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Articolo metodologico

In Vitro Allevamento di api solitarie: uno strumento per valutare i fattori di rischio larvale

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DOI:

10.3791/57876

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16 luglio 2018

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In questo articolo

Sommario

Spray di fungicida per le piante di fioritura può esporre API solitarie ad alte concentrazioni di residui a carico di polline fungicida. Utilizzando esperimenti di laboratorio che coinvolgono in vitro-larve di ape allevati, questo studio indaga gli effetti interattivi di consumo fungicida-trattati polline derivato da piante ospite e non host.

Abstract

Anche se le api solitarie forniscono servizi di impollinazione cruciale per le colture selvagge e gestite, questo gruppo di specie-ricco è stato ampiamente trascurato negli studi di regolamento dei pesticidi. Il rischio di esposizione ai residui di fungicidi rischia di essere particolarmente elevato se lo spray si verifica su o in prossimità di piante ospiti mentre le api stanno raccogliendo polline per predisporre i loro nidi. Per specie di Osmia che consumano il polline da un selezionato gruppo di piante (oligolecty), l'impossibilità di utilizzare il polline di piante non host possa aumentare il loro fattore di rischio per la tossicità correlata al fungicida. Questo manoscritto descrive protocolli utilizzati per la posteriore con successo oligolectic mason API, lato di sensu di Osmia ribifloris , dall'uovo alla fase di prepupa all'interno di piastre per colture cellulari in condizioni di laboratorio standardizzati. Lo in vitro-api allevate sono successivamente utilizzate per studiare gli effetti della fonte di esposizione e polline di fungicida su fitness ape. Basato su un disegno fattoriale 2 × 2 completamente attraversato, l'esperimento esamina gli effetti principali e interattivi della fonte di esposizione e polline di fungicida su fitness larvale, quantificata dalla biomassa prepupa, tempo dello sviluppo larvale e sopravvivenza. Dei principali vantaggi di questa tecnica è che utilizzando in vitro-api allevate riduce la variabilità del fondo naturale e consente la modifica simultanea di più parametri sperimentali. Il protocollo descritto presenta uno strumento versatile per ipotesi test che coinvolgono la suite di fattori che incidono sulla salute delle API. Per gli sforzi di conservazione essere accolti con successo significativo, duraturo, tali intuizioni la complessa interazione di fattori fisiologici ed ambientali ape declini di guida si rivelerà per essere critici.

Introduzione

Dato il loro ruolo come gruppo dominante degli insetti impollinatori1, la perdita globale delle popolazioni di API rappresenta una minaccia per la sicurezza alimentare ed ecosistema stabilità2,3,4,5,6 ,7. Le tendenze in declino in entrambe le popolazioni di API gestite e selvatici sono state attribuite a diversi fattori di rischio condivisi tra cui frammentazione degli habitat, emergendo parassiti e agenti patogeni, perdita di diversità genetica e ....

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Protocollo

1. preparare le soluzioni di propiconazolo per esperimenti di esposizione fungicida

  1. Preparate 0,1 x soluzione fungicida sciogliendo volumi appropriati di propiconazolo commercialmente acquistati 14,3% in acqua sterile il giorno dell'esperimento. Assicurarsi che la unica soluzione fungicida preparata al momento è utilizzato per tutti i trattamenti.
  2. 23 µ l di 0.1 x soluzione fungicida per grammo di disposizione di polline per ottenere la massima concentrazione di propiconazolo precedentemente segnalato da polline dell'ape-raccolto24 (0,361 PPM o µ g di principio attivo g-1 di polline).

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Risultati

Larvale fitness è stato quantificato utilizzando tre metriche tempo inerente allo sviluppo (i) larvale, biomassa (ii) prepupa e (iii) percentuale sopravvivenza. Un ANOVA a due vie è stata condotta utilizzando l'esposizione fungicida (due livelli: nessun fungicida, fungicida) e fonte di polline (due livelli: Host polline, polline Non-host) come variabili indipendenti e dello sviluppo larvale ora come la variabile dipendente. L'effetto principale per l'esposizione di fungicida (F

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Discussione

Allevamento di API fuori loro canne nidificazione naturale, in condizioni di laboratorio, permette il testing di molteplici ipotesi relative al fitness larvale. Nella misura in cui non identificati fattori continuano a causare mortalità delle API, studi di valutazione del rischio utilizzando in vitro esperimenti possono aiutare identificare potenziali minacce e informare le pratiche di gestione per questo gruppo di specie-ricco degli impollinatori selvatici 12 ,

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Ringraziamenti

Gli autori ringraziano Kimball Clark e Tim Krogh per fornire Osmia nidificazione ance, Meredith Nesbitt e Molly Bidwell per assistenza in laboratorio, d. ssa Cameron Currie, Christelle Guédot, Terry Griswold, Michael Branstetter e tre utenti anonimi per loro osservazioni utili che il manoscritto è migliorato. Questo lavoro è stato sostenuto USDA-Agricultural Research Service appropriato (attuale ricerca Information System #3655-21220-001), Wisconsin Dipartimento dell'agricoltura, commercio e tutela dei consumatori (#197199), National Science Foundation (sotto Grant No. DEB-1442148), il DOE Great Lakes Bioenergy Research Center (ufficio DOE di scienza BER DE-F....

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
uova di O. ribifloris sensu lato (s.l.)Kaysville, Contea di Davis, Utah, USA
Canne di OsmiaNativebees.comNACanne appena tappate Set di
dissezioneVWR89259-964Sterilizzare prima dell'uso
Pinze a becchi lunghiHusky1006
Piastre di coltura a 6 pozzettiVWR10062-892Sigillato sterile
Piastre di coltura a 48 pozzettiVWR10062-898Piastre di Petri sterili sigillate
VWR25373100Sterili sigillate
Barche di pesatura quadrateVWR10770-448
Spazzola in pelo di cammelloBioquip1153A
Capsule di lattaEA Materiali di consumoD1021Sterilizzare prima dell'uso
SaccarosioVWR470302-808
Propiconazolo 14.3Quali-Ppro60207-90-1Propiconazolo 14.3%
Polline d'api melliferaEnergizzato d'ape897098001244Polline grezzo non trattato, naturale e non trattato
MicrobalanceVWR10204-990
PulverisetteLAB SYNERGY INC.
Bastoncini di legnoVWR470146908Sterilizzare prima dell'uso
Nastro sigillanteVWR89097-912
MicroscopioVWR89403-384
Vassoio di seminaVWR470150-632
EtanoloVWRBDH1158-4LP
Provetta da centrifugaVWR21008936
MicrosiringaCole-PalmerUX-07940-07
Pinzetta in gommaAmazonB0135HWPN4
Aghi per siringaVWR89219-334
LiofilizzatoreLabconoLFZ-1L
Software statisticoSPSSVersione 21.0
30334913

Riferimenti

  1. Klein, A. -M., et al. Importance of pollinators in changing landscapes for world crops. P Roy Soc Lond B Bio. 274 (1608), 303-313 (2007).
  2. Biesmeijer, J. C. J., et al. Parallel declines in pollinators and insect-pollinated plants in Britain ....

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Ristampe e permessi

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