塩化第二鉄によるイヌ総頚動脈血栓症: 血管損傷の大動物モデル
Summary
大型動物の血管損傷モデルの利用にも特徴とし、一般的に使用される小さな動物塩化第二鉄誘起 (した FeCl3) 頚動脈損傷モデルに必要な変更を紹介します。予防、血栓溶解の薬理学的・機械的介入の前臨床試験評価のため、結果として得られるモデルを利用できます。
Abstract
世界的に、毎年、虚血性脳卒中や心筋梗塞につながる閉塞性動脈血栓症が 1300 万の死に貢献します。ここでは、我々 は大規模な動物 (犬) に予防や血栓溶解剤の前臨床スクリーニングのため使用することができますわずかな修正と小動物から血管損傷モデルを翻訳しています。手術方法に加えては、修正されたプロトコルは、脳と頚動脈を確認する組織学的解析のための頚動脈の両方を処理するための詳細な手順について、血管造影による頸動脈運河を評価するためにステップバイ ステップ方法をについて説明します。運河と、脳出血や磁気共鳴画像 (MRI) を用いて下流の血栓塞栓イベントの評価を完了するための特定のパラメーター。さらに、大規模な動物 (犬) の血管損傷に翻訳する必要以前老舗の小さな動物モデルから特定の手順の変更を説明します。
Introduction
主な理由は心血管系疾患での介入は薬物療法と血管内治療介入1によく反応が主、脳卒中治療は冠動脈疾患治療後モデル化します。これらの治療法は、しかしが適切に変換できなかった脳梗塞に。現在の脳卒中治療の難しさは、遺伝子組換え組織プラスミノーゲン活性化因子 (当社) が逆ことはできませんと出血性変換2,3,の重大な 6.4% リスクを管理に運ぶ4. 結果罹患率と死亡率はしばしば実現不可能の小さいウィンドウ5の使用を制限します。また、閉塞と再狭窄発生初期の神経学的改善を逆転させる初期の血栓溶解療法後しばしば。要約すると、虚血性脳血管障害の侮辱に苦しむ患者の大多数 (~ 90%) を除く当社を管理する狭い時間窓があります。
静脈内投与の抗血小板療法の役割は、改良された血管再開通、生存の結果2と虚血性脳卒中の治療に約束を示しています。残念ながら、これらの薬内頭蓋と余分な頭蓋内出血の予測可能な副作用を持って、主な理由は十分にする方法はありませんが逆にまたは彼らの活動2を制御します。血小板凝集を防止に効果的な中の出血とその活動を逆にすることができないリスクが脳卒中患者ケア ルーチンでの使用を排除します。必要がある、したがって、単独または組み合わせを防止し、血栓を溶解する作用はまだ出血が容認されて悪い、脳など閉鎖、低ボリュームの領域で使用できるようになります安全性プロファイルを持っている強力な抗血栓薬の存在します。
動脈血栓症と再狭窄のメカニズムを理解し、血栓溶解剤との再狭窄を防ぐ薬の評価は、前臨床試験の医薬品開発の一部として両方の小規模および大規模な動物モデルを必要があります。塩化第二鉄による血管障害は迅速かつ正確には、マウス、ラット、モルモット、露出血管の血栓の形成を誘導するために広く利用技術、ウサギ6,7,8,9,10,11,12. これらの小さい種が遺伝的操作、安価な動物購入および低日当住宅費の使いやすさを含むいくつかの利点を提供します。残念ながら、小動物実験は、術中アクセス血小板反応性、血液ガス分析、および炎症性応答に複数の血の描画を否定します。もっと重要なは、大型の動物は大いにもっと密接にひと血小板生理6,13を模倣します。血栓症の病態生理の研究、新規抗血小板剤や抗凝固薬の検証および潜在的な血栓溶解剤6の発見した FeCl3頚動脈損傷モデルは支配的な役割を果たしています。,7,8,9,10,11,12です前モデルのマウス、ラット、モルモット、ウサギは、使いやすさと遺伝的操作の柔軟性を提供している、翻訳可能な前臨床モデル、潜在的な治療6 の患者の投与と毒性の研究に重要な。 ,13。血栓性疾患のいくつかのモデルは、マウス、血栓症の末梢血管疾患に適用される大型の動物モデルで開発されている心筋梗塞や脳卒中はいくつかと遠い。猿、犬、豚で最初の血栓症モデルは狭窄、船舶、一般流の周期性削減14,15,16の結果に止血剤と後シリンダーを適用することに焦点を当てた。塩化第二鉄のモデルのように血管内皮細胞障害のサイトにて閉塞性血栓、代わりにこれらのモデル内の血栓は繰返し血栓症、遠位部塞栓に起因した、通常の血流に戻る。比較では、塩化第二鉄モデル大型動物は、損傷部位の閉塞血栓の結果でここで変更安定化及び血栓溶解治療前に血管造影を行いです。Diem、イヌ科動物および十分な外科的専門知識の購入あたり私たちの詳細ここで血栓症を手術、イメージングおよび組織学的利用を研究する研究所を許可するように血管損傷の大きい犬モデルの調査官が潤沢な資金供給を持ってテクニック。
Protocol
Representative Results
Discussion
した FeCl3誘導血管損傷モデル小動物における血栓症の研究に用い、利点の多数の大きい動物、臨床前モデルに変換するは簡単です。プロトコルを犬に合わせて若干の変更により薬理学的介入とする前に、容器の衛生を評価するために血管造影後の脳卒中と出血のボリュームを評価するために両方の磁気共鳴イメージングの利用中に、後の治療。他の血栓の大動物モデル損傷部位で安?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
認知と行動の脳開発を犬の磁気共鳴イメージングを実行する彼らの財務および科学サポートのオハイオ州立大学で中心を感謝したいと思います。
Materials
| 1/8” umbilical tape | Jorgensen Laboratories Inc., | #J0025UA | for ferric chloride application |
| 4% paraformaldehyde in PBS | Alfa Aesar | AAJ61899AP | |
| 10% neutral buffered formalin | Richard-Allan Scientific | 5701 | |
| 2% 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC in PBS, pH 7.4) | Sigma Aldrich | T8877 | |
| ADP/Collagen cartridges | Siemens Diagnostics | B417021A | |
| 4.5 ml 3.2% sodium citrate blood vacutainer | Becton Dickinson | BD 369714 | |
| 4.5 ml lithium heparin vacutainer | Becton Dickinson | BD 368056 | |
| EDTA K3 vacutainers | Becton Dickinson | BD455036 | |
| Doppler flow probe | Transonic Systems Inc | MA2.5PSL | |
| Hematoxylin 560 | Surgipath | 3801570 | |
| Eosin | Surgipath | 3801602 | |
| LabChart Software | ADInstruments Inc. | ||
| Prisma Fit 3 tesla (3T) magnet | Siemen's Diagnostics | ||
| Sodium heparin for injection (to coat blood gas syringe) | NovaPlus | 402525D | |
| HUG-U-VAC positioning system | DRE Veterinary | 1320 |
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