Burada sunulan amfizem bir fare modeli akciğer örneklerinin histolojik değerlendirilmesi için istikrarlı bir durum oluşturur akciğer fiksasyonu için yararlı bir protokoldür. Bu modelin ana avantajı akciğer çökmesi veya deflasyon olmadan aynı sabit basınç ile birçok akciğer düzeltebilirsiniz.
Amfizem kronik obstrüktif akciğer hastalığının (KOAH) önemli bir özelliğidir. Amfizematöz fare modelini içeren çalışmalar, akciğerin güvenilir histolojik örneklerini üretmek için optimum akciğer fiksasyonu gerektirir. Akciğerin büyük ölçüde hava ve dokudan oluşan yapısal bileşiminin doğası nedeniyle, fiksasyon işlemi sırasında çökme veya sönme riski vardır. Her biri kendi avantajları ve dezavantajları olan çeşitli akciğer fiksasyon yöntemleri vardır. Burada sunulan akciğer fiksasyon yöntemi, amfizematöz fare akciğer modeli kullanılarak yapılan çalışmalarda optimal doku değerlendirmesini sağlamak için sabit basınç kullanır. Ana avantajı aynı anda aynı durumda birçok akciğer leri düzeltebilirsiniz. Akciğer örnekleri kronik sigara dumana maruz fareler elde edilir. Akciğer fiksasyonu, sabit basınç üretimine olanak sağlayan özel ekipmanlar kullanılarak gerçekleştirilir. Bu sabit basınç makul şişirilmiş durumda akciğer korur. Böylece, bu yöntem sigara dumanı kaynaklı hafif amfizem değerlendirmek için uygun akciğer histolojik bir örnek oluşturur.
KOAH ölüm dünya çapında önde gelen nedenlerinden biridir1. Sigara dumanı KOAH’ın en önemli nedenidir, ancak patogenez mekanizmaları tam olarak tanımlanmış değildir. KOAH, hava akımının ilerleyici sınırlandırılması ve akciğerin anormal inflamatuar yanıtı da dahil olmak üzere iki ana özelliği göstermektedir. Amfizematöz bozukluk KOAH hastalarının akciğerlerinde sıklıkla görülür2. Amfizemin patolojik bulguları alveoler duvar yıkımı ile karakterizedir3. Çeşitli hayvan türleri vivo (yani, köpekler, kobay, maymun ve kemirgenler)4KOAH modelleri oluşturmak için kullanılmıştır. Ancak, fare koah modellerinin yapımında en sık kullanılan hale gelmiştir. Bu düşük maliyet de dahil olmak üzere birçok avantajı vardır, genetik olarak değiştirilmiş olma yeteneği, geniş genomik bilgi kullanılabilirliği, antikorların kullanılabilirliği, ve fare suşları çeşitli kullanma yeteneği5. Şu anda, insan KOAH tam özelliklerini taklit edebilir hiçbir fare modeli yoktur; böylece, bireysel araştırmacılar hangi modelin spesifik KOAH araştırma6için en uygun olduğunu seçmelisiniz. Amfizematöz fare modeli şu anda mevcut olan birçok KOAH fare modellerinden biridir. Ek modeller alevlenme fare modeli, sistemik ko-morbidite modeli ve KOAH duyarlılık modeli7içerir.
Amfizematöz fare modeli kimyasal ajanlar ve sigara dumanına maruz kalma dahil olmak üzere eksojen ajanlar çeşitli tarafından oluşturulabilir4. Kimyasal maruziyet (örneğin, elastaz) amfizem ciddi bir tür üretir, sigara dumanı hafif amfizem8sonuçları ise,9. Sigara dumanının KOAH patogenezinin ana nedeni olduğuna inanılmaktadır; bu nedenle, bir KOAH fare modeli oluşturmak için bir araç olarak sigara dumanı seçimi makul10. Birçok çalışma fare amfizem oluşturmak için sigara dumanı kullandık. Örneğin, Nikula ve ark. başarıyla 7 veya 13 ay11için sigara dumanı onları maruz bırakarak B6C3F1 dişi fareler bir amfizemtous fare modeli oluşturdu. Biz de senescence marker protein / SMP-30 KO fareler12ile bir amfizematöz fare modeli kurduk. Bu düzgün sigara dumanı maruz kalma ile bu hafif amfizem modeli görselleştirebilirsiniz bir akciğer fiksasyon yöntemi gerçekleştirmek için çok önemlidir.
Akciğer fiksasyonu için çeşitli yöntemler oluşturulmuştur13. Ancak, amfizem14değerlendirmek için akciğer dokusu fiksasyonu hiçbir altın standart yöntemi yoktur. Bu laboratuvardan çeşitli çalışmalar burada sunulan fiksasyon sistemi amfizem 12 ,15,16,17,18değerlendirmek için istikrarlı bir durum oluşturarak yararlı olduğunu göstermiştir. Mevcut sistemin en büyük avantajı akciğer çökmesi veya deflasyon olmadan aynı anda aynı durumda birçok akciğer düzeltebilirsiniz. Mevcut akciğer fiksasyon sistemi, akciğer örneklerinin belirli bir süre için uygun bir sabit basınçta şişirilmesine olanak tanıyan bazı özel ekipmanlar kullanır. Bu özel ekipman, bir alt konteyner, üst konteyner ve pompa da dahil olmak üzere üç bölümden oluşur. Akciğer numuneleri basınçlı sabitleme ajanlarına bağlı alt konteyneriçine yerleştirilir ve üst ve alt kaplar arasındaki ajan düzeyinde 25 cmH2O basınç farkı19’dur.
Burada sunulan kemirgen akciğerler için fiksasyon prosedürü yeni değildir; ancak, bu sistemin çeşitli avantajları vardır. İlk olarak, birçok akciğer (maksimum 20) aynı anda aynı durum ile düzeltebilirsiniz. Toksikolojik Patoloji Derneği yerçekimi aşılama baskısının 22-25 cmH2O22arasında değiştiğini belirtir. Özellikle, çeşitli çalışmalar 25 cmH2O13,19,23,<sup class…
The authors have nothing to disclose.
Bu çalışma kısmen JSPS KAKENHI Grant Number 26461199 (T. Sato) ve Çevre ve Cinsiyete Özel Tıp Enstitüsü, Juntendo Üniversitesi Tıp Fakültesi, Hibe Numarası E2920 (T. Sato) tarafından desteklenmiştir. Funder’ın mevcut yöntemlerin tasarımında ve el yazmasının yazımında hiçbir rolü yoktu.
10% formalin (formalin neutral buffer solution) | Wako | 060-01667 | |
Bent forceps | Hammacher | HSC187-11 | |
Cannula, size 20G | Terumo | SR-FS2032 | |
Cannula, size 22G | Terumo | SR-OT2225C | Cannula to exsanguinate lung |
Forceps | Hammacher | HSC184-10 | |
Kimtowel | Nippon Paper Crecia (Kimberly Clark) | 61000 | |
Kimwipe | Nippon Paper Crecia (Kimberly Clark) | 62011 | |
Lower container (acrylic glass material) | Tokyo Science | Custom-made | Pressure equipment component |
Roller pump | Nissin Scientific Corp | NRP-75 | Pump machine to exsanguinate lung |
Roller pump RP-2000 | Eyela (Tokyo Rikakikai Co. Ltd) | 160200 | Pressure equipment pump |
Silicone tube Ø 9 mm | Sansyo | 94-0479 | Pressure equipment component |
Somnopentyl (64.8 mg/mL) | Kyoritsu Seiyaku | SOM02-YA1312 | Pentobarbital Sodium |
Surgical scissor | Hammacher | HSB014-11 | |
Suture thread, size 0 | Nescosuture | GA01SW | |
Syringe, 1 mL | Terumo | SS-01T | |
Syringe, 1 ml with needle | Terumo | SS-01T2613S | |
Syringe, 10 mL | Terumo | SS-10ESZ | |
Three-way stopcock | Terumo | TS-TR1K01 | |
Upper container (acrylic glass material) | Tokyo Science | Custom-made | Pressure equipment component |