Glycyrrhizae Radix nöroprotektif etkilerinin değerlendirilmesi et Rhizoma ekstresi kullanarak bir geçici orta serebral arter tıkanıklığı fare modeli
Summary
Bu çalışmada, bir orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) fare modeli kurarak daha tekrarlanabilir sonuçlar elde etmek için varolan deneysel yöntemini değiştirmek. Glycyrrhizae Radix, sözlü yönetimi et köksap (GR) metanol özü (GRex), kontur indüksiyon, takip toplam infarktüsü cilt tedavi edilmemiş kontrol grubuna göre önemli ölçüde azalmıştır.
Abstract
İskemi kalp krizi sonra serebral kan akımı reperfüzyon takip sinir hücrelerinin ölüm ve beyin doku kaybına yol açar. Kontur çalışmak için en sık kullanılan hayvan modeli orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) modelidir. Hatta aynı deneysel hayvan türleri benzer MCAO koşullar altında kullanıldığında önceki araştırma çalışmaları farklı enfarktüsü boyutları bildirdi. Bu nedenle, bu tutarsızlık yönelik olarak geliştirilmiş bir deneysel yöntem geliştirdik. Fareler bir filament tıkanıklığı malzemesi olarak insan kontur koşulları taklit kullanarak MCAO tabi tutuldu ve filament kalınlığı daha tekrarlanabilir infarktüsü birim kurmak için optimize edildi. Metanol ile tedavi fareler ayıklamak Glycyrrhizae sayı tabanı et kontur indüksiyon takip köksap (GRex) önemli ölçüde azalan toplam infarktüsü birim gösterdi ve hayatta kalma artan sayı hücreleri tedavi edilmemiş kontrol grubuna göre. Bu Deneysel protokol başarıyla değiştirildi ve tekrarlanarak iskemik inme faydalı GRex etkisini gösterdi.
Introduction
Beyin hasar iskemi ve reperfüzyon serebral kan akımı neden sinir hücrelerinin ölüm ve beyin doku kaybına yol açar. Bu tür bir beyin hasarı serebrovasküler hastalıklar obezite, hipertansiyon ve diyabet1,2gibi metabolik hastalıkların yayılması nedeniyle artan yaygınlığı ile artmaya devam ediyor. Yaşlı hastalarda inme ile kesin sayısı dünya çapında önemli ölçüde artmıştır ve uzun vadeli Engelli kez bırakan bu hastalar için tıbbi bakım maliyeti büyük bir toplumsal yüktür. Bu nedenle, ikincil Engelli ekonomik yük1,2azaltmak mümkün olduğu kadar hafifletilmiş.
En sık kullanılan kemirgen beyin enfarktüsü içinde iskemik inme3, neden olan kan akışını engellemek için bir silikon kaplı Cerrahi dikiş filaman ile MCA tıkandı orta serebral arter (MCA) tıkanıklığı (MCAO) modeli modeldir 4. tıkanıklığı malzeme içi luminal filaman ekleme süresi işleyerek tıkanıklığı zaman ve kalıcılığı kontrol sağlar gibi bir filament kullanarak.
Önceki çalışmalar, aynı kemirgen MCAO model kullanıldığında bile beyin enfarktüsü hacmi düşük tekrarlanabilirlik çalışmaların neden deneyler arasında değişir göstermiştir. Tekrarlanabilirlik artırmak için deneyde kullanılan filaman nane kalınlığı optimize. Serebral iskemik dönemi ve 60 dk uzun bir iskemik süre hacimsel bölgesinin izin gösterdi indüklenen infarktüsü ön bir çalışmanın sonuçlarını gözlenen ve sayısal beyin dokusuna zarar görmüş.
Glycyrrhizae Radix et Rhizoma (GR), olarak da bilinen meyan kökü kurutulmuş kök ve Glycyrrhiza uralensis köksaplar oluşur ve G. glabra. Bu Çin ve Kore geleneksel tıpta bir gıda katkı maddesi ve5,6,7olarak medicinally dahil olmak üzere çeşitli amaçlarla kullanılmıştır.
Bir önceki çalışmada8GR metanol özü (GRex) MCAO farelerde bir anti-apoptotik etki gösterdi ile ön arıtma önemli önlenmesi B hücreli lenfoma 2 protein ifadesi azalma (Bcl-2) ve Bcl ekstra büyük (Bcl-xL) dahil olmak üzere. Bu çalışma sonrası enfarktüsü tedavi GRex ile etkili bir şekilde MCAO bağlı serebral hasar enfarktüsü hacmindeki azaltılmış Eğer belirlemede verimlilik değerlendirerek tekrarlanabilirlik geleneksel MCAO fare modeli geliştirmek için yapılmıştır.
Protocol
Representative Results
Discussion
Metabolik hastalıklar gibi kronik hipertansiyon, şeker hastalığı ve hiperlipidemi, kontur için büyük risk faktörleri olan artan yaygınlığı ile inme önleme ve tedavi tıbbi araştırma12, önemli bir alan haline gelmiştir 13. dil ve hareketi kalp krizi sonrası açıkları şiddetle doku14 beyin kalmasına ve yoksul bir yaşam kalitesi hastalar ve onların aileleri15için hasar derecesi ile ilişkili. …
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Geçerli değildir.
Materials
| Glycyrrhizae Radix et Rhizoma | Gwangmyoung Pharmaceuticals Co., Korea | Glycyrrhizae Radix et Rhizoma | |
| Qualitative filter paper | Advantec | Filter paper No. 2 | Qualitative filter paper |
| Dimethyl sulfoxide (DMSO) | Sigma | D8418-250ML | Dimethyl sulfoxide (DMSO) |
| Syringe filter (0.45 µm) | Sigma | CLS431220 | Syringe filter (0.45 µm) |
| Stereo Microscope | Leica | M50 | Stereo Microscope |
| Stereo Microscope | Nikon | SMZ745 | Stereo Microscope |
| Laser Doppler | Moor Instrument | moorVMS-LDF | Laser Doppler |
| Anesthesia Tabletop Bracket with N2O&O2 Flowmeter System | Harvard Appratus | 34-1352 | Anesthesia Tabletop Bracket with N2O&O2 Flowmeter System |
| Homeothermic Monitoring System | Harvard Appratus | 55-7020 | Homeothermic Monitoring System |
| Digital Camera | Canon | Eos-M2 | Digital Camera |
| Cryostat | Leica | CM3050S | Cryostat |
| Microscope | Carl Zeiss | Zeiss Axio | Microscope |
| Data Analysis | Systat Software Inc. | SigmaPlot version 12 | Data Analysis |
| Data Analysis | NIH Image | ImageJ | Data Analysis |
| Mouse diet | Doo Yeol Biotech | Standard rodent chow | Mouse diet |
| Isoflurane | JOONGWAE | A02104781 | Isoflurane |
| Isoflurane | TROIKAA | ISOTROY 100 | Isoflurane |
| Silk suture (4-0 Black silk) | AILEE | SK47510 | Silk suture (4-0 Black silk) |
| Silk suture (3-0 White silk) | Baekjae | 57 | Silk suture (3-0 White silk) |
| Nylon suture (8-0 monofilament) | AILEE | NB825 | Nylon suture (8-0 monofilament) |
| 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) | Sigma | T8877-25G | 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) |
| Formalin (Formaldehyde solution) | JUNSEI | 69360-1263 20KG | Formalin (Formaldehyde solution) |
| Hematoxylin (Harris Hematoxylin) | YD Diagnostics | EasyStain | Hematoxylin (Harris Hematoxylin) |
| Eosin (1% Eosin Y Solution) | MUTO PURE CHEMICALS | 3200-2 | Eosin (1% Eosin Y Solution) |
| Cresyl violet (acetate) | Sigma | C5042-10G | Cresyl violet (acetate) |
| Paraformaldehyde | Sigma-Aldrich | P6148-1KG | Paraformaldehyde |
| Sucrose | JUNSEI | 31365-0350 1KG | Sucrose |
| Optimum cutting temperature (OCT) compound | Scigen | 4583 | Optimum cutting temperature (OCT) compound |
| Disecting Knife | Fine Science Tools | 10055-12 | Disecting Knife |
| #4 Forcep | Fine Science Tools | 11241-30 | #4 Forcep |
| #5 Forcep | Fine Science Tools | 11254-20 | #5 Forcep |
| #6 Forcep | Fine Science Tools | 11260-20 | #6 Forcep |
| #7 Fine Forcep | Fine Science Tools | 11274-20 | #7 Fine Forcep |
| Surgical Scissors | Fine Science Tools | 14001-12 | Surgical Scissors |
| Extra Fine Bonn Scissors | Fine Science Tools | 14084-08 | Extra Fine Bonn Scissors |
| Moria Pascheff-Wolff Spring Scissors | Fine Science Tools | 15371-92 | Moria Pascheff-Wolff Spring Scissors |
| Vessel Dilating Forcep | Fine Science Tools | 18153-11 | Vessel Dilating Forcep |
Riferimenti
- Bejot, Y., Delpont, B., Giroud, M. Rising stroke incidence in young adults: more epidemiological evidence, more questions to be answered. Journal of the American Heart Association. 11 (5), (2016).
- Hadadha, M., Vakili, A., Bandegi, A. R. Effect of the inhibition of hydrogen sulfide synthesis on ischemic injury and oxidative stress biomarkers in a transient model of focal cerebral ischemia in rats. Journal of Stroke and Cerebrovascular Diseases. 24 (12), 2676-2684 (2015).
- Durukan, A., Tatlisumak, T. Animal models of ischemic stroke. Article in Handbook of Clinical Neurology. 92, 43-66 (2009).
- Kim, D. Animal Models of Stroke. Brain and Neurorehabilitation. 4 (1), 1-11 (2011).
- Rizzato, G., Scalabrin, E., Radaelli, M., Capodaglio, G., Piccolo, O. A new exploration of licorice metabolome. Food Chemistry. 221, 959-968 (2017).
- Zhu, Z., et al. Rapid determination of flavonoids in licorice and comparison of three licorice species. Journal of Separation Science. 39 (3), 473-482 (2016).
- Ota, M., Mikage, M., Cai, S. Q. Herbological study on the medicinal effects of roasted licorice and honey-roasted licorice. Yakushigaku Zasshi. 50 (1), 38-45 (2015).
- Lim, C., et al. Licorice pretreatment protects against brain damage induced by middle cerebral artery occlusion in mice. Journal of Medicinal Food. 21 (5), 474-480 (2018).
- Koizumi, J. Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. Experimental studies of ischemic brain edema. Nosotchu. 8 (1), 1-8 (1986).
- Fischer, A. H., Jacobson, K. A., Rose, J., Zeller, R. Hematoxylin and eosin staining of tissue and cell sections. Cold Spring Harbor Protocols. 2008, (2008).
- Zhu, Y., Liu, F., Zou, X., Torbey, M. Comparison of unbiased estimation of neuronal number in the rat hippocampus with different staining methods. Journal of Neuroscience Methods. 254, 73-79 (2005).
- Alberts, M. J., Ovbiagele, B. Current strategies for ischemic stroke prevention: role of multimodal combination therapies. Journal of Neurology. 254 (10), 1414-1426 (2007).
- Pinto, A., Tuttolomondo, A., Di Raimondo, D., Fernandez, P., Licata, G. Cerebrovascular risk factors and clinical classification of strokes. Seminars in Vascular Medicine. 4 (3), 287-303 (2004).
- Barlow, S. J. Identifying the brain regions associated with acute spasticity in patients diagnosed with an ischemic stroke. Somatosensory and Motor Research. 33 (2), 1-8 (2016).
- Roth, S., Liesz, A. Stroke research at the crossroads – where are we heading. Swiss Medical Weekly. 146, 14329 (2016).
- Feuerstein, G. Z., Wang, X. Animal models of stroke. Molecular Medicine Today. 6 (3), 133-135 (2000).
- Herson, P. S., Traystman, R. J. Animal models of stroke: translational potential at present and in 2050. Future Neurology. 9 (5), 541-551 (2014).
- Kumar, A., Gupta Aakriti, V. A review on animal models of stroke: an update. Brain Research Bulletin. 122, 35-44 (2016).
- O’Collins, V. E., Donnan, G. A., Howells, D. W. History of animal models of stroke. International Journal of Stroke. 6 (1), 77-78 (2011).
- Ji, S., et al. Bioactive constituents of Glycyrrhiza uralensis (licorice): discovery of the effective components of a traditional herbal medicine. Journal of Natural Products. 79 (2), 281-292 (2016).
- Yang, R., Wang, L. Q., Yuan, B. C., Liu, Y. The pharmacological activities of licorice. Planta Medica. 81 (18), 1654-1669 (2015).
- Yang, R., Yuan, B. C., Ma, Y. S., Zhou, S., Liu, Y. The anti-inflammatory activity of licorice, a widely used Chinese herb. Pharmaceutical Biology. 55 (1), 5-18 (2017).
