Bewertung der Plasma Koagulation am Lebergewebe in einem großen Tiermodell In Vivo
Summary
Hier präsentieren wir ein Protokoll zur Plasma-Koagulation in Lebergewebe in Vivoexperimentell zu beurteilen. In einem porcinen Modell Mikrozirkulation wird mittels Laser Doppler untersucht, Koagulation Tiefe bemisst sich histologisch, Temperatur am Standort der Gerinnung durch Infrarot-Thermometer und Thermografische Kamera Kanal Dichtwirkung ist dokumentiert durch Berstdruck Experimente.
Abstract
Plasma Koagulation als eine Form der elektrokauter wird in der Leber Chirurgie seit Jahrzehnten zum Versiegeln Sie der große Leber Schnittfläche nach großen Hepatektomie, Blutungen zu einem späteren Zeitpunkt zu verhindern. Die genauen Auswirkungen der Plasma Koagulation im Lebergewebe sind nur unzureichend untersucht. In unserem porcinen Modell können in der Nähe der klinischen Anwendung der koagulationseffekte untersucht werden. Eine kombinierte Laser Doppler Durchflussmesser und Spektralfotometer Dokumente Mikrozirkulation ändert während Koagulation in 8 mm Gewebe Tiefe nicht-invasiv, quantifizierbare Informationen über Blutstillung jenseits der subjektive klinische Eindruck. Die Temperatur am Standort der Koagulation wird mit einem Infrarot-Thermometer Prior und Post-Koagulation und eine Thermografische Kamera während Gerinnung beurteilt, eine Messung der Gastemperatur Strahl ist nicht möglich, da die Obergrenze der Geräte. Die Tiefe der Koagulation wird mikroskopisch auf Hämatoxylin/Eosin befleckt Abschnitte nach der Kalibrierung mit einem Objekt Mikrometer gemessen und gibt eine genaue Information über das macht Einstellung-Koagulation Tiefe-Verhältnis. Die Dichtwirkung wird auf die Gallengänge untersucht, da es nicht möglich für ein Plasma-Coagulator, größere Blutgefäße zu versiegeln. Burst Druck Experimente heraus auf explantierten Organe auszuschließen Blutdruck im Zusammenhang mit Effekten.
Introduction
Argon-Plasma-Koagulation (APC) ist ein weit verbreitetes Instrument im Bauchchirurgie seit mehr als drei Jahrzehnten1,2. Es ist ein Standardverfahren für die Erreichung der sekundären Hämostase nach großen Hepatektomie durch Versiegelung der Leberzellkrebs Oberfläche, um zu verhindern, dass später Blutungen3geschnitten. Plasma-Koagulation ist eine spezielle Form der Radiofrequenz elektrokauter, die die elektrische Energie über einen Bogen von ionisiertem Gas liefert. Bereitstellung von monopolaren elektrothermische Blutstillung, hat diese berührungslose Technik den Vorteil, die Elektrode an das Gewebe4halten zu verhindern. Der ionisierte Gas-Strahl richtet sich automatisch auf den Bereich des geringsten elektrischen Widerstands und wird abgewiesen, wenn Widerstand aufgrund von Austrocknung auf andere Bereiche, die noch nicht ausgetrocknet steigt. Dadurch entsteht eine einheitliche begrenzte Tiefe Koagulation5,6. Faktoren, die die Gerinnung Wirkung sind die Aktivierung Zeit, Einstellung der Leistung des Geräts Koagulation und der Abstand von der Sonde des Gewebes. Helium ist ein weiteres Trägergas, die für Plasma-Koagulation7verwendet werden können. Aktuelle klinische Studien konzentriert sich auf klinische Ergebnisse anstatt histologische und funktionelle Ergebnisse3,8,9, während experimentelle Studien konzentrierte sich auf in-vitro- Untersuchungen10 oder Experimente an isolierten PERFUNDIERTEN Organen11.
Das zugrunde liegende Protokoll ermöglicht die Studie über die Auswirkungen der Plasma-Koagulation in einem großen Tier-Modell in der Nähe der klinischen Anwendung unter Verwendung von menschlichen Standardausrüstung auf Schweine: Mikrozirkulation ist nicht-invasiv durch eine Laser-Doppler-Durchflussmesser bewertet und Spektralphotometer, die klinische Standardtool für diese Indikation12,13ist. Temperaturänderungen während Koagulation werden mit einem Infrarot-Thermometer und eine Thermografische Kamera überwacht. Die Tiefe der Koagulation wird auf histologischen Hämatoxylin/Eosin befleckt Abschnitte nach der Ernte von Gewebeproben gemessen. Für den Vergleich mit anderen Mitteln zur sekundären Hämostase werden platzen Druck Versuche durchgeführt. Im Gegensatz zu den zuvor beschriebenen Techniken14, diese werden durchgeführt auf explantierten Organe auszuschließende Blutdruck im Zusammenhang mit Effekten. Zusätzlich zu den beschriebenen Untersuchungen über die lokalen Auswirkungen der Plasma-Koagulation können standard Blutuntersuchungen auch im porcinen Modell durchgeführt werden.
Protocol
Representative Results
Discussion
Nager-Modelle für die Leberchirurgie werden für eine lange Zeit16gebildet. Dennoch große Tiermodellen bieten gewisse Vorteile: keine mikrochirurgische Ausrüstung ist notwendig, da operative Standardausrüstung für Menschen angewendet werden kann, Operationstechniken vergleichbar mit klinischen Verwendung sind und klinische Standardauswertung Methoden können sein übertragen auf die Experimente. Beispielsweise können ohne die Notwendigkeit für spezielle Labor-Prüfverfahren (<strong class="…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Die Autoren haben keine Bestätigungen.
Materials
| Xylazine 20 mg/mL | Vetoquinol GmbH | Xylapan | |
| Ketamine 100 mg/mL | Ceva GmbH | Ceva Ketamine Injection | |
| Atropine 100 mg / 10 mL | Dr. Franz Köhler Chemie GmbH | Atropinsulfat Köhler 100mg Amp. | |
| Propofol | Fresenius Kabi GmbH | Propofol 1% MCT Fresenius | |
| Fentanyl | KG Rotexmedica GmbH | Fentanyl 0,5mg Rotexmedica | |
| Isoflurane | Abbot GmbH | Forene 100% (V/V) 250 mL | |
| Ringer's lactate solution | Baxter Deutschland GmbH | sodium 131mmol/l, potassium 5 mmol/l, calcium 2 mmol/l, cloride 111 mmol/l, lactate 29 mmol/l | |
| Surgical disinfactant | Schülke & Mayr GmbH | Kodan Tinktur forte gefärbt 1l 104804 | |
| Motorized microscope | Nikon Instruments Europe | Eclipse TE2000-E | |
| Microscope camera | Nikon Instruments Europe | Digitalsight DS-Qi1Mc | |
| Imaging software | Nikon Instruments Europe | NIS elements Vers. 4.40 | |
| Plasma coagulator | Söring GmbH | CPC-1000 | |
| Argon gas | Linde AG | Argon 4.8 | |
| Helium gas | Linde AG | Helium 4.8 | |
| O2C | LEA Medizintechnik GmbH | O2C Version 1212 | with LF-2 or LF-3 probe |
| Infrared thermometer | Voltcraft | VOLTCRAFT IR 260-8S | |
| Thermographic camera | InfraTec GmbH | VarioCAM HD head 820 | |
| Thermographic analysis sofrtware | InfraTec GmbH | IRBIS 3 | |
| Mayer's Hematoxylin solution | Merck 1.09249 | ||
| Eosin solution | VWR International GmbH | Merck 1.09844 | |
| Rollerpump Masterflex L/S easy Load | Cole-Parmer Instrument Company | model 7518-10 | |
| Perfusorpump | B. Braun Melsungen AG | Perfusor secura FT | |
| Digital pressure meter | Greisinger electronic | GMH 3161 | |
| Perfusorsyringe, 50 mL | B. Braun Melsungen AG | REF 8728810 F | |
| Perfusor line, Type IV Standard, PVC Luer lock | B. Braun Melsungen AG | REF 8722960 | |
| 3-Way stopcock, Dicofix C35C | B. Braun Melsungen AG | REF 16494 C | |
| Silk 2-0. 3 metric | Resorba | REF H5F | |
| Vicryl 4-0 Sutupak | Ethicon | V1224H | |
| NaCl 0.9 % | B. Braun Melsungen AG |
Riferimenti
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