Tre-dimensionelle udskrivning af termoplastiske materialer til at oprette automatiseret sprøjte pumper med Feedback kontrol for mikrofluid programmer
Summary
Her præsenterer vi en protokol for at konstruere en pres-kontrollerede sprøjten pumpe skal bruges i mikrofluid applikationer. Denne sprøjten pumpe er fremstillet af en additively fremstillet krop, off-the-shelf hardware og open source elektronik. Den resulterende system er billige, enkel at bygge, og leverer velreguleret flydende flow for at aktivere hurtig mikrofluid forskning.
Abstract
Mikrofluidik er blevet et kritisk værktøj i forskning på tværs af biologiske, kemiske og fysiske videnskaber. En vigtig del af mikrofluid eksperimenter er en stabil væske håndtering system præcist levere et indløb strømningshastighed eller indgangstryk. Her har vi udviklet en sprøjten pumpesystem i stand til at kontrollere og regulere væske indgangstryk leveret til en mikrofluid enhed. Dette system blev udviklet ved hjælp af lave omkostninger materialer og tilsætningsstof fremstillingsindustrien principper, løftestangsvirkningen tredimensionale (3D) udskrivning af termoplastiske materialer og off-the-shelf komponenter når det er muligt. Dette system består af tre hovedkomponenter: en sprøjten pumpe, en tryktransduceren og en programmerbar microcontroller. I dette papir detalje vi et sæt protokoller for bearbejdning, montage og programmering denne sprøjten pumpesystem. Desuden har vi medtaget repræsentative resultater, der viser high-fidelity, feedback kontrol af indgangstryk ved hjælp af dette system. Vi forventer, at denne protokol giver forskere til at fabrikere lavpris-sprøjten pumpesystemer, sænker adgangsbarriere for brug af mikrofluidik i biomedicinsk, kemiske og materialeforskning.
Introduction
Mikrofluid værktøjer er blevet nyttig for videnskabsmænd i biologisk og kemisk forskning. På grund af lav lydstyrke udnyttelse, hurtig måling kapaciteter og veldefinerede flow profiler, mikrofluidik har fået trækkraft i genomisk og proteom forskning, high throughput screening, medicinsk diagnostik, nanoteknologi og encellede analyse1,2,3,4. Derudover muliggør fleksibilitet af mikrofluid enhed design let grundlæggende videnskabsforskning, som undersøger spatiotemporelle dynamikken i kulturperler bakteriel kolonier5.
Mange typer af væske indsprøjtning systemer er udviklet til at præcist levere strøm til mikrofluid enheder. Eksempler på sådanne benzinindsprøjtningssystemer peristaltiske og recirkulation pumper6, pres-controller systemer7og sprøjte pumper8. Disse indsprøjtning systemer, herunder sprøjte pumper, er ofte sammensat af dyre præcision manipuleret komponenter. Forstærke disse systemer med lukket kredsløb feedback kontrol af trykket i output flow øger prisen på disse systemer. Svar udviklet vi tidligere har et robust og billigt sprøjten pumpesystem, der bruger lukket kredsløb feedback kontrol for at regulere outputted flow pres. Ved hjælp af lukkede kredsløb trykregulering, er behovet for dyre præcision-manipuleret komponenter ophævet9.
Kombination af overkommelig 3D-udskrivning hardware og en betydelig vækst i tilknyttede open source software har gjort design og fabrikation af mikrofluid enheder i stigende grad tilgængelige for forskere fra en lang række discipliner10. De systemer, der anvendes til kørsel væske gennem disse enheder er dog stadig dyrt. For at imødegå dette behov for en billig flydende kontrolsystem, udviklet vi et design, der kan være fremstillet af forskere i laboratoriet, der kræver kun et lille antal forsamlingen trinene. Trods sin lave omkostninger og ligetil forsamling, dette system kan give præcise flow-styringen og udgør et alternativ til kommercielt tilgængelige, lukket kredsløb sprøjten pumpesystemer, som kan være uoverkommeligt dyre.
Her, vi leverer protokoller for konstruktionen og brugen af det lukkede kredsløb kontrolleres sprøjten pumpesystem vi udviklet (figur 1). Væsken håndtering system består af en fysisk sprøjten pumpe inspireret af et tidligere studie11, en microcontroller og et piezoresistiv pres sensor. Når samlet og programmeret med en proportional-integral-derivat (PID) controller, er systemet i stand til at levere en velreguleret, pres-drevet strøm til mikrofluid enheder. Dette giver en billig og fleksibel alternativ til høje omkostninger kommercielle produkter, gør det muligt for en bredere gruppe af forskere at bruge mikrofluidik i deres arbejde.
Protocol
Representative Results
Discussion
Her, præsenterede vi et nyt design for en sprøjten pumpesystem med lukket kredsløb trykregulering. Dette blev opnået ved at integrere en 3D-trykt sprøjten pumpe med et piezoresistiv pres sensor og en open source microcontroller. Ved at ansætte en PID-controller, var vi i stand til præcist styre indgangstrykket og give hurtige svartider samtidig samtidig opretholde stabilitet om et sæt punkt.
Mange eksperimenter ved hjælp af mikrofluid enheder kræver en præcis fluidic kontrol og udny…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Forfatterne anerkender støtte fra Office of Naval Research awards N00014-17-12306 og N00014-15-1-2502, samt fra Air Force Office of videnskabelig Research award FA9550-13-1-0108 og National Science Foundation Grant No. 1709238.
Materials
| Arduino IDE | Arduino.org | Arduino Uno R3 control software | |
| Header Connector, 2 Positions | Digi-Key | WM4000-ND | |
| Header Connector, 3 Positions | Digi-Key | WM4001-ND | |
| Header Connector, 4 Positions | Digi-Key | WM4002-ND | |
| Hook-up Wire, 22 Gauge, Black | Digi-Key | 1528-1752-ND | |
| Hook-up Wire, 22 Gauge, Blue | Digi-Key | 1528-1757-ND | |
| Hook-up Wire, 22 Gauge, Red | Digi-Key | 1528-1750-ND | |
| Hook-up Wire, 22 Gauge, White | Digi-Key | 1528-1768-ND | |
| Hook-up Wire, 22 Gauge, Yellow | Digi-Key | 1528-1751-ND | |
| Instrumentation Amplifier | Texas Instruments | INA122P | |
| Microcontroller, Arduino Uno R3 | Arduino.org | A000066 | |
| Mini Breadboard | Amazon | B01IMS0II0 | |
| Power Supply | BK Precision | 1550 | |
| Pressure Sensor | PendoTech | PRESS-S-000 | |
| Rectangular Connectors, Housings | Digi-Key | WM2802-ND | |
| Rectangular Connectors, Male | Digi-Key | WM2565CT-ND | |
| Resistors, 10k Ohm | Digi-Key | 1135-1174-1-ND | |
| Resistors, 330 Ohm | Digi-Key | 330ADCT-ND | |
| Stepper Motor Driver, EasyDriver | Digi-Key | 1568-1108-ND | |
| USB 2.0 Cable, A-Male to B-Male | Amazon | PC045 | |
| 3D Printed Material, Z-ABS | Zortrax | A variety of colors are available | |
| 3D Printer | Zortrax | M200 | Printing out the syringe pump components |
| Ball Bearing, 17x6x6mm | Amazon | B008X18NWK | |
| Hex Machine Screws, M3x16mm | Amazon | B00W97MTII | |
| Hex Machine Screws, M3x35mm | Amazon | B00W97N2UW | |
| Hex Nut, M3 0.5 | Amazon | B012U6PKMO | |
| Hex Nut, M5 | Amazon | B012T3C8YQ | |
| Lathe Round Rod | Amazon | B00AUB73HW | |
| Linear Ball Bearing | Amazon | B01IDKG1WO | |
| Linear Flexible Coupler | Amazon | B010MZ8SQU | |
| Steel Lock Nut, M3 0.5 | Amazon | B000NBKLOQ | |
| Stepper Motor, NEMA-17, 1.8o/step | Digi-Key | 1568-1105-ND | |
| Syringe, 10mL, Luer-Lok Tip | BD | 309604 | |
| Threaded Rod | Amazon | B01MA5XREY | |
| 1H,1H,2H,2H-Perfluorooctyltrichlorosilane | FisherScientific | AAL1660609 | |
| Camera Module | Raspberry Pi Foundation | V2 | |
| Compact Oven | FisherScientific | PR305220G | Baking PDMS pre-polymer mixture and the device |
| Dispensing Needle, 22 Gauge | McMaster-Carr | 75165A682 | |
| Dispensing Needle, 23 Gauge | McMaster-Carr | 75165A684 | |
| Fisherbrand Premium Cover Glasses | FisherScientific | 12-548-5C | |
| Glass Culture Petri Dish, 130x25mm | American Educational Products | 7-1500-5 | |
| Plasma Cleaner | Harrick Plasma | PDC-32G | Binding the cover glass with the PDMS device |
| Razor Blades | FisherScientific | 7071A141 | |
| Scotch Magic Tape | Amazon | B00RB1YAL6 | |
| Single-board Computer | Raspberry Pi Foundation | Raspberry Pi 2 model B | |
| Smart Spatula | FisherScientific | EW-06265-12 | |
| Sylgard 184 Silicone Elastomer Kit | FisherScientific | NC9644388 | |
| Syringe Filters | Thermo Scientific | 7252520 | |
| Tygon Tubing | ColeParmer | EW-06419-01 | |
| Vacuum Desiccator | FisherScientific | 08-594-15C | Degasing PDMS pre-polymer mixture and coating fluorosilane on the master mold |
| Weighing Dishes | FisherScientific | S67090A |
Riferimenti
- Sackmann, E. K., Fulton, A. L., Beebe, D. J. The present and future role of microfluidics in biomedical research. Nature. 507 (7491), 181-189 (2014).
- Duncombe, T. A., Tentori, A. M., Herr, A. E. Microfluidics: reframing biological enquiry. Nature Reviews Molecular Cell Biology. 16 (9), 554-567 (2015).
- Prakadan, S. M., Shalek, A. K., Weitz, D. A. Scaling by shrinking: empowering single-cell ‘omics’ with microfluidic devices. Nature Reviews Genetics. 18 (6), (2017).
- Kim, Y., Langer, R. Microfluidics in nanomedicine. Reviews in Cell Biology and Molecular Medicine. 1, 127-152 (2015).
- Rusconi, R., Garren, M., Stocker, R. Microfluidics expanding the frontiers of microbial ecology. Annual Review of Biophysics. 43, 65-91 (2014).
- Skafte-Pedersen, P., Sabourin, D., Dufva, M., Snakenborg, D. Multi-channel peristaltic pump for microfluidic applications featuring monolithic PDMS inlay. Lab on a Chip. 9 (20), 3003-3006 (2009).
- Heo, Y. J., Kang, J., Kim, M. J., Chung, W. K. Tuning-free controller to accurately regulate flow rates in a microfluidic network. Scientific Reports. 6, 23273 (2016).
- Kuczenski, B., LeDuc, P. R., Messner, W. C. Pressure-driven spatiotemporal control of the laminar flow interface in a microfluidic network. Lab on a Chip. 7 (5), 647-649 (2007).
- Lake, J. R., Heyde, K. C., Ruder, W. C. Low-cost feedback-controlled syringe pressure pumps for microfluidics applications. PLoS One. 12 (4), (2017).
- Kong, D. S., et al. Open-source, community-driven microfluidics with metafluidics. Nature Biotechnology. 35 (6), 523-529 (2017).
- Wijnen, B., Hunt, E. J., Anzalone, G. C., Pearce, J. M. Open-source syringe pump library. PLoS One. 9 (9), e107216 (2014).
- Ferry, M. S., Razinkov, I. A., Hasty, J. Microfluidics for synthetic biology: from design to execution. Methods in Enzymology. , 295-372 (2011).
- . Arduino Libraries for Timer.h Available from: https://github.com/JChristensen/Timer (2018)
- . Arduino Libraries for AccelStepper.h Available from: https://github.com/adafruit/AccelStepper (2018)
- Lin, F., et al. Generation of dynamic temporal and spatial concentration gradients using microfluidic devices. Lab on a Chip. 4 (3), 164-167 (2004).
- Korczyk, P. M., Cybulski, O., Makulska, S., Garstecki, P. Effects of unsteadiness of the rates of flow on the dynamics of formation of droplets in microfluidic systems. Lab on a Chip. 11 (1), 173-175 (2011).
