Et Recovery hjertemassage Bypass Model uden Transfusion eller inotrope agenter i rotter
Summary
Vi præsenterer her, en protokol for at beskrive en simpel genoprettelsesmodel hjertemassage bypass uden transfusion eller inotrope agenter i en rotte. Denne model giver mulighed for undersøgelse af de langsigtede flere orgel sequelae af hjertemassage bypass.
Abstract
Hjertemassage bypass (CPB) er uundværlig i hjerte-kar-kirurgi. På trods af den dramatiske forfinelse af CPB teknik og hjælpemidler, multi orgel komplikationer relateret til langvarig CPB stadig kompromittere resultatet af hjerte-kar-kirurgi, og kan forværre postoperativ morbiditet og mortalitet. Dyremodeller recapitulating den kliniske brug af CPB aktiverer en præcisering af de patofysiologiske processer, der opstår under CPB og lette prækliniske undersøgelser for at udvikle strategier beskytte mod disse komplikationer. Rotte CPB modeller er fordelagtig på grund af deres større omkostningseffektivitet, praktisk eksperimenterende processer, rigelige testmetoder i den genetiske eller protein niveauer og genetiske sammenhæng. De kan bruges til at undersøge den immun ordning aktivisering og syntese af proinflammatoriske cytokiner, kompliment aktivering og produktion af ilt frie radikaler. Rotte-modeller har været raffineret og gradvist er sket store dyre modeller. Her, beskriver vi en simpel CPB model uden transfusion og/eller inotrope agenter i en rotte. Denne gendannelsesmodel giver mulighed for undersøgelse af de langsigtede flere orgel sequelae af CPB.
Introduction
I 1953, Dr. John H. Gibbon Jr. med held udført den første hjertekirurgi bruger CPB1, og efterfølgende blev det en afgørende modalitet i hjerte-kar-kirurgi. Mens de teknikker og udstyr har været dramatisk raffineret, multi orgel komplikationer relateret til CPB stadig kompromittere resultatet af hjerte-kar-kirurgi, og kan påvirke postoperativ morbiditet og mortalitet2. CPB-relaterede organskader er forårsaget af immunsystemet aktivering og syntese af proinflammatoriske cytokiner, kompliment aktivering og produktion af ilt frie radikaler2. Dens Patofysiologi, men er ikke fuldt klarlagt.
Dyremodeller recapitulating den kliniske brug af CPB aktiverer afklaring af de patofysiologiske processer under og efter CPB; Dette kan lette prækliniske undersøgelser i at udvikle strategier til at undgå disse komplikationer. Siden Popovic mfl. første rapporteret en rotte CPB model i 19673, rotte CPB modeller har været raffineret, og har efterhånden taget i stedet for store dyr modeller på grund af omkostningseffektiviteten, praktisk eksperimenterende processer og et væld af testmetoder i genetiske og protein niveauer. Derudover kan indavlede rotter være genetisk identiske, reducere mulige biologiske bias.
Fabre mfl. først etableret en gendannelsesmodel, der tillod undersøgelsen af de langsigtede flere orgel sequelae af CPB4. Fordelene ved denne enkle overlevelse model er fleksibilitet (CPB flow og varighed), stabil forudsætning og reproducerbarhed i systemisk inflammation. Rotte CPB modeller er blevet afgørende for undersøgelse af terapeutiske strategier, der har til formål at forhindre flere orgel skade under CPB5, og forskellige modeller til simulering af de kliniske situationer under CPB er for nylig blevet udviklet. De Lange mfl. udviklet et hjertestop model, som kan bruges til at karakterisere de enzymatiske, genetiske og histologiske svar relateret til Myokardie skade7. Peters mfl. arrangeret myokardieinfarkt og kontrolleret reperfusion ved hjælp af en minituariseret CPB model til at analysere hjerte funktionssvigt gennem fokal iskæmi og reperfusion skade8. Jungwirth mfl. først etableret en dyb hypotermiske kredsløbssygdomme anholdelse (DHCA) model, som kan belyse den globale iskæmi og reperfusion skade af DHCA og understøtter potentielle neuroprotektive strategier6. Undersøgelser ved hjælp af DHCA undersøge indflydelsen af hypotermi, reperfusion, og/eller hæmolyse-udløst signalering begivenheder9. Dyb hypotermi kan påvirke aktivering og inaktivering af forskellige enzymer og veje og mekanismerne, der forbliver ukendt10. På den anden side skal hjertestop modeller eller hjertet iskæmi modeller bruges til at undersøge iskæmi og reperfusion hjerte skade. Disse forskellige rotte CPB modeller, der meget sammenfatte menneskelige CPB kan afsløre patologiske processer relateret til CPB og bidrage til at afbøde CPB-relaterede komplikationer.
Denne protokol viser en simpel CPB model uden transfusion eller inotrope agenter i en rotte. Denne model giver mulighed for undersøgelse af langsigtede flere orgel sequelae af CPB.
Protocol
Representative Results
Discussion
I denne rotte CPB model, serum og lunge udtryk niveauer af inflammatoriske cytokiner og HMGB-1, en nøgle transskription faktor, der regulerer de inflammatoriske respons, dramatisk øget efter CPB. Tidligere kliniske studier viste at serum sekretion af HMGB-1-niveau er forhøjet i patienter i hjerte-kar-kirurgi11, og peak serum HMGB-1 niveau under CPB var forbundet med mere alvorlige systemiske inflammatoriske respons syndrom og lunge iltning værdiforringelse efter CPB12. …
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Opskrivning er udvidet til Dr. T. Taki og Dr. M. Funamoto for deres tekniske support.
Materials
| Rodent Ventilator 7025 | Ugo Basile | 7025 | Ventilator |
| OxiQuant B | ENVITEC | 46-00-0023 | Oxygen Sensor |
| CMA 450 Temperature Controller | CMA | 8003759 | Temperature Controller |
| CMA 450 Heating Pad | CMA | 8003763 | |
| CMA 450 Rectal Probe | CMA | 8003761 | |
| DIN(8) to Disposable BP Transducer | ADInstruments | MLAC06 | |
| Disposable BP Transducer | ADInstruments | MLT0670 | |
| IX-214 Data Recorder | iWorx Systems | IWX-214 | amplifier |
| LabScribe software | iWorx Systems | software | |
| Roller pump | Furue Science | Model RP-VT | pump |
| Happy Cath | Medikit | EB 19G 4HCLs PP | 17-gauge multiorifice angiocatheter |
| SURFLO ETFE I.V. Catheter | Terumo | SR-OX2419CA | 24-gauge angiocatheter |
| Oxygenator | Mera | HPO-002 | |
| CPB circuit | Mera | custom-made | |
| Hespander fluid solution | Fresenius Kabi | 3319547A4035 | Hydroxyethyl starch |
Riferimenti
- Gibbon, J. H. Application of a mechanical heart and lung apparatus to cardiac surgery. Minn Med. 37 (3), 171-185 (1954).
- Apostolakis, E., Filos, K. S., Koletsis, E., Dougenis, D. Lung dysfunction following cardiopulmonary bypass. J Cardiac Surg. 25 (1), 47-55 (2010).
- Popovic, P., Horecky, J., Popovic, V. P. Instrumental responses in rats after hypothermic cardiopulmonary by-pass. P Soc Exp Biol Med. 126 (1), 225-228 (1967).
- Fabre, O., et al. A recovery model of partial cardiopulmonary bypass in the rat. Perfusion. 16 (3), 215-220 (2001).
- Hirao, S., Masumoto, H., Minatoya, K. Rat cardiopulmonary bypass models to Investigate multi-organ injury. Clin Surg. 2, 1-6 (2017).
- Jungwirth, B., et al. Neurologic outcome after cardiopulmonary bypass with deep hypothermic circulatory arrest in rats: description of a new model. J Thorac Cardiov Sur. 131 (4), 805-812 (2006).
- de Lange, F., Yoshitani, K., Podgoreanu, M. V., Grocott, H. P., Mackensen, G. B. A novel survival model of cardioplegic arrest and cardiopulmonary bypass in rats: a methodology paper. J Cardiothorac Surg. 3, 51 (2008).
- Peters, S., et al. An experimental model of myocardial infarction and controlled reperfusion using a miniaturized cardiopulmonary bypass in rats. Interact Cardiovasc Th. 19 (4), 561-564 (2014).
- Engels, M., et al. A cardiopulmonary bypass with deep hypothermic circulatory arrest rat model for the investigation of the systemic inflammation response and induced organ damage. J Inflamm. 11 (26), (2014).
- Pinto, A., et al. The extracellular isoform of superoxide dismutase has a significant impact on cardiovascular ischaemia and reperfusion injury during cardiopulmonary bypass. Eur J Cardio-Thorac. 50 (6), 1035-1044 (2016).
- Zhang, Z., Wu, Y., Zhao, Y., Xiao, X., Liu, J., Zhou, X. Dynamic changes in HMGB1 levels correlate with inflammatory responses during cardiopulmonary bypass. Exp Ther Med. 5 (5), 1523-1527 (2013).
- Kohno, T., et al. Impact of serum high-mobility group box 1 protein elevation on oxygenation impairment after thoracic aortic aneurysm repair. Heart Vessels. 26 (3), 306-312 (2011).
- Tseng, C. C., et al. Impact of serum biomarkers and clinical factors on intensive care unit mortality and 6-month outcome in relatively healthy patients with severe pneumonia and acute respiratory distress syndrome. Dis Markers. 2014, (2014).
- Paparella, D., Yau, T. M., Young, E. Cardiopulmonary bypass induced inflammation: pathophysiology and treatment. An update. Eur J Cardio-Thorac. 21 (2), 232-244 (2002).
- Hirao, S., et al. Recombinant human soluble thrombomodulin prevents acute lung injury in a rat cardiopulmonary bypass model. J Thorac Cardiov Sur. , (2017).
- Yamazaki, S., Inamori, S., Nakatani, T., Suga, M. Activated protein C attenuates cardiopulmonary bypass-induced acute lung injury through the regulation of neutrophil activation. J Thorac Cardiov Sur. 141 (5), 1246-1252 (2011).
- Wang, C. T., Zhang, L., Wu, H. W., Wei, L., Xu, B., Li, D. M. Doxycycline attenuates acute lung injury following cardiopulmonary bypass: involvement of matrix metalloproteinases. Int J Clin Exp Patho. 7 (11), 7460-7468 (2014).
- Liu, K., et al. Curcumin attenuates cardiopulmonary bypass-induced lung oxidative damage in rats. J Cardiovasc Pharm T. 17 (4), 395-402 (2012).
- Taki, T., et al. Fetal mesenchymal stem cells ameliorate acute lung injury in a rat cardiopulmonary bypass model. J Thorac Cardiov S. 153 (3), 726-734 (2017).
- Zhu, X., et al. Establishment of a novel rat model without blood priming during normothermic cardiopulmonary bypass. Perfusion. 29, 63-69 (2014).
- Inoue, K., et al. Deep anesthesia worsens outcome of rats with inflammatory responses. Inflamm Res. 65 (7), 563-571 (2016).
- Bradfield, J. F., Schachtman, T. R., McLaughlin, R. M., Steffen, E. K. Behavioral and physiologic effects of inapparent wound infection in rats. Lab Anim Sci. 42 (6), 572-578 (1992).
