संक्रामक निमोनिया मानव में सबसे आम संक्रमण के बीच है । vivo मॉडल में एक उपयुक्त रोग रोगजनन को समझने और उपंयास चिकित्सकीय की प्रभावकारिता के परीक्षण के लिए महत्वपूर्ण है । इस murine oropharyngeal आकांक्षा निमोनिया मॉडल के साथ, एक इन घातक संक्रमण के खिलाफ रोगजनन और नए उपचार की जांच कर सकते हैं ।
Murine संक्रमण मॉडल रोग रोगजनन को समझने के लिए महत्वपूर्ण हैं और करणीय रोगजनकों का मुकाबला करने के लिए डिज़ाइन किए गए उपंयास चिकित्सकीय की प्रभावकारिता का परीक्षण । संक्रामक निमोनिया सबसे आम क्लिनिक में रोगियों द्वारा प्रस्तुत संक्रमण के बीच है और इस तरह vivo मॉडल में एक उपयुक्त वारंट । ठेठ निमोनिया मॉडल intranasal टीका, जो फेफड़ों के बाहर अत्यधिक जीवों जमा का उपयोग करें, बंद लक्ष्य जटिलताओं और लक्षण, जैसे साइनसाइटिस, gastritis, आंत्रशोथ, शारीरिक आघात, या एयरोसोल की नकल करने के लिए microparticle धुंध के कारण वायरल, तपेदिक, या कवक निमोनिया की अधिक विशिष्ट फैला । इन मॉडलों को सही ढंग से विशिष्ट समुदाय के रोगजनन-या स्वास्थ्य देखभाल प्राप्त बैक्टीरियल निमोनिया को प्रतिबिंबित नहीं है । इसके विपरीत, oropharyngeal आकांक्षा निमोनिया के इस murine मॉडल हेल्थकेयर-उपार्जित निमोनिया में छोटी बूंद मार्ग की नकल । anesthetized चूहों के oropharynx में बैक्टीरिया सस्पेंशन के Inoculating ५० µ एल की सजगता आकांक्षा का कारण बनता है, जो निमोनिया में परिणाम है । इस मॉडल के साथ, एक निमोनिया के रोगजनन की जांच कर सकते हैं-रोगजनकों और नए उपचार के कारण इन रोगों का मुकाबला करने के लिए ।
लोअर श्वसन संक्रमण दुनिया के घातक संचारी रोग और विकासशील देशों में मौत का सबसे आम कारण है1. विश्व स्तर पर, इन संक्रमणों से अधिक ३,२००,००० मौतें1के लिए खाते । इसके अलावा, nosocomial निमोनिया स्वास्थ्य देखभाल के अधिग्रहण के सबसे आम और घातक रूपों में से एक है, और सबसे एंटीबायोटिक प्रतिरोधी रोगजनकों2,3के कारण होता है । दोनों समुदाय-अधिग्रहीत और nosocomial निमोनिया के लिए बैक्टीरियल निमोनिया के अधिग्रहण का विशिष्ट मार्ग alveoli में oropharyngeal सामग्री की आकांक्षा है । इन रोगों का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया Murine मॉडल अक्सर intranasal टीका4का उपयोग करें, फेफड़ों के बाहर बैक्टीरिया के बहुत जमा, बंद लक्ष्य जटिलताओं और साइनसाइटिस और शारीरिक आघात है, जो रोग के साथ incongruent रहे हैं जैसे लक्षण के कारण मानव में प्रगति है कि मॉडल का अनुकरण करने के लिए डिजाइन किए गए थे । अंय मॉडलों सांस लेना कक्षों और micromisting उपकरणों, जो और अधिक सही वायरल, तपेदिक, और कवक निमोनिया नकल का उपयोग कर सकते हैं, लेकिन ठेठ बैक्टीरियल निमोनिया के लिए अधिग्रहण के सामांय मार्ग दोहराऊंगा सही नहीं है ।
murine oropharyngeal आकांक्षा निमोनिया मॉडल प्राकृतिक मार्ग और बैक्टीरियल निमोनिया के रोगजनन अनुकरण करने के लिए उपयोग किया जा सकता है । द्वारा inoculating ५० µ एल बैक्टीरियल सस्पेंशन के oropharynx में anesthetized चूहों का उपयोग कर एक पिपेट, सजगता आकांक्षा मग्न, जो संक्रामक निमोनिया में परिणाम. इस मॉडल का उपयोग कर, एक निमोनिया के रोगजनन की जांच कर सकते हैं-रोगजनकों और नए उपचार एक उच्च निष्ठा मॉडल के साथ इन रोगों का मुकाबला करने के लिए, अधिक आकांक्षा निमोनिया संक्रमण के अनुरूप मानव में मनाया. इसके अतिरिक्त, मौखिक गुहा5,6के माध्यम से संक्रमित समान मॉडल है कि इस मॉडल के विपरीत, यह सुनिश्चित करता है कि पूर्ण इनोक्युलम फेफड़ों के बजाय आंत तक पहुंचता है, जहां यह बंद का कारण हो सकता है साइट सूजन और संक्रमण, gastritis के रूप में और आंत्रशोथ । अंत में, एक और प्रकाशित मॉडल है कि श्वासनली7के माध्यम से एक laryngoscope और inoculates की आवश्यकता के विपरीत, इस मॉडल एक airway सुई के साथ gavage बाधा नहीं है और इनोक्युलम प्रसव के लिए इंजेक्शन की आवश्यकता नहीं है । इसके बजाय, टीका माउस के प्राकृतिक आकांक्षा पलटा पर निर्भर करता है ।
यह सुनिश्चित करने के लिए, चूहे लघु मनुष्य नहीं हैं । माउस मॉडल से प्राप्त परिणामों के संदर्भ में विचार किया जाना चाहिए और बाद में मनुष्यों के लिए लागू करने के लिए व्याख्या की, मतभेदों पर आधारित है और दोन?…
The authors have nothing to disclose.
इस काम के राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान में एलर्जी और संक्रामक रोगों के इंस्टीट्यूट द्वारा समर्थित किया गया [अनुदान संख्या R01 AI117211, R01 AI130060, R21 AI127954, और R42 AI106375 को बी एस] और अमेरिकी खाद्य एवं औषधि प्रशासन [संविदा HHSF223201710199C को BML] ।
Agar | BD | 214530 | Combine with TSB to make TSA |
Beads, Borosilicate Glass | Kimble | 135003 | Sterilize by baking or autoclaving before each use |
Beaker, 250 mL | Pyrex | 1003 | Used during precise aliquoting of concentrated bacterial inocula |
Centrifuge | Sorvall | ST 40R | Capable of 4,000×g at 4°C |
Chamber for Anesthesia | Kent Scientific Corporation | VetFlo-0720 | Accommodates up to 5 mice |
Cryomold, Intermediate Size | Sakura Tissue-Tek | 4566 | Disposable vinyl specimen molds, 15×15×5 mm |
Dental Floss | Oral-B | 37000469537 | Tie to stable post approx. 6" above table height |
Forceps | VWR | 82027-440 | Used to gently pull tongue out of mouse's mouth |
Homogenizer for Lung Tissue | Omni International | TM125-115 | Autoclave before first use; rinse between samples |
Isoflurane for Anesthesia | Abbott | 10015516 | Alternative drug can be used; modify procedure accordingly |
iSTAT Cartridge | Abbott | 03P79-25 | Various cartridges are available to suit your needs |
Ketamine, 100 mg/mL | Western Medical Supply | 4165 | Dilute 1:10 in PBS to 1 mg/mL and combine with Xylazine at 1 mg/mL |
Ointment for Eyes | Akorn | Tears Renewed | Avoid touching eye with tip of dispenser |
Optimal Cutting Temperature (O.C.T.) Compound | Fisher Scientific | 23-730-571 | Used to freeze lung samples at -80 °C to prepare for pathology sectioning |
Petri Dish | VWR | 25384-302 | Polystyrene, disposable, sterilized, 100×15 mm |
Phosphate-Buffered Saline (PBS) | Corning | 21-031-CM | Dulbecco's PBS without calcium and magnesium |
Pipette Tips, 200-μL | VWR | 10017-044 | Autoclave before use |
Pipetter, 200-μL | Gilson | Pipetman P200 | Autoclave and calibrate before use |
Spreader, Bacterial Cell | Bel-Art | F377360006 | Sterilize by baking or autoclaving before each use |
Stir Bar, Magnetic, 7.9 mm Diameter × 38.1 mm Length | VWR | 58948-150 | Used for stiring concentrated bacterial inocula during aliquoting |
Stir Plate, Magnetic | Corning | PC-620D | Used for stiring concentrated bacterial inocula during aliquoting |
Tryptic Soy Broth (TSB) | BD | 211822 | Combine with Agar to make TSA |
Vial, Conical, Sterile, 50 mL | Corning | 431720 | Used for preparing bacterial inocula |
Vial, Conical, Sterile, 500 mL | Corning | 431123 | Used to concentrate inocula for preparing frozen inocula |
Vial, Cryogenic, 2.0 mL | Corning | 430659 | Used for cryogenic storage of concentrated bacterial inocula |
Xylazine, 20 mg/mL | Akorn | AnaSed Injection | Dilute 1:20 in PBS to 1 mg/mL and combine with Ketamine at 1 mg/mL |