression cassette for increasing transgene expression in vivo in endothelial cells of large blood vessels. Gene Ther. 18, 501-508 (2011).
- Dronadula, N., Wacker, B. K., Van Der Kwast, R., Zhang, J., Dichek, D. A. Stable In Vivo Transgene Expression in Endothelial Cells with Helper-Dependent Adenovirus: Roles of Promoter and Interleukin-10. Hum Gene Ther. 28, 255-270 (2017).
- Dong, G., Schulick, A. H., DeYoung, M. B., Dichek, D. A. Identification of a cis-acting sequence in the human plasminogen activator inhibitor type-1 gene that mediates transforming growth factor-b1 responsiveness in endothelium in vivo. J Biol Chem. 271, 29969-29977 (1996).
- Byrom, M. J., Bannon, P. G., White, G. H., Ng, M. K. Animal models for the assessment of novel vascular conduits. J Vasc Surg. 52, 176-195 (2010).
- Zeng, Z., et al. Hemodynamics and anatomy of elastase-induced rabbit aneurysm models: similarity to human cerebral aneurysms. AJNR Am J Neuroradiol. 32, 595-601 (2011).
- Macdonald, R. L., Wallace, M. C., Montanera, W. J., Glen, J. A. Pathological effects of angioplasty on vasospastic carotid arteries in a rabbit model. J Neurosurg. 83, 111-117 (1995).
- Nakai, K., Numaguchi, Y., Moritani, T. Vasospasm model of a rabbit common carotid artery for endovascular research. Acad Radiol. 9, 270-275 (2002).
- Zaragoza, C., et al. Animal models of cardiovascular diseases. J Biomed Biotechnol. 2011, 497841 (2011).
- Baumgartner, C., Brandl, J., Munch, G., Ungerer, M. Rabbit models to study atherosclerosis and its complications – Transgenic vascular protein expression in vivo. Prog Biophys Mol Biol. 121 (2), 131-141 (2016).
- Wang, K., et al. Three-Layered PCL Grafts Promoted Vascular Regeneration in a Rabbit Carotid Artery Model. Macromol Biosci. 16 (4), 608-618 (2016).
- Schachner, T., Laufer, G., Bonatti, J. In vivo (animal) models of vein graft disease. Eur J Cardiothorac Surg. 30, 451-463 (2006).
- Dornas, W. C., Oliveira, T. T., Augusto, L. E., Nagem, T. J. Experimental atherosclerosis in rabbits. Arq Bras Cardiol. 95 (2), 272-278 (2010).
- Graur, D., Duret, L., Gouy, M. Phylogenetic position of the order Lagomorpha (rabbits, hares and allies). Nature. 379 (6563), 333-335 (1996).
- Yanni, A. E. The laboratory rabbit: an animal model of atherosclerosis research. Lab Anim. 38, 246-256 (2004).
- Miao, C. H., et al. Inclusion of the hepatic locus control region, an intron, and untranslated region increases and stabilizes hepatic factor IX gene expression in vivo but not in vitro. Mol. Ther. 1, 522-532 (2000).
- Wen, S., Graf, S., Massey, P. G., Dichek, D. A. Improved vascular gene transfer with a helper-dependent adenoviral vector. Circulation. 110, 1484-1491 (2004).
- Schlaeger, T. M., et al. Uniform vascular-endothelial-cell-specific gene expression in both embryonic and adult transgenic mice. Proc Natl Acad Sci U S A. 94 (7), 3058-3063 (1997).
- Cowan, P. J., et al. Targeting gene expression to endothelial cells in transgenic mice using the human intercellular adhesion molecule 2 promoter. Transplantation. 62 (2), 155-160 (1996).
- Sehara, Y., et al. Persistent Expression of Dopamine-Synthesizing Enzymes 15 Years After Gene Transfer in a Primate Model of Parkinson’s Disease. Hum Gene Ther Clin Dev. 28, 74-79 (2017).
- Tangirala, R. K., et al. Regression of atherosclerosis induced by liver-directed gene transfer of apolipoprotein A-I in mice. Circulation. 100, 1816-1822 (1999).
- Benoit, P., et al. Somatic gene transfer of human ApoA-I inhibits atherosclerosis progression in mouse models. Circulation. 99, 105-110 (1999).
- Raper, S. E., et al. Fatal systemic inflammatory response syndrome in a ornithine transcarbamylase deficient patient following adenoviral gene transfer. Mol Genet Metab. 80, 148-158 (2003).
- Wacker, B. K., Dronadula, N., Zhang, J., Dichek, D. A. Local Vascular Gene Therapy With Apolipoprotein A-I to Promote Regression of Atherosclerosis. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 37, 316-327 (2017).
- Brunetti-Pierri, N., et al. Transgene expression up to 7 years in nonhuman primates following hepatic transduction with helper-dependent adenoviral vectors. Hum Gene Ther. 24, 761-765 (2013).
- Rome, J. J., et al. Anatomic barriers influence the distribution of in vivo. gene transfer into the arterial wall. Modeling with microscopic tracer particles and verification with a recombinant adenoviral vector. Arterioscler Thromb. 14, 148-161 (1994).
- Cunningham, K. S., Gotlieb, A. I. The role of shear stress in the pathogenesis of atherosclerosis. Lab Invest. 85, 9-23 (2005).
- Brodbelt, D. Perioperative mortality in small animal anaesthesia. Vet J. 182, 152-161 (2009).
- Schulick, A. H., Dong, G., Newman, K. D., Virmani, R., Dichek, D. A. Endothelium-specific in vivo gene transfer. Circ Res. 77, 475-485 (1995).
- Vassalli, G., Agah, R., Qiao, R., Aguilar, C., Dichek, D. A. A mouse model of arterial gene transfer. Antigen-specific immunity is a minor determinant of the early loss of adenovirus-mediated transgene expression. Circ Res. 85, 25-32 (1999).
- Schneider, D. B., Fly, C. A., Dichek, D. A., Geary, R. L. Adenoviral gene transfer in arteries of hypercholesterolemic nonhuman primates. Hum Gene Ther. 9, 815-821 (1998).
- Newman, K. D., et al. Adenovirus-mediated gene transfer into normal rabbit arteries results in prolonged vascular cell activation, inflammation, and neointimal hyperplasia. J Clin Invest. 96, 2955-2965 (1995).
- Jiang, B., et al. Helper-dependent adenovirus is superior to first-generation adenovirus for expressing transgenes in atherosclerosis-prone arteries. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 31, 1317-1325 (2011).
- Gruchala, M., et al. Gene transfer into rabbit arteries with adeno-associated virus and adenovirus vectors. J Gene Med. 6, 545-554 (2004).
- Lee, Y. T., et al. Mouse models of atherosclerosis: a historical perspective and recent advances. Lipids Health Dis. 16, 12 (2017).
- Manning, M. W., Cassi, L. A., Huang, J., Szilvassy, S. J., Daugherty, A. Abdominal aortic aneurysms: fresh insights from a novel animal model of the disease. Vasc Med. 7, 45-54 (2002).
- Lai, C. H., et al. Recombinant adeno-associated virus vector carrying the thrombomodulin lectin-like domain for the treatment of abdominal aortic aneurysm. Atherosclerosis. 262, 62-70 (2017).
- Tan, P. H., et al. Antibody targeted gene transfer to endothelium. J Gene Med. 5, 311-323 (2003).
- Nicklin, S. A., White, S. J., Nicol, C. G., Von Seggern, D. J., Baker, A. H. In vitro and in vivo characterisation of endothelial cell selective adenoviral vectors. J Gene Med. 6, 300-308 (2004).
- White, K., et al. Engineering adeno-associated virus 2 vectors for targeted gene delivery to atherosclerotic lesions. Gene Ther. 15, 443-451 (2008).
- Kaliberov, S. A., et al. Retargeting of gene expression using endothelium specific hexon modified adenoviral vector. Virology. 447, 312-325 (2013).
- Schulick, A. H., et al. Established immunity precludes adenovirus-mediated gene transfer in rat carotid arteries. Potential for immunosuppression and vector engineering to overcome barriers of immunity. J Clin Invest. 99, 209-219 (1997).
- Hollingdale, M. R., Sedegah, M., Limbach, K. Development of replication-deficient adenovirus malaria vaccines. Expert Rev Vaccines. 16, 261-271 (2017).
