تقييم آثار محصن من الرقم الأساسي جليسيرهيزاي et ريزوما استخراج باستخدام نموذج ماوس انسداد شريان دماغي الأوسط عابر
Summary
في هذه الدراسة، قمنا بتعديل أسلوب تجريبي موجود للحصول على المزيد من النتائج استنساخه، بوضع نموذج ماوس (ماكاو) انسداد شريان دماغي الأوسط. الإدارة عن طريق الفم من الرقم الأساسي جليسيرهيزاي et جذمور (GR) استخراج الميثانول (جر)، عقب التعريفي السكتة الدماغية، وتناقص حجم احتشاء مجموع مقارنة بمجموعة التحكم غير المعالجة.
Abstract
الاسكيمية تليها ضخه تدفق الدم الدماغي بعد السكتة دماغية يؤدي إلى موت الخلايا العصبية وفقدان أنسجة الدماغ. نموذج الحيوان الأكثر استخداماً لدراسة السكتة الدماغية هو النموذج (ماكاو) انسداد الشريان الدماغي الأوسط. وأفادت الدراسات البحثية السابقة احتشاء مختلفة الأحجام حتى عندما كان يستخدم نفس الأنواع الحيوانية التجريبية ماكاو في ظروف مماثلة. ولذلك، قمنا بتطوير طريقة تجريبية محسنة لمعالجة هذا التناقض. الفئران تعرضوا إلى ماكاو باستخدام خيوط كمادة انسداد لتقليد الشروط السكتة الدماغية البشرية وسمك الشعيرة الأمثل لإنشاء المزيد من حجم احتشاء استنساخه. استخراج الفئران تعامل مع ميثانول من الرقم الأساسي جليسيرهيزاي et جذمور (جر) عقب التعريفي السكتة الدماغية أظهرت وحدة تخزين احتشاء مجموع انخفض إلى حد كبير وزيادة عدد الباقين على قيد الحياة الخلايا مقارنة بمجموعة التحكم غير المعالجة. وهذا تعديل البروتوكول التجريبي بنجاح وتكاثر أثبتت الآثار المفيدة لجر على السكتة الدماغية.
Introduction
تلف في المخ بسبب الاسكيمية وضخه من تدفق الدم الدماغي يؤدي إلى موت الخلايا العصبية وفقدان أنسجة الدماغ. وتواصل هذا النوع من تلف الدماغ تزيد مع تزايد انتشار الأمراض المخية الوعائية نتيجة لانتشار الأمراض الأيضية مثل السمنة وارتفاع ضغط الدم ومرض البول السكري1،2. العدد المطلق للمرضى المسنين مع السكتة الدماغية زاد زيادة كبيرة في جميع أنحاء العالم، وتكلفة الرعاية الطبية لهؤلاء المرضى، الذين كثيرا ما تترك ذوي الإعاقة طويلة الأمد، عبء مجتمعية رئيسية. ولذلك، ينبغي تخفيف الإعاقات الثانوية إلى أقصى حد ممكن للحد من العبء الاقتصادي1،2.
نموذج احتشاء دماغي القوارض الأكثر استخداماً هو النموذج (ماكاو) انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCA)، التي تغطي هيئة مكافحة الاحتكارات مع خيوط سوتورينج جراحية المغلفة بالسليكون لمنع تدفق الدم، مما تسبب في إصابة بالسكتة الدماغية3، 4-استخدام خيوط من المواد انسداد يتيح مراقبة انسداد الوقت والدوام عن طريق التلاعب في مدة الإدراج داخل لومينال الشعيرة.
وقد أظهرت الدراسات السابقة أن حتى عندما يتم استخدام نفس نموذج مكاو القوارض، يختلف الحجم الإجمالي لاحتشاء الدماغية بين التجارب، مما تسبب في انخفاض إمكانية تكرار نتائج الدراسات. لتحسين إمكانية تكرار نتائج، نحن الأمثل سمك منت الشعيرة التي استخدمت في التجربة. نتائج دراسة أولية لفترة السكتة الدماغية واحتشاء المستحث أظهرت أن فترة الدماغية أطول من 60 دقيقة سمح المنطقة الحجمي لتلف أنسجة المخ مراعاتها وتقديرها كمياً.
Radix جليسيرهيزاي et ريزوما (GR)، يعرف أيضا باسم عرق السوس، وتتألف من الجذور المجففة وجذور من أورالينسيس غلابرا و العرقسوس غ. قد استخدمت في الطب التقليدي الصيني والكوري لأغراض مختلفة بما في ذلك المضافات الغذائية وطبي5،6،7.
في سابق دراسة8، معالجة المسبقة مع استخراج الميثانول الموارد الوراثية (جريكس) وأظهرت تأثير apoptotic مكافحة الفئران مكاو، بما في ذلك منع كبير من هذا الانخفاض في تعبير البروتين من سرطان الغدد الليمفاوية الخلية-ب 2 (Bcl-2) وخارج كبيرة Bcl (Bcl-xL). أجريت هذه الدراسة تحسين إمكانية تكرار نتائج نموذج الماوس ماكاو التقليدية عن طريق تقييم كفاءته في تحديد ما إذا كان العلاج ما بعد احتشاء بجر فعالية خفض حجم احتشاء في الأضرار الدماغية الناجمة عن ماكاو.
Protocol
Representative Results
Discussion
مع تزايد انتشار أمراض التمثيل الغذائي مثل ارتفاع ضغط الدم المزمن، ومرض السكري، والدهون، وعوامل الخطر الرئيسية للسكتة الدماغية، منع السكتة الدماغية والعلاج قد أصبحت مجالاً هاما للبحوث الطبية12، 13-العجز في اللغة والحركة بعد السكتة دماغية ترتبط بقوة مع درجة …
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
غير قابل للتطبيق.
Materials
| Glycyrrhizae Radix et Rhizoma | Gwangmyoung Pharmaceuticals Co., Korea | Glycyrrhizae Radix et Rhizoma | |
| Qualitative filter paper | Advantec | Filter paper No. 2 | Qualitative filter paper |
| Dimethyl sulfoxide (DMSO) | Sigma | D8418-250ML | Dimethyl sulfoxide (DMSO) |
| Syringe filter (0.45 µm) | Sigma | CLS431220 | Syringe filter (0.45 µm) |
| Stereo Microscope | Leica | M50 | Stereo Microscope |
| Stereo Microscope | Nikon | SMZ745 | Stereo Microscope |
| Laser Doppler | Moor Instrument | moorVMS-LDF | Laser Doppler |
| Anesthesia Tabletop Bracket with N2O&O2 Flowmeter System | Harvard Appratus | 34-1352 | Anesthesia Tabletop Bracket with N2O&O2 Flowmeter System |
| Homeothermic Monitoring System | Harvard Appratus | 55-7020 | Homeothermic Monitoring System |
| Digital Camera | Canon | Eos-M2 | Digital Camera |
| Cryostat | Leica | CM3050S | Cryostat |
| Microscope | Carl Zeiss | Zeiss Axio | Microscope |
| Data Analysis | Systat Software Inc. | SigmaPlot version 12 | Data Analysis |
| Data Analysis | NIH Image | ImageJ | Data Analysis |
| Mouse diet | Doo Yeol Biotech | Standard rodent chow | Mouse diet |
| Isoflurane | JOONGWAE | A02104781 | Isoflurane |
| Isoflurane | TROIKAA | ISOTROY 100 | Isoflurane |
| Silk suture (4-0 Black silk) | AILEE | SK47510 | Silk suture (4-0 Black silk) |
| Silk suture (3-0 White silk) | Baekjae | 57 | Silk suture (3-0 White silk) |
| Nylon suture (8-0 monofilament) | AILEE | NB825 | Nylon suture (8-0 monofilament) |
| 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) | Sigma | T8877-25G | 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) |
| Formalin (Formaldehyde solution) | JUNSEI | 69360-1263 20KG | Formalin (Formaldehyde solution) |
| Hematoxylin (Harris Hematoxylin) | YD Diagnostics | EasyStain | Hematoxylin (Harris Hematoxylin) |
| Eosin (1% Eosin Y Solution) | MUTO PURE CHEMICALS | 3200-2 | Eosin (1% Eosin Y Solution) |
| Cresyl violet (acetate) | Sigma | C5042-10G | Cresyl violet (acetate) |
| Paraformaldehyde | Sigma-Aldrich | P6148-1KG | Paraformaldehyde |
| Sucrose | JUNSEI | 31365-0350 1KG | Sucrose |
| Optimum cutting temperature (OCT) compound | Scigen | 4583 | Optimum cutting temperature (OCT) compound |
| Disecting Knife | Fine Science Tools | 10055-12 | Disecting Knife |
| #4 Forcep | Fine Science Tools | 11241-30 | #4 Forcep |
| #5 Forcep | Fine Science Tools | 11254-20 | #5 Forcep |
| #6 Forcep | Fine Science Tools | 11260-20 | #6 Forcep |
| #7 Fine Forcep | Fine Science Tools | 11274-20 | #7 Fine Forcep |
| Surgical Scissors | Fine Science Tools | 14001-12 | Surgical Scissors |
| Extra Fine Bonn Scissors | Fine Science Tools | 14084-08 | Extra Fine Bonn Scissors |
| Moria Pascheff-Wolff Spring Scissors | Fine Science Tools | 15371-92 | Moria Pascheff-Wolff Spring Scissors |
| Vessel Dilating Forcep | Fine Science Tools | 18153-11 | Vessel Dilating Forcep |
Riferimenti
- Bejot, Y., Delpont, B., Giroud, M. Rising stroke incidence in young adults: more epidemiological evidence, more questions to be answered. Journal of the American Heart Association. 11 (5), (2016).
- Hadadha, M., Vakili, A., Bandegi, A. R. Effect of the inhibition of hydrogen sulfide synthesis on ischemic injury and oxidative stress biomarkers in a transient model of focal cerebral ischemia in rats. Journal of Stroke and Cerebrovascular Diseases. 24 (12), 2676-2684 (2015).
- Durukan, A., Tatlisumak, T. Animal models of ischemic stroke. Article in Handbook of Clinical Neurology. 92, 43-66 (2009).
- Kim, D. Animal Models of Stroke. Brain and Neurorehabilitation. 4 (1), 1-11 (2011).
- Rizzato, G., Scalabrin, E., Radaelli, M., Capodaglio, G., Piccolo, O. A new exploration of licorice metabolome. Food Chemistry. 221, 959-968 (2017).
- Zhu, Z., et al. Rapid determination of flavonoids in licorice and comparison of three licorice species. Journal of Separation Science. 39 (3), 473-482 (2016).
- Ota, M., Mikage, M., Cai, S. Q. Herbological study on the medicinal effects of roasted licorice and honey-roasted licorice. Yakushigaku Zasshi. 50 (1), 38-45 (2015).
- Lim, C., et al. Licorice pretreatment protects against brain damage induced by middle cerebral artery occlusion in mice. Journal of Medicinal Food. 21 (5), 474-480 (2018).
- Koizumi, J. Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. Experimental studies of ischemic brain edema. Nosotchu. 8 (1), 1-8 (1986).
- Fischer, A. H., Jacobson, K. A., Rose, J., Zeller, R. Hematoxylin and eosin staining of tissue and cell sections. Cold Spring Harbor Protocols. 2008, (2008).
- Zhu, Y., Liu, F., Zou, X., Torbey, M. Comparison of unbiased estimation of neuronal number in the rat hippocampus with different staining methods. Journal of Neuroscience Methods. 254, 73-79 (2005).
- Alberts, M. J., Ovbiagele, B. Current strategies for ischemic stroke prevention: role of multimodal combination therapies. Journal of Neurology. 254 (10), 1414-1426 (2007).
- Pinto, A., Tuttolomondo, A., Di Raimondo, D., Fernandez, P., Licata, G. Cerebrovascular risk factors and clinical classification of strokes. Seminars in Vascular Medicine. 4 (3), 287-303 (2004).
- Barlow, S. J. Identifying the brain regions associated with acute spasticity in patients diagnosed with an ischemic stroke. Somatosensory and Motor Research. 33 (2), 1-8 (2016).
- Roth, S., Liesz, A. Stroke research at the crossroads – where are we heading. Swiss Medical Weekly. 146, 14329 (2016).
- Feuerstein, G. Z., Wang, X. Animal models of stroke. Molecular Medicine Today. 6 (3), 133-135 (2000).
- Herson, P. S., Traystman, R. J. Animal models of stroke: translational potential at present and in 2050. Future Neurology. 9 (5), 541-551 (2014).
- Kumar, A., Gupta Aakriti, V. A review on animal models of stroke: an update. Brain Research Bulletin. 122, 35-44 (2016).
- O’Collins, V. E., Donnan, G. A., Howells, D. W. History of animal models of stroke. International Journal of Stroke. 6 (1), 77-78 (2011).
- Ji, S., et al. Bioactive constituents of Glycyrrhiza uralensis (licorice): discovery of the effective components of a traditional herbal medicine. Journal of Natural Products. 79 (2), 281-292 (2016).
- Yang, R., Wang, L. Q., Yuan, B. C., Liu, Y. The pharmacological activities of licorice. Planta Medica. 81 (18), 1654-1669 (2015).
- Yang, R., Yuan, B. C., Ma, Y. S., Zhou, S., Liu, Y. The anti-inflammatory activity of licorice, a widely used Chinese herb. Pharmaceutical Biology. 55 (1), 5-18 (2017).
